Gm、Km因子鑑定

醫療技術名

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

Gm 、Km yīn zǐ jiàn dìng

2 註解

3 操作名稱

Gm、Km因子鑑定

4 用品及準備

試管,抗D血清O型R1R2紅細胞,96孔V型反應板,磷酸緩衝液

5 方法及內容

1.製備致敏紅細胞

(1)取12mm×75mm試管1只,加入已知Gm或Km因子的抗D血清

(2)再向試管中加入新鮮O型R1R2紅細胞1份。

(3)混勻37℃溫育1h。

(4)紅細胞洗滌3次,配成2%濃度的紅細胞懸液待用。

2.抗Gm、Km抗體的標定

(1)取96孔V型微量板1塊,向每孔中加磷酸緩衝液25μl。

(2)抗Gm、Km抗體作倍量稀釋。

(3)向每孔中加入0.5%的致敏紅細胞25μl,振盪混勻30s。

(4)室溫下反應10~15min。

3.血凝抑制反應,檢定Gm、Km因子

(1)取待檢血清離心

(2)96孔V型微量板每孔中加磷酸緩衝液25μl。

(3)將待測樣本用稀釋管從1:1倍比稀釋至成1:32,共稀釋2排。

(4)第1排在1:16,1:32孔中加入最佳稀釋度的抗Gm、Km抗血清25μl。

(5)第2排爲陰性對照,各孔加入磷酸緩衝液25μl。

(6)振盪混勻30s,中和10~15min

(7)每孔加入2%致敏的紅細胞懸液25μl。

(8)2000r/min離心5min。

(9)將微量板傾斜呈45°,5min後觀察結果。

6 結果判讀

無拖尾現象爲陽性,表示無相應Gm、Km因子;有拖尾現象爲陰性,表示有相應Gm、Km因子。

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