酵母雙雜交實驗常見疑難解答
問:如果誘餌蛋白對酵母細胞是有毒的,該怎麼辦? 答:在有些情況下,在液體培養基中培養不好的菌珠可以在固體培養基上生長得很好。重懸克隆於1ml的SD/–Trp,接着將重懸液平鋪於5個100-mm的SD/–Trp平板。在30℃下溫浴,...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術NCLs致病相關基因CLN8酵母雙雜交誘餌質粒的構建及自激活作用的檢測
【摘要】目的構建酵母雙雜交用NCLs致病相關基因CLN8的誘餌質粒,並檢測其自激活作用。方法PCR擴增目的基因片段,酶切後與誘餌載體pLexA連接形成重組誘餌質粒,化學轉化法將重組誘餌質粒轉化到酵母細胞EGY48中,β-半乳糖苷酶...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第24期;論著酵母雙雜交體系的新發展
摘要酵母雙雜交系統是研究蛋白質相互作用的一種有效方法。本文簡要介紹了雙雜交體系的原理、應用和自身存在的問題,並對其最新發展做了重點闡述。 關鍵詞酵母雙雜交系統,蛋白質一蛋白質間相互作用 自從Fields和...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;生物化學乙型肝炎病毒前S蛋白作爲“餌”載體的構建及表達
...研究病毒感染機制,也有助於阻斷病毒受體的入胞。 酵母雙雜合體系(yeasttwo-hybridsystem)的基本原理是利用釀酒酵母(SaccharomycesCerevisiae)的一些轉錄因子(如:GAL4)在生理狀態下,由兩個可分離、相對獨立的功能結構域組成:DNA結...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學CLN8P與ND1相互作用的鑑定
...1(NADHdehydrogenasesubunit1,ND1)蛋白質相互作用。方法將用酵母雙雜交技術篩選出的陽性克隆提取質粒後測序,與CLN8基因表達載體重新共轉入酵母細胞,用β-半乳糖苷酶濾膜分析檢測,通過濾膜上菌落顏色的改變來確認是否有相互...
合作平臺;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2005年第5卷第4期;論著FXR1P與Btf相互作用的鑑定
...ciatedtranscriptionfactor1,Btf)蛋白質的相互作用。方法將利用酵母雙雜交系統進行胎腦cDNA文庫篩選出的藍色克隆提取酵母質粒後轉化大腸桿菌Top10,利用氨苄抗生素抗性篩選轉化有AD/Library質粒的轉化子,擴增後小量提取質粒,醋酸...
醫源資料庫;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2006年第6卷第2期加拿大開發出DNA條形碼融合技術
...數,在同等成本條件下能將效率提高10倍。在廣泛使用的酵母雙雜交(Y2H)方法中,攜帶一個“誘餌”蛋白的酵母細胞與攜帶一個“獵物”蛋白的酵母細胞配對。對Y2H系統進行操縱後,只有“誘餌”與“獵物”蛋白黏在一起的細...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞人新基因EOLA1研究快訊
【關鍵詞】人類新基因;金屬硫蛋白2A;酵母雙雜交大量的研究結果表明血管內皮細胞損傷既是誘發機體發生凝血障礙、休克和多臟器損傷等嚴重病症的重要因素,又是這些疾病的基本病理改變之一。內皮細胞過度活化引起的失控...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第3期專家提出了肝炎研究的新途徑——基因克隆化
...毒基因的蛋白質因子,可以有很多基因克隆化方法,其中酵母單雜交技術一方面可以克隆基因,而後還能用於研究被克隆基因的功能,因此具有重要應用前景。成教授等曾利用酵母單雜交技術篩選SP1(一種乙肝病毒基因啓動子)...
行業資訊;臨牀快報;肝膽病人正常胃黏膜細胞全長cDNA文庫的構建及鑑定
...2.0kb.結論構建的人正常胃黏膜細胞cDNA文庫爲高效全長的酵母雙雜交cDNA文庫,符合cDNA文庫的要求,可進一步用酵母雙雜交的方法探尋與胃疾病相關的基因。【關鍵詞】胃黏膜細胞;cDNA文庫;全長ConstructionandidentificationofacDNAlibraryofhumanga...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2010年第5卷第1期