蛋白復性(一)-綜述:包涵體表達的蛋白的復性
摘要綜述了包涵體形成、包涵體分離和溶解、包涵體摺疊復性的方法、復性產率低下的主要因素以及通過分子伴侶、低分子量添加物等的應用而提高了蛋白質復性產率。 關鍵詞包涵體蛋白質復性 AbstractStrategiesfordecreasingth...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術蛋白復性(二)-基因重組蛋白質的體外復性
...腸桿菌中表達時,由於表達量高,往往形成無生物活性的包涵體。包涵體必須經過變性和復性的過程才能獲得有活性的重組蛋白。如何提高基因重組蛋白質的復性率,是生物工程技術的一個研究熱點。對近年來的重組蛋白質的復...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術蛋白質純化及復性
...)高效表達時,往往以不溶的、無活性的蛋白聚集體,即包涵體(inclusionbody)的形式存在於細胞內。必須從細胞內分離出包涵體,採用高濃度變性劑(如7.0mol/L鹽酸胍、8.0mol/L脲)溶解包涵體,然後除去變性劑或降低變性劑的濃度...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜論文分子生物學試驗方法探討三-如何選擇凝膠
...擴張柱牀吸附技術STREAMLINE便很適合作粗分離。 純化包涵體蛋白 包涵體蛋白往往需溶於6M鹽酸胍或尿素中。高化學穩定性的Sepharose12及Sepharose6FF凝膠過濾介質很適合在變性條件下做純化。變性純化後的蛋白質需要復性至蛋...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術如何選擇凝膠
...HisTrap試劑盒提供整套His-Tag蛋白的純化方法。9.純化------包涵體蛋白包涵體蛋白往往需溶於6M鹽酸胍或8M尿素中。高化學穩定性的Superose12及Sepharose6FF凝膠過濾介質很適合在變性條件下做純化。變性純化後的蛋白需要復性至蛋白的天...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜入門如何選擇凝膠
...HisTrap試劑盒提供整套His-Tag蛋白的純化方法。9.純化------包涵體蛋白包涵體蛋白往往需溶於6M鹽酸胍或8M尿素中。高化學穩定性的Superose12及Sepharose6FF凝膠過濾介質很適合在變性條件下做純化。變性純化後的蛋白需要復性至蛋白的天...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;儀器介紹與操作重組結核分枝桿菌38KDa蛋白抗原製備及其血清學診斷價值
...進行SDS-PAGE誘導表達鑑定,考馬斯亮藍R-250染色。 1.2.2包涵體收集與初步純化5000rpm,15min收集誘導後的菌體,將菌體沉澱以30ml/mg重懸於細胞超聲波破碎緩衝液(50mmol/LTRIS·HClpH8.0;1mmol/LEDTA;50mmol/LNaCl;5%甘油),冰浴條...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第8期嗜酸乳桿菌推定的β半乳糖苷酶基因在大腸桿菌中的功能性表達
...,每分鐘釋放1μmol鄰硝基苯酚爲1個酶活單位(U)。1.6包涵體表達的重組β半乳糖苷酶的提取和復性根據誘導表達實驗結果,在37℃培養構建的3株重組菌株各500ml,加終濃度爲0.4mmol/L的IPTG誘導表達8h,然後離心收集表達菌體...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第2期抗人VEGF165單鏈抗體的構建與表達
...℃預熱的LB,42℃誘導6h。收集細菌,超聲破碎後離心獲得包涵體,用SDS-PAGE分析及WesternBlot檢測。包涵體用洗滌液(2mmol/LEDTA,10mmol/LTrisCl,1%Triton—x—100,Ph8.0)洗滌3次後,加入變性液(6mol/L鹽酸胍,100mmol/LThisCl,2mmol/LEDTA...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學人絨毛膜促性腺激素β亞基在大腸桿菌中的表達
...體,經序列分析證明,再轉化到表達菌BL21中表達,所得包涵體經過柱純化,復性,免疫發光分析和動物試驗測定其活性。結果:經SDS-PAGE電泳在18kD左右有一條明顯的新增蛋白帶,與預期的分子量相符,並用Western印跡證實,rhCGβ...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學