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等電聚焦(isoelectricfocusing,IEF)電泳技術
...IEF)是60年代中期問世的一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。由於其分辨率可達0.01pH單位,因此特別適合於分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。 ⒈IEF的基本原理在IEF的電泳中,具有pH梯度的...
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等電聚焦
等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦於與其等電點相當的pH位置上,電聚焦的優點是...
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第四節 蛋白質的理化性質
...合物,其理化性質一部分與氨基酸相似,如兩性電離、等電點、呈色反應、成鹽反應等,也有一部分又不同於氨基酸,如高分子量、膠體性、變性等。 一、蛋白質的膠體性質 蛋白質分子量頗大,介於一萬到百萬之間,故...
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穴位經皮電刺激對弱視小兒立體視銳有影響
《中華中醫藥雜誌》2008年第1期中國研究者觀察穴位經皮電刺激對小兒弱視遠近視力和立體視銳的影響。研究者選取小兒弱視患者70例,共80只患眼隨機分爲穴位經皮電刺激組和西醫常規治療組,觀察治療前後兩組遠近視力和立體...
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兩種凝血酶原提取方法的比較
【摘要】目的比較等電點沉澱法和檸檬酸鋇吸附法從豬血漿中提取凝血酶原的純度。方法分別採用等電點沉澱法和檸檬酸鋇吸附法從豬血漿中提取凝血酶原,凝血酶原經單獨鈣離子激活得到凝血酶,通過凝血酶效價測定、蛋白質...
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穴位經皮電刺激對弱視小兒立體視銳有影響
《中華中醫藥雜誌》2008年第1期中國研究者觀察穴位經皮電刺激對小兒弱視遠近視力和立體視銳的影響。研究者選取小兒弱視患者70例,共80只患眼隨機分爲穴位經皮電刺激組和西醫常規治療組,觀察治療前後兩組遠近視力和立體...
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生化實驗講義(理論部分)四--電泳技術(二)
...約需2小時。4.10等電聚焦等電聚焦電泳是根據兩性物質等電點(pI)的不同而進行分離的,它具有很高的分辨率,可以分辨出等電點相差0.01的蛋白質,是分離兩性物質如蛋白質的一種理想方法。等電聚焦的分離原理是在凝膠中通...
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常見蛋白質的等電點
常見蛋白質等電點參考值蛋白質等電點鮭精蛋白[salmine]12.1鯡精蛋白[clupeine]12.1鱘精蛋白[sturline]11.71胸腺組蛋白[thymohistone]10.8珠蛋白(人)[globin(human)]7.5卵白蛋白[ovalbuin]4.71;4.59伴清蛋白[conalbumin]6.8,7.1血清白蛋白[serumalbumin]4.7-4...
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第二節 電泳技術的應用
...白質在電場中不再移動,溶液的這一pH值爲該蛋白質的等電點(isoelctricpoint,pI)。若溶液pH處於等電點酸側,即pH<pl,則蛋白質帶正電荷,在電場中向負極移動。若溶液pH處於等電點鹼側,即pH>pl,則蛋白質帶負電荷,向正極...
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經皮電神經刺激穴位治療對腦卒中患者偏癱側上肢體感誘發電位的影響
...ber.com)4月10日消息,該項研究目的是比較單次(45min)經皮電神經刺激(TENS)穴位治療對腦卒中患者偏癱側上肢體感誘發電位(SEP)的影響。方法採用符合入選條件並簽署知情同意書的29例初發腦卒中患者分層後隨機分爲治療組...
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腹針經皮電刺激對頸肩腰腿痛患者即時鎮痛效應的觀察
2008年04月29日中國鍼灸27(9):657醫學空間(MEDcyber.com)4月29日消息--中國浙江的研究人員近期觀察了經皮神經電刺激(TENS)結合腹針取穴治療頸肩腰腿痛患者即時鎮痛作用的臨牀療效。將120例頸肩腰腿痛患者隨機分爲腹針TENS組...
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戶塵蟎過敏原雙向免疫印跡指紋圖譜研究
...雙向電泳及雙向免疫印跡技術確定戶塵蟎過敏原。結果等電點和分子量分別爲5.4,25.6KD的過敏原組分(以下表示方法相同)對應於Derp1;7.6~9.0,15.2KD對應於Derp2;8.1~8.5,28.5~28.6KD對應於Derp3;6.5~7.0,61.0~62.0KD對應於Derp4;7.0~7.3...
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第十七章 血清載脂蛋白分離純化及其鑑定--第一節 載脂蛋白分離純化
...聚焦分離法 等電聚焦(lsoelectrofocusing,IEF)又稱爲等電點分離法,是利用一種含載體兩性電解質(carrierampholyte)的凝膠在電場中形成pH梯度,同時把具有兩性電解質性質的樣品(如蛋白質)聚集在他們的等電點相應的pH區帶中...
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高效毛細管電泳分離模式
...高效毛細管電泳的應用範圍;四,毛細管等電聚焦1.根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術;2.毛細管內充有兩性電解質(合成的具有不同等電點範圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物),當施加直流電壓(6~8V)時,管內將建立一...
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肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌產超廣譜β-內酰胺酶的耐藥表型和基因型研究*
...ESBLs菌株表型鑑定、PCR檢測基因型、等電聚焦電泳鑑定等電點,並對這些菌株耐藥的特性和基因型進行了探討。結果ESBLs的檢出率爲18.6%,其中大腸埃希菌的檢出率爲27.7%,肺炎克雷伯桿菌的檢出率爲8.57%。引起耐藥的基因型主要...
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層析技術(Layer-analisetechnique)
...電荷蛋白質陽離子進行交換。 溶液的pH值與蛋白質等電點相同時,靜電荷爲0,當溶液pH值大於蛋白質等電點時,則羧基遊離,蛋白質帶負電荷。反之,溶液的pH值小於蛋白質等電點時,則氨基電離,蛋白質帶正電荷。溶液的pH...
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多媒體生物反饋治療廣泛性焦慮的臨牀療效分析
...oGraph多媒體生物反饋系統,電極包括腦電、心電、肌電、皮電和皮溫等。實施步驟:治療師在療前向病人講解治療原理和方法,制定反饋計劃,安置電極,指導訓練,每次結束時與病人一起總結評價。1~3天1次,每次30分鐘左右,...
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多媒體生物反饋治療廣泛性焦慮的臨牀療效分析
...oGraph多媒體生物反饋系統,電極包括腦電、心電、肌電、皮電和皮溫等。實施步驟:治療師在療前向病人講解治療原理和方法,制定反饋計劃,安置電極,指導訓練,每次結束時與病人一起總結評價。1~3天1次,每次30分鐘左右,...
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雙向電泳在大鼠脊髓蛋白質組分析中的應用
...的首選技術之一。所謂雙向電泳,第一向根據蛋白質的等電點不同,分離蛋白質;第二向將等電點相同的蛋白質,根據分子量不同再次得到分離。與通常的聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)相比,能獲得更多的信息。1雙向電泳中蛋...
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自身抗原52kD-Ro/SSA的序列分析及抗原性預測
...計算機分析 將52kD-Ro/SSA序列輸入計算機,分析蛋白質等電點曲線,用Kyte-Doolittle氨基酸親水標準及7個殘基一組的預測方案作親水性分析[1]。用Emini方法預測表面可及性,用Karplus-Schulz標準分析肽鏈柔性。用Chou-Fasman(CF)和Garnier-...
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蛋白質提取與純化技術
...的pH值和鹽濃度的選擇。1、pH值 蛋白質,酶是具有等電點的兩性電解質,提取液的pH值應選擇在偏離等電點兩側的pH範圍內。用稀酸或稀鹼提取時,應防止過酸或過鹼而引起蛋白質可解離基團發生變化,從而導致蛋白質構象的...
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蛋白質提取與純化技術簡介
...值和鹽濃度的選擇。 1、pH值 蛋白質,酶是具有等電點的兩性電解質,提取液的pH值應選擇在偏離等電點兩側的pH範圍內。用稀酸或稀鹼提取時,應防止過酸或過鹼而引起蛋白質可解離基團發生變化,從而導致蛋白質構象...
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常用的層析分析方法
... 2.蛋白質的行爲 蛋白質所帶電荷取決於它的等電點(PI)和層析柱中的PH值。當柱中的PH低於蛋白質的PI時,蛋白質帶正電荷,且不與陰離於交換劑結合。而隨着洗脫劑向前移動,固定相中的PH值是隨着淋洗時間延長而變...
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等電聚焦電泳技術
(一)原理等電聚焦技術是一種根據樣品的等電點不同而使它們在pH梯度中相互分離的一種電泳技術。本法的分辯率極高,所以在進行等電聚焦電泳時,要求樣品不能過於複雜,一般應經其他方法(如層析法)提純後再進行等點...
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第三節 影響抗原抗體反應的因素
...蛋白質具有兩性電離性質,因此每種蛋白質都有固定的等電點。抗原抗體反應一般在pH爲6~8進行。PH過高或過低都將影響抗原與抗體的理化性質,例如pH達到或接近抗原的等電點時,即使無相應抗體存在,也會引起顆粒性抗原非...
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第三節 氨基酸
...-氨基酸,其水溶液中兩性離子都佔絕對多數。 2.等電點 若將氨基酸的水溶液酸化,則兩性離子與H+結合而成陽離子,若加鹼於氨基酸的水溶液中,則兩性離子中氮原子上的一個氫離子與OH-結合成水,而兩性離子變成陰...
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IL-6D24-Linker-PE40重組毒素的分子生物學特性預測
...的某些分子生物學特性,諸如柔性、抗原性、親水性、等電點及表位,以預測融合蛋白及其接頭設計的合理性。 1 材料與方法 1.1 融合蛋白分子生物學特性的計算機預測 採用軍事醫學科學院吳加金教授設計的GOLDKEY軟...
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幽門螺桿菌CagA蛋白的純化與鑑定
...凝膠等電聚焦電泳結果顯示,該Mr爲130×103純化蛋白的等電點(pI)爲8.1。 圖2 純化蛋白SDS-PAGE分析 Fig2.SDS-PAGEanalysisofpurifiedH.pyloriprotein Theseparatinggelcontained10%acrylamide Lane1:guanidineextract,lane2:fractionAofgelfiltrationchromato...
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生物大分子樣品的保存
...結晶等。③以電荷差異爲依據的方法:電泳、電滲析、等電點沉澱、吸附層析和離子交換層析等。④以生物學功能專一性爲依據的方法:親和層析等。表2-2各種主要分離純化方法的比較:方法原理優點缺點應用範圍沉澱法蛋白質...
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第一節 抗原的製備
...質易溶於極性溶劑,非極性物質易溶於非極性大分子的等電點遠的pH值使溶解度增加。因此,在不同的抗原提取過程中,所選用的溶劑的性質、pH值、離子強度、抽提溫度、介電常數等因素是提取成敗的重要因素。要達到分離提...