第四節　原位雜交組織化學與免疫細胞化學結合法

...組化與免疫組化PAP法的聯合程序　　（1）切片入PBS沖洗5min，最好是將切片漂洗於滅菌器皿中。　　（2）0.1mol/L甘氨酸PBs5min。　　（3）0.4%TritonX-100PBS15min。　　（4）1μg/ml蛋白酶K，37℃保溫30min。　　（5）4%多聚甲醛PBS固定5min。...

非同位素原位雜交組化與免疫組化聯合法

...片漂浮於能經受高壓滅菌的器皿中。0.1mol/lPBSpH7.2沖洗3×5min。　　（2）0.1mol/L甘氨酸PBS沖洗5min。　　（3）0.4%TritonX-100PBS15min。　　（4）1μg./ml蛋白酶K（0.1mol/lTris–HClpH8.0,50mmol/LEDTA配），37℃保溫30min。　　（5）4%多聚甲醛PBs5min。...

低分子肝素皮下注射局部壓迫時間與皮下出血關係的探討

...肝素6次，將其隨機分爲3組，每組局部壓迫的時間爲3min和5min，10min觀察出血例次和出血面積。結果通過臨牀觀察發現，低分子肝素皮下注射後壓迫時間與皮下出血例次及出血面積有關，3組患者的皮下出血情況應用行列表χ2檢驗...

常規的瓊脂糖凝膠電泳檢測細胞凋亡

方法一：　　1．收集細胞（5×106）1000r/min，離心5min，去上清。　　2．PBS洗一次，1000r/min，離心5min，去上清。　　3．加細胞核裂解液500μl重懸細胞，50℃水浴，3～5h，不時振搖或37℃過夜。　　4．加0.5ml平衡酚抽提，上下顛倒幾...

固定細胞的PI單染色法

方法一　　1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。　　2．3mlPBS洗一次。　　3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。　　4．離心棄去固定液，3mlPBS重懸5min。　　5．400目的篩網過濾1次，500...

光敏生物素核酸探針原位雜交組化程序

（1）石蠟切片脫蠟入水後，置0.1mol/lPBSpH7.2沖洗5min；冰凍切片直接入PBS沖洗5min。　　（2）0.1mol/l甘氨酸PBS沖洗5min。　　（3）0.4%TritionX-100PBS沖洗15min。　　（4）蛋白酶K1μg/ml（0.1mol/lTris–HClpH8.0,50mmol/LEDTA配）37℃保溫30min。　　...

原位末端標記技術檢測細胞凋亡

...擦乾組織塊周邊液體放入溼盒組織切片上滴加緩衝液A，5min。緩衝液A：50mmol/LTris-HCl,5mmol/LMgCl2,10mmol/Lβ-巰基乙醇，0.005％BSA，pH7.5。　　5．棄去緩衝液A，滴加標記液約50μl，25℃溫育1h。標記反應液：0.005mmol/LdNTP,0.005mol/Lbiotin-16-dUTP...

AdrenomedullinStimulatesNitricOxideProductionfromPrimaryRatHypothalamicNeurons:RolesofCalciumandPhosphatases

...7‘-difluorofluoresceinfluorescencelivecellimaging,wefoundthatADM(1or10nM,5min)significantlyelevated[Ca2+]iandNOproductioninaconcentration-dependentmanner.Ca2+andNOresponsesinducedby10nMADMwereabolishedbypretreatmentwith50µM1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N‘,N‘-tetraaceticacid-acetoxyme...

第七節　光鏡免疫金銀細胞化學方法

...　　（9）0.02mol/lTBSpH8.2稀釋兔抗鼠金標抗體（1：8）37℃45min。　　（10）0.02mol/lTBSpH8.2振洗10＇×2。　　（11）雙蒸水振洗5＇×2。　　（12）1%戊二醛，10min。　　（13）雙蒸水5min。　　（14）用蘇木素襯染核1min，甘油封片。　　結...

DNA重組實驗中常用的技術

...培養物倒入1.5ml離心管中，用臺式離心機於4℃以12000g離心5min，將剩餘的培養物貯存於4℃。　　（3）吸盡培養液，使細菌沉澱儘可能乾燥。　　2．鹼裂解法小量抽提質粒　　（1）將細菌沉澱[上述步驟（3）所得]重懸於100μl預冷...