新策略改善蛋白質相互作用分析
...物中的相互作用,人們已經開發出多種高通量的方法,如酵母雙雜交系統。然而,目前的高通量蛋白相互作用組(interactome)的數據集質量雖高,但覆蓋度很低。對於人類而言,95%以上的相互作用組還有待定位。酵母雙雜交系統...
行業資訊;臨牀快報;細胞分子與蛋白質組FXR1P與Btf相互作用的鑑定
...ciatedtranscriptionfactor1,Btf)蛋白質的相互作用。方法將利用酵母雙雜交系統進行胎腦cDNA文庫篩選出的藍色克隆提取酵母質粒後轉化大腸桿菌Top10,利用氨苄抗生素抗性篩選轉化有AD/Library質粒的轉化子,擴增後小量提取質粒,醋酸...
醫源資料庫;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2006年第6卷第2期中國協和醫科大學發PNAS文章
...學院,美國佛羅里達州立大學的研究人員研發了一種新型酵母雙雜交系統,能有效識別靶向核糖體蛋白L12-L10相互作用的抗結核藥物,這對解決結核菌耐藥性問題具有重要的意義。相關成果公佈在《美國國家科學院院刊》(PNAS)...
藥品天地;專業藥學;藥學研究酵母雙雜交體系的新發展
摘要酵母雙雜交系統是研究蛋白質相互作用的一種有效方法。本文簡要介紹了雙雜交體系的原理、應用和自身存在的問題,並對其最新發展做了重點闡述。 關鍵詞酵母雙雜交系統,蛋白質一蛋白質間相互作用 自從Fields和...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;生物化學基因分離克隆的方法
...克隆,並通過遺傳轉化實驗證實目的基因的功能。 8酵母雙雜交系統分離克隆基因 酵母雙雜交系統體系可以發現蛋白相互作用的蛋白的編碼基因。這種方法的用途有:驗證已知基因間的相互作用;可以快速發現編碼蛋白...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術蛋白質芯片技術
...蛋白質芯片大多數還侷限化學型芯片上。Uetz等[6]使用酵母雙雜交系統構築了蛋白質芯片。Arenkov等[7]曾將探針蛋白質固定於聚丙烯酰胺凝膠中,待測樣品通過電泳與凝膠中的探針蛋白髮生特異性結合,從而捕獲感興趣的靶...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2005年第5卷第8期;綜述NCLs致病相關基因CLN8真核表達載體的構建及檢測*
...ot結果表明所表達的蛋白爲融合表達的Flag-CLN8。3討論應用酵母雙雜交系統篩選相互作用蛋白,在篩選過程可出現假陽性。由於酵母的翻譯後加工系統與哺乳動物細胞的翻譯後加工系統不盡相同,某些哺乳動物細胞的蛋白需經過翻...
醫源資料庫;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2007年第7卷第1期CLN8P與ND1相互作用的鑑定
...基因的相互作用蛋白來推測該基因的功能。爲此,我們用酵母雙雜交系統尋找與CLN8P相互作用的蛋白。 但是應用酵母雙雜交系統篩選相互作用蛋白,在篩選過程可出現假陽性。因此,將篩選得到的陽性質粒一一與誘餌質粒重...
合作平臺;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2005年第5卷第4期;論著乙型肝炎病毒抗原與金屬硫蛋白相互作用的研究
...與HBV抗原相互作用的蛋白基因,解放軍第302醫院學者應用酵母雙雜交系統3構建HBV抗原誘餌質粒,轉化酵母細胞AH109並在其中表達,與含肝文庫質粒的酵母Y187進行配合、雙雜交,在營養缺陷培養基(SD/Trp-Leu-His-Ade)上及X-αgal藍白斑雙重...
行業資訊;臨牀快報;肝膽病NCLs致病相關基因CLN8酵母雙雜交誘餌質粒的構建及自激活作用的檢測
...建的誘餌質粒對報告基因LacZ無自激活作用。 3討論 酵母雙雜交系統(Yeasttwohybridsystem)是StanleyFields等提出並建立的一種直接於細胞內檢測蛋白-蛋白之間相互作用的遺傳學方法[6],其最突出的特點是能夠在酵母這種繁殖...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第24期;論著