2 基本信息
ICS 11.020
C62
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 563—2017《釘螺調查》(Survey of oncomelanid snails)由中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會2017年8月1日《關於發佈〈釘螺調查〉等9項推薦性衛生行業標準的通告》(國衛通〔2017〕11號)發佈,自2018年2月1日起實施。
3 發佈通知
關於發佈《釘螺調查》等9項推薦性衛生行業標準的通告
國衛通〔2017〕11號
現發佈《釘螺調查》等9項推薦性衛生行業標準,其編號和名稱如下:
上述標準自2018年2月1日起施行。
特此通告。
國家衛生計生委
2017年8月1日
4 前言
本標準根據《中華人民共和國傳染病防治法》、《血吸蟲病防治條例》制定。
本標準按照GB/T1.1—2009給出的規則起草。
本標準起草單位:中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所、安徽省血吸蟲病防治研究所、湖北省疾病預防控制中心、江西省寄生蟲病防治研究所、四川省疾病預防控制中心、江蘇省血吸蟲病防治研究所、廣東省疾病預防控制中心。
本標準主要起草人:周曉農、張世清、許靜、劉建兵、李石柱、林丹丹、呂山、楊坤、陳琳、洪青標、黃少玉、鮑子平。
5 標準正文
釘螺調查
5.1 1 範圍
5.2 2 術語和定義
下列術語和定義適用於本文件。
2.1
湖北釘螺 Oncomelania hupensis
湖北釘螺是日本血吸蟲唯一中間宿主,屬於軟體動物門、腹足綱、中腹足目、圓口螺科、釘螺屬,爲雌雄異體、卵生、水陸兩棲的淡水螺,在我國通常簡稱爲釘螺。
2.2
感染性釘螺 infected oncomelanid snail
2.3
系統抽樣調查法 systematic sampling survey
每間隔一定距離設調查框,每框面積約爲0.1m2(0.33m×0.33m),對框內釘螺進行調查。
2.4
環境抽查調查法 environmental sampling survey
在釘螺可能孳生的環境設調查框,對框內釘螺進行調查。
2.5
全面細查法 comprehensive survey
不設調查框,全面調查環境中的釘螺情況。
2.6
誘螺法 attracting snail method
採用稻草簾等載體等距離放置於調查環境,引誘釘螺附着在載體上,以瞭解釘螺分佈情況。
5.3 3 調查方法
5.3.1 3.1 現場調查
5.3.1.1 4.1.1 方法選擇
根據調查目的和環境,選擇合適的方法開展釘螺調查,包括系統抽樣調查法、環境抽查調查法、系統抽樣結合環境抽查調查法、全面細查法和誘螺法等,見附錄A。
5.3.1.2 4.1.2 釘螺鑑別
根據形態特徵,即螺殼的旋數、長度、旋向、顏色以及脣脊和厴的有無,鑑定查獲的螺類是否爲釘螺,參見附錄B。
5.3.1.3 4.1.3 調查記錄
撿獲框內全部釘螺,以框爲單位裝入螺袋,螺袋外標註調查環境名稱、環境類型、框號和調查日期,並用全球定位系統(Global position system,GPS)對環境進行定位。
5.3.2 3.2 實驗室檢測
5.3.2.1 3.2.1 釘螺生存狀態鑑定
採用爬行法、敲擊法、壓碎法或溫水法等方法,鑑定捕獲釘螺的生存狀態,見附錄C。
5.3.2.2 3.2.2 感染性釘螺檢測
採用壓碎鏡檢法或逸蚴法,檢測釘螺體內是否含有日本血吸蟲胞蚴、尾蚴,見附錄C。
5.3.3 3.3 調查結果統計
6 附錄
6.1 附錄A(規範性附錄)釘螺現場調查方法
6.1.1 A.1 系統抽樣調查法
調查框的設置及調查線距、框距應根據調查環境類型及面積大小確定。對於河道、溝渠、池塘、窪地等環境,在常年水位線沿河道、溝渠兩邊、池塘邊、窪地周邊每間隔5m或10m等距離設框;對江湖洲灘、田地環境,在灘面、田地上設置若干平行的調查線,再沿調查線等距離設框。線距和框距可根據洲灘、田地面積大小確定,一般爲5m~20m。灘地面積較大時,線距和框距可適當增加,但最大不宜超過50m;面積特別大的江湖洲灘,可以先劃分成若干塊,然後在每塊環境進行系統抽樣調查。系統抽樣調查法的調查結果可用於活螺密度、感染性釘螺密度、活螺框出現率的計算。
6.1.2 A.2 環境抽查調查法
在釘螺可能孳生的環境設框調查。對於山地、墳堆、竹林等特殊環境,可採用環境抽查法進行調查。
6.1.3 A.3 系統抽樣結合環境抽查調查法
系統抽樣調查法未查到釘螺時,對一些可疑釘螺孳生環境進行設框抽查。或在系統抽樣過程中,對適宜釘螺孳生的環境設框抽查,調查框數應足以彌補系統抽樣產生的漏查誤差。系統抽樣結合環境抽查調查結果可用於計算釘螺面積和感染性釘螺面積。
6.1.4 A.4 全面細查法
調查時不設框,細查全部可疑釘螺孳生環境,發現釘螺後採用系統抽樣調查法進行調查。一般用於確定日本血吸蟲病流行區釘螺接近消滅的地區以及難以系統抽樣的小塊複雜環境。
6.1.5 A.5 誘螺法
以稻草編成0.1m2大小的方簾,按系統抽樣法的設框方式等距離放置於河溝的近岸水面或洲灘水面,經3 d~7 d後取回,檢查所獲成螺和幼螺。此法適於漲水期內調查洲灘或河溝螺情,還可用於對比滅螺前後稻草簾所誘獲的成螺和幼螺密度,以觀察滅螺效果。
6.2 附錄B(資料性附錄)釘螺的鑑別
在自然環境中孳生的某些螺類,其外形同釘螺較相似,易與釘螺混淆。在釘螺調查時需將其與釘螺加以鑑別(見表B.1)。常見的與釘螺相似螺類主要有:方格短溝蜷(Semisulcosplra cancella to Bonson,俗稱海螄)、真管螺(Euphaedusa,俗稱煙管螺)、細鑽螺(Opeas gracile,俗稱菜螺)、擬釘螺(Tricula,俗稱小黑螺)等。
表B.1 釘螺與相似螺類的鑑別要點
鑑別要點 | 釘螺 | 方格短溝蜷 | 真管螺 | 細鑽螺 | 擬釘螺 |
螺旋數(個) | 5~9 | 12 | 10~11 | 6~8 | 5~8 |
長度(mm) | 5~10 | 15~28 | 10~17 | 7~9 | 3~6 |
旋向 | 右旋 | 右旋 | 右旋 | 右旋 | |
殼色 | 暗褐色或 黃褐色 | 黃褐色 | 黃褐色 | 灰白色或 乳白色 | 灰黑色 |
殼口 | 卵圓形 | 半卵圓形、較薄、 有鋸齒 | 近似三 角形 | 橢圓形 | 卵圓形,殼臍 呈溝裂狀或 窄縫狀 |
脣脊 | 有 | 無 | 無 | 無 | 無 |
厴 | 有 | 有 | 無 | 無 | 有 |
其他 | 假眉金黃色、陰 莖較粗大,呈淺 紅色 | 體螺旋基部近殼口 處有3條明顯橫 紋,縱肋比釘螺稀 疏,突起較爲明顯 | 殼口有皺 褶 | 眼有柄, 能伸縮 | 假眉爲白色, 陰莖細長。不 呈紅色,殼表 光滑 |
水、陸兩棲,多 見於河、溝、渠、 塘、田及江洲湖 灘等有草的潮 溼泥土上 | 水棲,常見於清涼 的河、湖、渠水中 | 陸棲,常見 於老牆角、 樹洞陰溼 處 | 陸棲,常 見於菜 園、屋基 陰溼處 | 水棲,常見於 山區溝水中 小石塊上 |
6.3 附錄C(規範性附錄)釘螺的實驗室檢測
6.3.1 C.1 釘螺生存狀態鑑定
6.3.1.1 C.1.1 爬行法
將草紙鋪於平底瓷盤底部,在草紙中心上畫直徑爲5cm的圓圈,瓷盤內加入少許脫氯水使草紙溼潤。將釘螺置於草紙上的圓圈內,置室溫(20℃~25℃)下放置24h後,觀察釘螺爬動情況。若釘螺開厴活動或爬到圈外,則爲活螺。在原位不動的釘螺,通過壓碎法或敲擊法鑑別釘螺是否存活。
6.3.1.2 C.1.2 敲擊法
將釘螺置於平板玻璃或硬物上,用小鐵錘輕擊使之破碎,如見釘螺軟組織有收縮反應則爲活螺,反之爲死螺。
6.3.1.3 C.1.3 壓碎法
將釘螺置於平板玻璃上,每塊玻片上放置釘螺若干只,釘螺相互分開另用一塊較厚的玻片將釘螺輕輕壓碎,用解剖針將粘附在上面玻片上的釘螺軟組織撥到下面玻片上,然後在每個螺體上加一滴脫氯清水。如壓碎後釘螺有收縮反應,且見新鮮軟體組織者爲活螺,反之爲死螺。
6.3.1.4 C.1.4 溫水法
將現場捕捉的釘螺放入溫水(20℃~25℃)中,15min後發現釘螺開厴活動的即爲活螺,不開厴活動的釘螺,通過壓碎法或敲擊法鑑別釘螺是否存活。
6.3.2 C.2 感染性釘螺檢測
6.3.2.1 C.2.1 壓碎鏡檢法
將釘螺置於載玻片上,另用一張較厚的玻片將釘螺輕輕壓碎,然後在螺體上加一滴脫氯清水,將釘螺置於解剖鏡(10×倍)或顯微鏡(4×物鏡,10×目鏡)下,用解剖針拔開外殼,依次撕碎釘螺消化腺等軟體組織,發現日本血吸蟲尾蚴、胞蚴即爲感染性釘螺,感染早期的釘螺有時可檢獲母胞蚴。解剖針每撥弄一次螺軟組織後,應及時擦乾淨,防止尾蚴污染。
6.3.2.2 C.2.2 逸蚴法
將釘螺放在指形試管內,每管放一隻釘螺,加脫氯水至試管口,用尼龍紗蓋好管口。置20℃~25℃、光照條件下,4h~8h後用肉眼或放大鏡在燈光下觀察指管水面有無日本血吸蟲尾蚴。如無法鑑別,可用鉑金餌鉤取表面水滴於載玻片,在顯微鏡或解剖鏡下觀察。如待檢釘螺數量較多,感染率又不高時,可用較大的指管,每管放10只釘螺,對檢出有感染性釘螺的指管,再按照單個螺逸蚴的方法辨別感染性釘螺。
7 參考文獻
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[5] 魏風華,王汝波,徐興建,等. 血吸蟲病和釘螺輸入三峽庫區的途徑與方式調查,中國血吸蟲病防治雜誌,2004,16: 118-121
[6] 操治國,汪天平,張世清,等,釘螺在巢湖生存繁殖的模擬試驗,中國血吸蟲病防治雜誌,2008,20:281-284