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“基因組編輯核酸酶”當選《自然》年度研究方法
...研究方法專刊,評選出了本年度研究方法——基因組編輯核酸酶(Gene-editingnucleases)。專刊包括社論、新聞特寫、評論、視頻等內容;同時,還評出其他8個值得關注的研究方法。基因組編輯核酸酶是一類通過基因工程改造的核...
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基因組工程學裏的三大利器——ZFN、TALEN和CRISPR/Cas
鋅指核酸酶(Zinc-fingernucleases,ZFN)和轉錄激活因子樣效應因子核酸酶(transcriptionactivator-likeeffectornucleases,TALEN)這兩種新型的核酸酶重新定義了傳統生物學研究的界限和範疇。這兩種核酸酶都是嵌合體,都是由經過設計的、序列...
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顯花植物自交不親和性機制研究
...和花粉自交不親和性的表達。早期研究發現雌蕊分泌的S-核酸酶作爲細胞毒素降解自花花粉管的RNA從而抑制花粉管生長,但是這種特異性降解的分子機制並不清楚。薛勇彪研究員,首先在金魚草中克隆了一個新的自交不親和性位...
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首個基因靶標剔除大鼠培育成功
...國家衛生院的研究人員於7月24日聯合宣佈,他們利用鋅指核酸酶技術成功地創建了首個基因靶標剔除大鼠。 在7月24日出版的《科學》雜誌上,研究人員描述了創建帶有永久性、可遺傳基因突變大鼠的鋅指核酸酶技術新應用,...
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鋅指核酸酶能以蛋白質形態穿透細胞膜
用於目標基因組修飾的鋅指核酸酶(ZFN)能夠以蛋白質的形態穿透細胞膜,這是近期《自然—方法學》上一項研究得出的結論。這將讓ZFN被投遞至細胞內的過程變得更簡單、更具安全性。經過設計的核酸酶比如ZFN,能夠讓多個種...
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臺灣外切核酸酶基因型和吸菸習慣的相互關係
...OURCE:OralOncology近期發表在《OralOncology》上的一篇關於外切核酸酶基因型與吸菸習慣和口腔癌的關係。由於外切核酸酶(Exo1)是非常重要的核酸酶,參與DNA修復,調控細胞週期等,來自臺灣的研究人員日前分析了Exo1單核苷酸多態...
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世界首例利用鋅指核酸酶技術培育的內源性基因敲除豬誕生
...管研究中心陳育慶教授領導的研究團隊合作,首次將鋅指核酸酶基因打靶技術應用於豬內源性基因敲除研究,成功敲除了豬內源性PPARγ基因。此研究在世界上首次建立了對糖尿病和心血管併發症的研究有重要應用價值的PPARγ基因...
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利用核酸酶治療艾滋病
...RNA所獲得的數據,設計出能分解病毒,而專一性十分高的核酸酶蛋白(ribozyme)。而研究團隊的抗愛滋策略,是把生產這種核酸酶蛋白的序列,送到血球幹細胞之中,讓患者自身的血球免疫系統在發育的過程中,就會產生這足以分...
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鋅指核酸酶或可用於修改瘧原蟲基因
本週的《自然—方法學》報道瞭如何利用特定核酸酶對導致瘧疾發病的惡性瘧原蟲的基因組進行修改。這項發現將有助於從遺傳層面包括抗藥性機制上更深入地研究這種重要的人體寄生蟲。全球有數以百萬計的人飽受瘧疾侵害,...
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一種更爲精確的基因組編輯方法
...使用的是鋅指切口酶(nickase),而不是通常所說的鋅指核酸酶。目前,基因治療領域還存在許多挑戰,從導入到預防免疫反應。然而,最基本的挑戰在於,如何用新鏈來取代現有的DNA鏈,即定向突變。鋅指核酸酶是基因組改造...
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鋅指核酸酶技術可生成不可預知的錯誤
...重組和逆轉錄病毒法,不僅效率低,特異性也不高。鋅指核酸酶(Zinc-fingernucleases,ZFN)技術是近年來科學家們開發的一種基因組靶向修飾新技術。ZFN是人工改造的限制酶,由鋅指結構的DNA結合結構域和DNA切割結構域融合而成。它...
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新型雜合蛋白工具用於基因切割和編碼
...夠識別切割基因的特異性位點,而另一種細菌蛋白是一種核酸酶,能夠對DNA鏈進行切割。楊希望可以通過類似於同源重組的實驗操作,即通過切除或用功能片段置換DNA中有缺陷或不良的部分對基因組進行修飾。楊說他構建的雜合...
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核糖核酸酶Dicer的新靶標
細胞中的核糖核酸酶Dicer,能夠將microRNAs從它們的前體中切除出來,並且將長的雙鏈RNA加工爲短的siRNA。最近波蘭國家科學院(PolishAcademyofSciences)生物有機化學研究所研究人員JacekKrol和AgnieszkaFiszer等發現由CNG重複序列組成的含有長...
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核糖核酸酶XRN-2對microRNA的作用
...目標信使RNA之上、並從沉默複合物中釋放出來之後,核糖核酸酶XRN-2促進它們的降解。XRN-2以這種方式來起微RNA含量的一種體內平衡調控因子的作用,這個作用在對新的發育提示信號做出反應當中可能具有重要性。作者:
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治療基因性疾病的基因組巡航導彈
...終結果。然而,在2012年,名爲“轉錄激活子樣效應因子核酸酶”(TALENs)的工具賦予研究人員改變或關閉斑馬魚、蟾蜍、牲畜及其他動物甚至病人的細胞中特定基因的能力。這種技術以及其他新興的技術與已有的基因靶向技術...
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兩種新技術鑑定鋅指核酸酶切割脫靶位點的頻率
鋅指核酸酶(zincfingernucleases,ZFNs)被設計爲類似於熱跟蹤導彈,精確地導向以便找到並切割特異性DNA序列。然而,它們偶爾可能會剪錯位點,導致未曾預料到的裂口。2011年8月7日發表在Nature雜誌子刊上的兩篇論文描述了兩種系統性...
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華人學者Science基因組編輯新技術
...。最近,生物學家們發現,他們可通過添加一種切割DNA的核酸酶來提高這一過程的效率。鋅指核酸酶通常用於將核酸酶遞送到某一特定位點,然而由於鋅指酶無法靶向每一種可能的DNA序列,限制了它們的應用。此外,組裝這些蛋...
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青蛙體內的一種分子可用來治療腦癌
...化療。科學家從北部豹蛙的卵母細胞中分離出了這種核糖核酸酶。核糖核酸酶在生物體內普遍存在,它們負責整理那些自由飄浮的RNA鏈,通過結合到分子上從而將其切割成小的片斷。在細胞中RNA起着關鍵作用的部位,核糖核酸酶...
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NatureMethods:新一代CRISPRs有望成爲2015年重磅技術
...代)第二次感染病毒的時候,這些重複序列就能通過一種核酸酶靶向侵入的互補DNA,並摧毀它。2013年幾個研究組就利用了這一系統編輯真核生物基因,隨後看到在不少應用中CRISPRs迅速崛起,多個不同物種都實現了基因組中基因...
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抗癌新方向:疫苗與生物治療相結合
...是威斯康辛大學麥迪遜分校生物化學教授,長期從事核糖核酸酶的研究。1998年,RonaldRaines教授發現如何改變核糖核酸酶以避免其失活,不久之後他發現與其他途徑相比,核糖核酸酶工程對癌細胞的毒性更大。Raines博士最初的研...
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“蛋白手術刀”精確裁切基因片段助研發新療法
...)效應器,它負責尋找需要切斷的位點;另一種蛋白質是核酸酶,用以切斷DNA鏈,因此該雜交蛋白稱爲TAL效應器核酸酶。 切掉有缺陷或不想要的DNA部分,用DNA功能片段來替代,這一過程稱爲同源重組。雜交蛋白質的工作原理...
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離子交換層析介質的技術數據
...~1241800QSepharoseH.P.70mgBSA24~442~120.3150SPSepharoseH.P.55mg核糖核酸酶24~443~120.3150QSepharoseF.F.120mgHSA45~1652~120.2400SPSepharoseF.F.75mgBSA45~1654~130.2400DEAESepharoseF.F.110mgHSA45~1652~90.2300CMSepharoseF.F.50mg核糖核酸酶100~3006~130.2300QSepharoseBigB...
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新技術提升人類基因組修復效率
...研究表明,交換具有不同特性的鋅指狀物區域,可以改變核酸酶的定向性。Utah大學的DanaCarroll和德克薩斯大學西南醫學中心的MatthewPorteus,對該項工作進行了更進一步研究,即利用嵌合的鋅指狀物核酸酶(ZFNs)刺激青蛙、果蠅和人...
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NatureMethods:Cas9大有潛力
...ns-activatingRNA)結合形成tracrRNA/crRNA複合物,此複合物引導核酸酶Cas9蛋白在與crRNA配對的序列靶位點剪切雙鏈DNA。而通過人工設計這兩種RNA,可以改造形成具有引導作用的sgRNA(shortguideRNA),足以引導Cas9對DNA的定點切割。作者認...
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兩篇Science文章開創基因組編輯新時代
...”在他們的論文中,Zhang和他的同事利用細菌RNA,引導Cas9核酸酶在小鼠和人類基因組的特定基因位點上進行切割,完成了精確的目標鏈斷裂。而在另外一篇文章中,哈佛大學的遺傳學家GeorgeChurch和他的同事則利用CRISPR方法,成功...
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Cell:青年華人科學家解析基因組編輯
...具有更強的擴展性。此前Zhang研究組利用細菌RNA,引導Cas9核酸酶在小鼠和人類基因組的特定基因位點上進行切割,完成了精確的目標鏈斷裂。他表示,“CRISPR系統即使在從細菌細胞中取出酶和RNA,然後再插入到哺乳動物細胞中之...
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RNA研究先驅Nature獲piRNA突破性新發現
...的成員,它們或是充當磷脂酶,裂解磷脂分子,或是作爲核酸酶,切割核酸鏈。有人懷疑,但卻不確定,果蠅和小鼠一樣,Zucchini蛋白是一種核酸酶,可特異性裂解核酸(DNA和RNA)核苷酸亞單位間的聯結。在最新的Nature文章中,...
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豹蛙卵細胞分子能識別和殺死腦腫瘤
...胞方面具有高度的專一性。 兩棲酶實際上是一種核糖核酸酶,在試驗室中很容易合成。核糖核酸酶負責整理RNA中那些自由漂移的部分,它是通過黏附到分子上並把那些自由漂移的部分切成更小碎片的方法來完成這項任務的。...
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基因編輯有望治療血友病
...來的實驗將利用其中一種較成熟的技術,以一種叫作鋅指核酸酶的DNA作爲剪切工具,這種核酸酶可以被直接注射到血流中發生作用。B型血友病由一個基因突變導致,該基因突變會引導肝臟生成一種叫作第九凝血因子的凝血蛋白...
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減少內源性核糖核酸酶對逆轉錄聚合酶鏈反應的影響
...一些方法可用於阻止組織中RNA濃度的降低。外源性的核糖核酸酶(RNase)污染,特別是用RNase處理提取DNA時,通常是RNA丟失的一個重要原因。防止這種污染對保護RNA降解是絕對必需的,但對所有的RNA項目分析卻是不夠的。提取RNA時,...