4 阿米巴原蟲抗原和抗體的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 阿米巴原蟲抗原和抗體的測定原理
免疫熒光技術的原理是利用物質吸收光能後,產生激發態而發光的特性。將具有這種特性的熒光素(異硫氰酸熒光黃或羅丹明B200)用化學方法結合在特異的抗體(抗原)的分子上,又不損害其抗體或抗原活性的一種熒光顯微鏡下的示蹤技術。抗體和抗原的結合是高度特異的,所以只要知道其中的一個因子,也就知道了另一個因子。免疫熒光技術就是利用上述兩種特性,把不可見的抗原抗體的反應(一抗)與被熒光素標記的抗體(抗抗體)反應,變爲肉眼可見的熒光,再根據組織學和細胞學定位來判斷特異熒光所在。在熒光顯微鏡下我們所能見到的亮綠熒光,不是標本本身(無色)發出的,而是熒光物質受到激發後而發出的亮綠熒光。熒光標記抗體技術稱熒光抗體技術,熒光標記抗原技術稱熒光抗原技術。
4.4 試劑
(2)0.01mol/L pH7.2 PBS緩衝液。
(4)緩衝甘油(pH7.2)。
(5)熒光顯微鏡。
(6)溼盒。
4.5 操作方法
(1)抗原(或抗體)基質片(各種組織冰凍切片或培養細胞等)基質片從冰箱取出立即風乾。使用前經無水乙醇或丙酮、甲醇等固定劑處理(根據實驗要求選擇固定劑)。一般固定3~15min,室溫晾乾。
(2)被檢物(血清、腦脊液或其他滲出物等),根據需要用PBS適當稀釋(1∶5或1∶10)滴於抗原基質片上,置室溫或37℃溫箱反應30min~1h。
(3)0.01mol/L pH7.2 PBS沖洗15min(更換PBS 3次)。
(5)PBS沖洗同(3)。
4.6 正常值
4.7 化驗結果臨牀意義
4.8 附註
間接熒光抗體試驗高度敏感和特異,多以病原體爲抗原,直觀性強,可用於多種寄生蟲病的診斷。