1 概述
與粒細胞有相同的祖細胞,成熟的單核細胞釋放入血。但實際上單核細胞並未完全成熟,在血中約停留3~16天后就進入組織繼續發育成爲巨噬細胞(macrophages),血中和組織中的巨噬細胞構成單核吞噬細胞系統。
3 單核細胞計數的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 單核細胞計數的測定原理
單核細胞具有強烈的非特異性酯酶活性,在酸性條件下,可將稀釋液中α醋酸萘酯水解,產生α萘酚,並與六偶氮副品紅結合成穩定的紅色化合物,沉積於單核細胞內,與其他白細胞區別。將血液稀釋一定倍數,然後滴入計數盤內,計一定範圍內細胞數,可計算每升血液中單核細胞數。
3.4 試劑
下述瑞氏-姬姆薩複合試劑或快速染液可任選一種。
(1)瑞氏-姬姆薩複合染色液:甲液:取瑞氏染粉1g,姬姆薩染粉0.3g,置乾燥清潔研鉢中,另備甲醇(不含水或丙酮)500ml分數次加少量甲醇研磨,分次收集於棕色玻璃瓶中,每天早晚各搖勻3min,經1周後即可應用。乙液(磷酸緩衝液)(pH值6.8~7.0):磷酸二氫鉀(無水)0.3g,磷酸氫二鈉(無水)0.2g,加適量水溶解,校正pH值,加水至1L,可加入0.01%TritonX-100改善染色性。
(2)快速染液甲液:取磷酸二氫鉀6.64g,磷酸氫二鈉2.56g,水溶性伊紅4g(或伊紅B2.5g)加水1L,酚40ml。乙液:亞甲藍4g,高錳酸鉀2.4g,水1L,煮沸,冷後備用。
3.5 操作方法
(1)採血1小滴於載玻片一端,用一推片以35°~45°傾斜推出四周留有適量空隙,可分清頭、體、尾的薄血片。血膜長度不少於2.5cm,末梢至玻片另一端尚餘空隙約1cm。血膜幹後染色。
(2)瑞氏姬姆薩複合染色法:平置血片於染色架上,加染色液3~5滴,立即蓋滿血膜,約30s後加緩衝液5~10滴,輕輕搖動玻片或輕輕吹氣使染液與緩衝液混和,5~10min後用水衝去染液,待幹後鏡檢。
(3)快速法:將快速染液甲液、乙液分別置於適當大小染色缸中,將血片先浸入甲液30s,水洗,再浸入乙液30s,水洗,待幹後鏡檢。
(4)鏡檢:選擇血膜體尾交界處,紅細胞已基本不相重疊之處用油鏡檢查,檢查應上下左右有一定方向,並顧及血膜長徑兩側邊緣,否則影響各類細胞的檢出率。計數100~200個白細胞,按其形態分類,並求出百分率。
3.6 正常值
血細胞自動計數儀:(0.04~0.07)×109/L (40~70/mm3)。
3.7 化驗結果臨牀意義
單核細胞增多:
(1)感染:肺結核病活動期或惡化期、亞急性細菌性心內膜炎、傳染性單核細胞增多症、痘瘡、水痘、麻疹、流行性腮腺炎、鉤端螺旋體病、猩紅熱、原蟲性疾病(瘧疾、黑熱病、立克次體病)等。
(2)血液病:慢性單核細胞性白血病、霍奇金病、斑替(Banti)綜合徵、高雪(Gaucher)病等。
(3)慢性疾病:肝炎、肝硬化等。
3.8 附註
白細胞分類受技術因素和細胞分佈因素等原因而有較大變異,故分類計數的離散度較大,且分類中佔大比例的如中性粒細胞及淋巴細胞變異呈正態分佈,佔小比例的如嗜酸粒細胞、嗜鹼粒細胞及單核細胞呈普哇松分佈。根據Rümke等研究,白細胞分類計數的95%及99%可信限範圍,可參見下表(表1)查得。例如某血片作200個白細胞分類,其中粒細胞爲60%(p),其他細胞爲40%(q),則出現p可能性的標準誤(SEp)爲,n爲計數的細胞數,查表Low95%及High95%行與p60,q40列,相交處得53及67,即本例分類95%可信限最低爲53%,最高爲67%,同理99%可信限爲51%~69%。也即對同份血片或同一病人的另一張血片再作白細胞分類計數時,有95%的可能性,粒細胞的分類計數範圍在53%~67%,99%的可能性範圍爲51%~69%。超出此範圍的即認爲分類計數誤差過大,不符質量要求,應予重視。