差異表達基因克隆技術的新進展
...PCR擴增,其產物經測序膠顯示出來,再回收鑑定克隆差異條帶。1992年Liang和Pardee[1]建立此技術時,5´端採用20條隨機引物,每條由10個鹼基組成,3´端採用12條引物即T12MN(M=A、C或G,N=A、G、C、T)。這種組合從統計學上幾乎...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;生物化學分子生物學試驗方法探討四-PCR常見問題
...大於48h後帶型不規則甚致消失。 假陰性,不出現擴增條帶 PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的製備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及,④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。 模板:①模板中...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術人組織激肽釋放酶單克隆抗體的製備與初步鑑定(基金項目)
...組菌表達的GST-hK1融合蛋白免疫小鼠,獲得了分泌hK1特異單克隆抗體的雜交瘤細胞株。方法將KLK1cDNA克隆入真核表達質粒,用獲得的重組質粒轉染COS-1細胞,經間接免疫熒光試驗證明,上述單克隆抗體能與轉染細胞發生特異反應。...
合作平臺;在線期刊;中華醫藥雜誌;2004年第4卷第4期;論著人皰疹病毒6型101K被膜蛋白主要抗原決定簇區原核表達克隆的構建和表達
...質粒誘導菌表達產物出現相對分子質量爲31900的融合蛋白條帶。結論HHV6101K蛋白的原核表達克隆構建和表達成功,爲進一步完善HHV6活動性感染的血清學診斷提供了實驗基礎。 [關鍵詞]皰疹病毒6型,人;101K被膜蛋白;...
醫源資料庫;在線期刊;齊魯醫學雜誌;2006年第21卷第1期乙型肝炎表面抗原膠體金試劑的研製
...表面抗原(HBsAg)膠體金試劑系用2株小鼠抗HBsAg不同表位的單克隆抗體,一株用膠體金標記,並固定在玻璃纖維素膜上;另一株包被硝基纖維素膜作爲固相。然後,將該兩種膜分別粘貼在雙面膠白色塑料墊板上,製成試紙條。其原...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;免疫學抗幽門螺桿菌單克隆抗體的製備和臨牀應用
抗幽門螺桿菌單克隆抗體的製備和臨牀應用 Marshall等於1983年首次從胃粘膜組織中分離到幽門螺桿菌(Helicobacterpylori,Hp),並報道和B型胃炎及消化性潰瘍密切相關。目前鑑定和診斷Hp感染有許多方法,但受種種因素制約,但...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;中國幽門螺桿菌研究靈敏的人血清甲狀腺球蛋白單克隆抗體ELISA法的建立
靈敏的人血清甲狀腺球蛋白單克隆抗體ELISA法的建立標記免疫分析與臨牀2000年第2期第7卷方法研究作者:湯特 葉靜 張天庚 陳祖培 閻玉芹單位:天津醫科大學內分泌研究所 天津300070關鍵詞:甲狀腺球蛋白;單克隆抗體;...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學人IL-12的克隆、表達及生物活性的鑑定
...力顯著超過12.5ng/ml參照IL-12的效應。在與抗IL-12的中和性單克隆抗體(MAB219)作用後,其活性大大減弱。 2.4 IL-12的免疫學鑑定 對經免疫濃縮的轉導細胞上清及未經濃縮的細胞裂解進行Westernblot分析,結果在70kD處可見有特異性...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學小鼠次級淋巴組織趨化因子基因的克隆及真核表達載體的構建ˇ
...菌,用mSLC特異引物做菌落的質粒PCR擴增出400bp左右的特異條帶(圖3)。用NheI/NotI雙酶切,可切得約5.4kb和2kb的兩條帶(圖4),其中2kb條帶爲mSLC-GPI-Fc片斷;用NheI/EcoRV雙酶切可獲得約7kb和400bp的兩條帶(圖5),其中分子量在400bp位...
合作平臺;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2004年第3卷第11期;論著嗜酸乳桿菌推定的β半乳糖苷酶基因在大腸桿菌中的功能性表達
...℃延伸10min.凝膠電泳檢測PCR結果,PCR純化試劑盒回收目的條帶。1.3嗜酸乳桿菌β半乳糖苷酶表達載體構建分別用對應的內切酶對PCR產物和載體進行雙酶切,膠回收後用T4DNA連接酶連接,再將連接產物電轉化入宿主菌株。共構...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第2期