核酸分離純化實驗技術指南
...裂解液的裂解能力,裂解將不完全,從而導致RNA得率低。質粒DNA提取常見問題分析Q:未提出質粒或質粒得率較低,如何解決?A:1.大腸桿菌老化:請塗布平板培養後,重新挑選新菌落進行液體培養。2.質粒拷貝數低:由於使用低拷...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜入門核酸分離純化實驗技術指南
...裂解液的裂解能力,裂解將不完全,從而導致RNA得率低。質粒DNA提取常見問題分析Q:未提出質粒或質粒得率較低,如何解決?A:1.大腸桿菌老化:請塗布平板培養後,重新挑選新菌落進行液體培養。2.質粒拷貝數低:由於使用低拷...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜分析實例一個植物乳桿菌隱蔽質粒的測序和註釋
...植物乳桿菌(LactobacillusplantarumCICC6002)中發現了1個隱蔽質粒(pLP2111),並將其克隆到pUC18質粒上進行測序。序列分析表明pLP2111大小爲2111bp;僅有1個ORF,編碼1個37.0kDa的複製蛋白;有1個17bp的重複序列重複了13次。BLAST結果顯示pLp2...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第1期HBV前C區部分序列亞克隆與FQ-PCR標準曲線的製備
...熒光定量PCR標準曲線。方法設計特異性引物,將pBR322-HBV質粒前C區部分序列PCR產物AT亞克隆至pBS-T載體,提取和純化質粒DNA,製作標準品並在FQ-PCR儀上得到標準曲線,進而對精確度和重複性進行統計分析。結果獲得了預期希望的質...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2007年第7卷第6期幽門螺桿菌cagA基因探針的製備與臨牀應用
...gA基因探針的臨牀意義。方法 構建含cagA基因片段的重組質粒克隆株,以重組質粒DNA爲模板PCR擴增cagA基因片段用長臂光敏生物素標記產物DNA,對病人進行基因探針檢測及PCR、尿酶試紙檢測。結果 淺表性胃炎、深度胃炎、胃潰...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學質粒DNA的提取與純化
1質粒DNA的提取 質粒DNA是細菌細胞中小的共價閉合環狀雙鏈DNA。由於基因工程中使用的載體主要是質粒,因此,質粒DNA的提取和純化是進行基因工程的重要前提。提取質粒DNA的方法很多,下面介紹幾種有代表性的程序。 1)...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術第五節 臨牀表現
...因探針診斷 淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。 (1)質粒DNA探針 ①隱蔽質粒DNA探針,淋球菌質粒分爲三種:接合性質粒,分子最大,爲36kbDNA; 耐藥性質粒包括兩...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;基因診斷與性傳播疾病大腸埃希菌耐藥性質粒的提取及鑑定
...希菌對抗生素的敏感性,同時用鹼裂解法對耐藥菌株進行質粒的抽提,將得到的質粒轉化至受體菌JM109進行質粒耐藥性的鑑定。結果40株大腸埃希菌對頭孢菌素等9種抗生素呈現出不同程度的耐藥現象。對氨苄西林和青黴素的耐藥...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2008年第7卷第2期肺炎克雷伯桿菌產β-內酰胺酶耐藥性質粒的提取及鑑定
【摘要】目的探討耐藥性質粒在肺炎克雷伯桿菌中的耐藥機制。方法採用瓊脂稀釋法測定臨牀分離的31株肺炎克雷伯桿菌對阿奇黴素、氨苄西林和頭孢菌素類抗生素的耐藥性,採用質粒DNA小量製備的鹼裂解法對耐藥菌株進行質粒...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2007年第6卷第8期DNA的提取和純化
...(有含有行當抗生素的液體培養基中生長),然後從中純化質粒,質粒的提純幾乎總是如此。現在使用的許多質粒載體(如pUC系列)都能複製到很高的拷貝數,惟致只要將培養物放在標準LB培養基中生長到對數晚期,就可以大量提...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術