3 抗A抗B血型定型試劑（單克隆抗體）藥典標準
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 漢語拼音
Kang A Kang B Xuexing Dingxing Shiji（Dankelongkangti）
3.1.3 英文名
Anti-A and Anti-B Blood Grouping Reagents （Monoclonal Antibody）
3.2 定義、組成及用途
本品系用A血型單克隆抗體或B血型單克隆抗體配製而成，用於鑑定人ABO血型。
3.3 1 基本要求
生產和檢定用設施、原材料及輔料、水、器具、動物等應符合“凡例”的有關要求。
3.4 2 製造
3.4.1 2.1 專用原材料
3.4.1.1 2.1.1 雜交瘤細胞
雜交瘤細胞庫的建立及檢定應符合“生物製品生產檢定用動物細胞基質製備及檢定規程”規定。
雜交瘤細胞建株，需經幾次克隆篩選，以100%克隆孔上清液相應抗體陽性的作爲原始細胞株。原始細胞株經傳代，穩定分泌特異性抗體的雜交瘤細胞株爲主細胞。工作細胞庫經血凝效價測定合格後方能用於生產。
3.4.1.2 2.1.2 染色劑
抗A血型試劑可選用亞甲藍等藍色染料，抗B血型試劑可選用吖啶黃等黃色染料。
3.4.1.3 2.1.3 防腐劑
可選用疊氮鈉、硫柳汞鈉鹽等。
3.4.1.4 2.1.4 穩定劑
可選用蛋白質、葡萄糖、鹽類等，不得使用凝聚胺、聚乙二醇等促凝劑用於配製穩定劑。
3.4.2 2.2 製備程序
3.4.2.1 2.2.1 雜交瘤細胞培養物上清液的製備
抗A血型或抗B血型雜交瘤細胞經培養傳代，取培養物上清液，檢測血凝效價合格後擴大培養即得。
3.4.2.2 2.2.2 小鼠雜交瘤腹水的製備
3.4.2.2.1 2.2.2.1 小鼠腹腔預處理
健康BALB/c小鼠腹腔用石蠟油預處理。
3.4.2.2.2 2.2.2.2 接種
檢測雜交瘤細胞培養物上清液，其抗體血凝效價合格後，用生理氯化鈉溶液或不完全培養液重新懸浮細胞，接種子數天前用石蠟油處理過的小鼠腹腔內。
3.4.2.2.3 2.2.2.3 腹水的收集
接種後數週，處死小鼠，收集腹水，離心去沉澱，以適當方法除纖維蛋白原，加入適宜的防腐劑，-30℃及以下保存。
3.4.3 2.3 半成品
3.4.3.1 2.3.1 配製
合併雜交瘤細胞培養物上清液，可加入少量腹水混合，加入染色劑，使抗A血型定型試劑呈藍色，抗B血型定型試劑星黃色，除菌過濾。
3.4.3.2 2.3.2 半成品檢定
按3.1項進行。
3.4.4 2.4 成品
3.4.4.1 2.4.1 分批
3.4.4.2 2.4.2 分裝與凍幹
3.4.4.3 2.4.3 規格
應爲經批准的規格。
3.4.4.4 2.4.4 包裝
3.5 3 檢定
3.5.1 3.1 半成品檢定
3.5.1.1 3.1.1 效價測定
取抗A血型試劑、抗B血型試劑及國家參考品，2倍系列稀釋至適宜的稀釋度，分別加入相應的2%A1、A2、A2B、B血型紅細胞懸液，同時設紅細胞懸液對照，置18～25℃反應15分鐘，以每分鐘1000轉離心1分鐘後肉眼觀察結果。紅細胞懸液對照應不產生凝集，抗A血型試劑對A1、A2、A2B血型紅細胞的凝集效價和抗B血型試劑對B血型紅細胞的凝集效價均不得低於國家參考品的同步測定結果。
3.5.1.2 3.1.2 特異性
取抗A血型試劑、抗B血型試劑，分別加入2% A1、A2B、B、O血型紅細胞懸液，同時設紅細胞懸液對照，置18～25℃反應15分鐘，以每分鐘1000轉離心1分鐘後肉眼觀察結果。紅細胞懸液對照應不產生凝集；抗A血型試劑應與A1、A2B血型紅細胞產生凝集，與B、O血型紅細胞不產生凝集；抗B血型試劑應與B血型紅細胞產生凝集，與A1、O血型紅細胞不產生凝集，且均不應出現溶血和其他不易分辨的現象。
3.5.1.3 3.1.3 冷凝集素和不規則抗體測定
取3例A型（測抗B血型試劑用）、3例B型（測抗A血型試劑用）、10例O型紅細胞，每一例紅細胞分別用生理氯化鈉溶液配製成2%紅細胞懸液、用20%牛血清白蛋白生理氯化鈉溶液配製成5%紅細胞懸液。2%紅細胞懸液與相應血型試劑分別於4℃、18～25℃、37℃進行測試；5%紅細胞懸液與相應血型試劑分別於18～25℃、37℃進行測試，2小時後肉眼觀察結果，所有測試結果均不得產生凝集反應或溶血現象。
3.5.1.4 3.1.4 無菌檢查
半成品分裝後留樣做無菌檢查，採用直接接種法（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.5.1.5 3.1.5 穩定性試驗
37℃至少放置7天（有效期爲1年）或14天（有效期爲2年）後，應符合3.1.1～3.1.4項要求。
3.5.2 3.2 成品檢定
3.5.2.1 3.2.1 物理檢查外觀
抗A血型試劑應爲透明或微帶乳光的藍色液體，抗B血型試劑應爲透明或微帶乳光的黃色液體，且均不應有搖不散的沉澱或異物。
3.5.2.2 3.2.2 效價側定
按3.1.1項進行。
3.5.2.3 3.2.3 特異性
按3.1.2項進行。
3.5.2.4 3.2.4 冷凝集素和不規則抗體測定
按3.1.3項進行。
3.5.2.5 3.2.5 親和力
將抗A、抗B血型試劑分別與10%紅細胞懸液於瓷板或玻片上混勻，抗A血型試劑與A1、A2、A2B血型紅細胞出現凝集的時間應分別不長於15秒、30秒、45秒；抗B血型試劑與B血型紅細胞出現凝集的時間應不長於15秒，且在3分鐘內凝集塊應達到1mm2以上。
3.5.2.6 3.2.6 穩定性試驗
出廠前進行，37℃至少放置7天（有效期爲1年）或14天（有效期爲2年）後，應符合3.2.1～3.2.5項要求。
3.6 4 保存及有效期
3.7 5 使用說明
3.8 版本
《中華人民共和國藥典》2010年版