5 功能
着色劑
7 質量規格要求
7.1 1.生產工藝
以桑葉或者蠶沙提取的葉綠素與氯化銅爲原料反應製得的食品添加劑葉綠素銅。
7.2 2.技術要求
2.1感官要求:應符合表1的規定。
表1 感官要求
2.2技術要求:應符合表2的規定。
表2 理化指標
8 附錄A 檢驗方法
8.1 A.1 安全警示
試驗方法規定的一些試驗過程可能導致危險情況。操作者應採取適當的安全和防護措施。
8.2 A.2 一般規定
本標準所用試劑和水,在沒有註明其他要求時,均指分析純試劑和GB/T 6682—2008中規定的三級水。試驗中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、製劑及製品,在沒有註明其他要求時,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的規定製備。試驗中所用溶液在未註明用何種溶劑配製時,均指水溶液。
8.3 A.3 鑑別試驗
A.3.1 物理性狀
易溶於乙醚、丙酮和食用油等有機溶劑,不溶於水。水溶液呈綠色。溶解前帶有葉綠素特有的臭味。
A.3.2 吸收峯的測定
取A.4.3.1 葉綠素含量測定中的試樣液,試樣液在405nm±3nm 和630nm±3nm 的兩個波長範圍內均有最大吸收峯。
A.3.3 銅離子試驗
稱取1 g 試樣,置於已在800℃±25℃下灼燒至恆重的坩堝中,緩緩加熱直至試樣完全碳化。將碳化的試樣冷卻,用0.5 mL~1 mL 硫酸潤溼殘渣,繼續加熱至硫酸蒸汽逸盡,並在800℃±25℃的高溫爐中灼燒殘渣至恆重。在殘渣中加入10mL 鹽酸溶液(1+3),在水浴上加熱溶解,過濾後濾液補充水至10mL。取5mL 此濾液,加入0.5mL二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液(1g/ L),產生褐紅色沉澱。
8.4 A.4 葉綠素含量及吸光比的測定
A.4.1 試劑和材料
A.4.1.1乙醚。
A.4.1.2 0.15mol/L磷酸氫二鈉溶液:稱取53.7g磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),加水溶解,稀釋並定容至1000mL。
A.4.1.3 0.15mol/L磷酸二氫鉀溶液:稱取20.4g磷酸二氫鉀(KH2PO4),加水溶解,稀釋並定容至1000mL。
A.4.1.4磷酸鹽緩衝液(pH7.5):取21份0.15mol/L磷酸氫二鈉溶液與4份0.15mol/L磷酸二氫鉀溶液混合。
A.4.2 儀器和設備
分光光度計。
A.4.3 分析步驟
A.4.3.1 試樣液製備
稱取樣品約1g(精確至0.000 2g)於小燒杯中,用適量無水乙醚(50mL~60mL)使之溶解,移於錐形瓶中,加入A液1mL,在50℃±2℃恆溫水浴中加熱迴流15min;取下後再加入B液2mL,搖勻,繼續迴流20min;取下後冷卻,加入少量水,搖勻,移入分液漏斗中;再用適量水分次洗滌錐形瓶瓶,洗液一併置於分液漏斗中,充分振搖後放置1h。
另準備一個預先盛有40mL無水乙醚的分液漏斗。待第一個分液漏斗中的液體分層後,將下層液體濾入該分液漏斗中,下層液體棄掉。濾紙用水洗滌數次至幾乎無色,洗滌液併入第二個分液漏斗。
輕搖第二個分液漏斗進行提取,用水重複洗滌至乙醚層無色,靜置15min,將下層溶液移入到250mL的容量瓶中,加水稀釋到刻度,搖勻。精密量取1mL於50mL容量瓶中,用磷酸鹽緩衝液(pH7.5)稀釋至刻度,搖勻,即爲試樣液。
A.4.3.2 測定
取試樣液置於1 cm 比色皿中,以磷酸鹽緩衝液(pH7.5)做空白對照,用分光光度計在405nm±3nm 和630nm±3nm波長處測定吸光度。
A.4.4 結果計算
A.4.4.1葉綠素含量的質量分數w,按公式(A.1)計算:
式中:
E1 ——實際測定的試樣液在405 nm±3nm波長處的吸光度;
m ——樣品質量,g;
565 ——葉綠素的吸光係數;
12500——樣品稀釋倍數。
A.4.4.2吸光比以A計,按公式(A.2)計算:
式中:
E1——試樣液在405 nm±3nm波長處測得的吸光度;
E2——試樣液在630 nm±3nm波長處測得的吸光度。
實驗結果以平行測定結果的算術平均值爲準。在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的2 %。
8.5 A.5 總銅含量
準確稱取0.1g 試樣,精確至0.000 2g,置於硅皿中,在不超過500℃下灼燒至無碳,用1滴~2滴硫酸溼潤,再次灼燒。用質量分數爲10%的鹽酸溶液分3 次(每次5mL)煮沸溶解灰分,並過濾於100mL 容量瓶中,冷卻後用水定容至刻度,此爲試樣液。除試樣處理外,其他步驟按GB/T 5009.13規定的方法測定。
8.6 A.6 遊離銅含量
試樣處理:稱取約0.1g樣品,精確至0.000 2g,用20mL無水乙醚溶解於錐形瓶中,加水100mL,蓋塞,振搖1min,移入125mL分液漏斗中,靜置30min,將分液漏斗中的下層水溶液用雙層定性濾紙過濾,如果濾液有顏色,再次用雙層定性濾紙過濾,濾液即爲試樣液。
除試樣處理外,其他步驟按GB/T 5009.13規定的方法測定。
8.7 A.7 丙酮溶劑殘留
按照《中國藥典2010版二部》附錄Ⅷ P“殘留溶劑測定法”進行測定。