質粒DNA的提取與純化
1質粒DNA的提取 質粒DNA是細菌細胞中小的共價閉合環狀雙鏈DNA。由於基因工程中使用的載體主要是質粒,因此,質粒DNA的提取和純化是進行基因工程的重要前提。提取質粒DNA的方法很多,下面介紹幾種有代表性的程序。 1)...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術大腸埃希菌耐藥性質粒的提取及鑑定
...耐藥性分別達到了87.5%和97.5%。從兩株耐藥大腸埃希菌中提取出質粒,對其中一株進行轉化鑑定,確定爲耐藥質粒,大小約爲3.0kb。結論臨牀分離大腸埃希菌對多種抗生素表現出較高的耐藥性,而耐藥性質粒的存在是細菌產生耐藥...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2008年第7卷第2期肺炎克雷伯桿菌產β-內酰胺酶耐藥性質粒的提取及鑑定
...性,採用質粒DNA小量製備的鹼裂解法對耐藥菌株進行質粒提取,通過轉化試驗對質粒的耐藥性進行鑑定。結果31株肺炎克雷伯桿菌對阿奇黴素、氨苄西林和頭孢菌素類抗生素有不同程度的耐藥現象。其中從兩株耐藥性肺炎克雷伯...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2007年第6卷第8期DNA的提取和純化
...22-類的質粒,從經氯黴素處理和未經處理的培養物中提取質粒的產量迥然不同,前者大爲增高。多年來,加入足以完全抑制蛋白質合成的氯黴素μg/ml)已成爲標準的操作、用該方法提取的質粒DNA量,對於分子克隆中幾乎所有...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術核酸分離純化實驗技術指南
總RNA提取常見問題分析Q:RNA降解A:1.新鮮細胞:如果試劑沒有問題,且外源性污染也可以排除,那麼降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養皿中裂解細胞,一定要使裂解液能覆蓋住細胞。2.新鮮組織:某...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜入門核酸分離純化實驗技術指南
總RNA提取常見問題分析Q:RNA降解A:1.新鮮細胞:如果試劑沒有問題,且外源性污染也可以排除,那麼降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養皿中裂解細胞,一定要使裂解液能覆蓋住細胞。2.新鮮組織:某...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜分析實例質粒DNA的鹼裂解法提取與純化
...量純化的質粒DNA分子。目前已有許多方法可用於質粒DNA的提取,本實驗採用鹼裂解法提取質粒DNA。 鹼裂解法是一種應用最爲廣泛的製備質粒DNA的方法,其基本原理爲:當菌體在NaOH和SDS溶液中裂解時,蛋白質與DNA發生變性,...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術一個植物乳桿菌隱蔽質粒的測序和註釋
...驗室保存。表1在植物乳酸桿菌中發現的質粒列表1.2質粒提取離心收集植物乳桿菌CICC6002的菌體,用華舜質粒提取試劑盒(華舜,上海)提取質粒。不同於說明書的步驟是:用GTEL溶液(葡萄糖50mmol/L,TrisCl25mmol/L,EDTA10mmol/L,溶...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第1期重組質粒的提取
質粒提取過程參照E.Z.N.APlasmidExtractionKit進行。 (1)用無菌牙籤挑取平板上白色單菌落(5~10個)分別接種至3-5mlLB培養液(Amp+)中,200rpm培養14~16小時; (2)室溫下,10,000g離心1分鐘收菌; (3)加入溶液I250μl,渦旋重...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術質粒消除現象的研究現狀與意義
...除R質粒的最佳時間爲48h。王雲[20]等用馬齒莧、金銀花提取液對綠膿桿菌PA11株R質粒體內消除研究,結果顯示,兩種藥作用24h均未獲得消除子,作用48h和72hR質粒平均消除率馬齒莧爲2.15%、金銀花爲12.25%,消除子均表現爲多重耐...
醫源資料庫;在線期刊;中華中西醫雜誌;2005年第6卷第22期