1 拼音
GB 5009.223—2014 shí pǐn ān quán guó jiā biāo zhǔn shí pǐn zhōng ān jī jiǎ suān yǐ zhǐ de cè dìng
中華人民共和國國家標準GB 5009.223—2014《食品安全國家標準 食品中氨基甲酸乙酯的測定》由中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會於2015年01月28日發佈,自2015年07月28日起實施。
食品安全國家標準
食品中氨基甲酸乙酯的測定
4 3 試劑和材料
注:除非另有說明,本標準所用試劑均爲分析純,水爲GB/T 6682規定的三級水。
4.1 3.1 試劑
3.1.2 氯化鈉(NaCl)。
3.1.3 正己烷(C6H14):色譜純。
3.1.4 乙酸乙酯(C4H8O2):色譜純。
3.1.5 乙醚(C4H10O):色譜純。
3.1.6 甲醇(CH4O):色譜純。
3.1.7 鹼性硅藻土固相萃取柱:填料4000 mg、柱容量12 mL。
4.2 3.2 試劑配製
3.2.1 無水硫酸鈉:450℃烘烤4h,冷卻後貯存於乾燥器中備用。
3.2.2 5%乙酸乙酯乙醚溶液:取5 mL乙酸乙酯,用乙醚稀釋到100 mL,混勻待用。
4.3 3.3 標準品
3.3.1 氨基甲酸乙酯標準品(C3H7O2N,CAS:51-79-6):純度大於99.0%。
3.3.2 D5-氨基甲酸乙酯標準品(C3H2D5NO2,CAS:73962-07-9):純度大於98.0%。
4.4 3.4 標準溶液配製
3.4.1 D5-氨基甲酸乙酯儲備液(1.00 mg/mL):準確稱取0.01 g(精確到0.0001 g)D5-氨基甲酸乙酯標準品,用甲醇溶解、定容至10 mL,4℃以下保存。
3.4.2 D5-氨基甲酸乙酯使用液(2.00 μg/mL):準確吸取D5-氨基甲酸乙酯儲備液(1.00 mg/mL) 0.10 mL,用甲醇定容至50 mL,4℃以下保存。
3.4.3 氨基甲酸乙酯儲備液(1.00 mg/mL):準確稱取0.05 g(精確到0.0001 g)氨基甲酸乙酯標準品,用甲醇溶解、定容至50 mL,4℃以下保存,保存期3個月。
3.4.4 氨基甲酸乙酯中間液(10.0μg/mL):準確吸取氨基甲酸乙酯儲備液(1.00 mg/mL)1.00 mL,用甲醇定容至100 mL,4℃以下保存,保存期1個月。
3.4.5 氨基甲酸乙酯中間液(0.50 μg/mL):準確吸取氨基甲酸乙酯中間液(10.0 μg/mL)5.00 mL,用甲醇定容至100 mL,現配現用。
3.4.6 標準曲線工作溶液:分別準確吸取氨基甲酸乙酯中間液(0.50μg/mL)20.0μL、50.0μL、100.0μL、200.0μL、400.0μL和氨基甲酸乙酯標準中間液(10.0μg/mL)40.0μL、100.0μL於7個1 mL容量瓶中,各加2.00μg/mL D5-氨基甲酸乙酯使用液100μL,用甲醇定容至刻度,得到10.0 ng/ml。、25.0 ng/mL、50.0 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL、1000 ng/mL的標準曲線工作溶液,現配現用。
6 5 分析步驟
6.1 5.1 試樣製備
樣品搖勻,稱取2g(精確至0.001 g)樣品(啤酒超聲5 min脫氣後稱量),加100.0μL 2.00μg/mL D5-氨基甲酸乙酯使用液、氯化鈉0.3 g(若爲醬油不加氯化鈉),超聲溶解、混勻後,加樣到鹼性硅藻土固相萃取柱上,在真空條件下,將樣品溶液緩慢滲入萃取柱中,並靜置10 min。經10 mL正己烷淋洗後,用10 mL 50/乙酸乙酯乙醚溶液以約1 mL/min流速進行洗脫,洗脫液經裝有2g無水硫酸鈉的玻璃漏斗脫水後,收集於10 mL刻度試管中,室溫下用氮氣緩緩吹至約0.5 mL,用甲醇定容至1.00 mL製成測定液,供GC/MS分析。
6.2 5.2 儀器參考條件
氣相色譜質譜儀分析參考條件:
——毛細管色譜柱:DB-INNOWAX,30 m×0.25 mm(內徑)×0.25μm(膜厚)或相當色譜柱;
——進樣口溫度:220℃;
——柱溫:初溫50℃,保持1min,然後以8℃/min升至180℃,程序運行完成後,240℃後運行5 min;
——載氣:氦氣,純度≥99.999%,流速1 mL/min;
——四級杆溫度:150℃;
——離子源溫度:230℃;
——傳輸線溫度:250℃;
——溶劑延遲:11 min;
——進樣方式:不分流進樣;
——進樣量:1 μL~2 μL;
——氨基甲酸乙酯選擇監測離子(m/z):44、62、74、89,定量離子62;
——D5-氨基甲酸乙酯選擇監測離子(m/z)64、76,定量離子64。
6.3 5.3 定性測定
按方法條件測定標準工作溶液和試樣,低濃度試樣定性可以減少定容體積,試樣的質量色譜峯保留時間與標準物質保留時間的允許偏差小於±2.5%;定性離子對的相對丰度與濃度相當標準工作溶液的相對丰度允許偏差不超過表1的規定。
相對離子丰度/% | >50 | >20~50 | >10~20 | ≤10 |
允許的最大偏差/% | ±20 | ±25 | ±30 | ±50 |
6.4 5.4 定量測定
6.4.1 5.4.1 標準曲線的製作
將氨基甲酸乙酯標準曲線工作溶液10.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50.0 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL、1000 ng/mL(內含200 ng/mL D5-氨基甲酸乙酯)進行氣相色譜質譜儀測定,以氨基甲酸乙酯濃度爲橫座標,標準曲線工作溶液中氨基甲酸乙酯峯面積與內標D5-氨基甲酸乙酯的峯面積比爲縱座標,繪製標準曲線。
6.4.2 5.4.2 試樣測定
將試樣溶液同標準曲線工作溶液進行測定,根據測定液中氨基甲酸乙酯的含量計算試樣中氨基甲酸乙酯的含量,其中試樣含低濃度的氨基甲酸乙酯時,宜採用10.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50.0 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL的標準曲線工作溶液繪製標準曲線;試樣含高濃度氨基甲酸乙酯時,宜採用50.0 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL、1000 ng/mL的標準曲線工作溶液繪製標準曲線。標準溶液質譜圖見附錄A。