登革2型病毒04株基因組全序列的測定
...劑(GibcoBRL),5×第一鏈緩衝液6μl,dNTPs(Phamacia)及AMV反轉錄酶(Promega),加水至總體積30μl,42℃保溫60min進行反轉錄。反應完畢,95℃5min滅活cDNA作爲PCR模板。取cDNA,10×PCR緩衝液,正向引物、反向引物,TaqPlusⅡ聚合酶1U,補...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學聚合酶鏈反應在幽門螺桿菌感染中的新進展
...物順序與Ho者不同,作者採用了反向轉錄PCR技術,先利用反轉錄酶合成RNA,然後再擴增cDNA。其敏感性比常規PCR提高25~50倍,可檢測到2個細菌,檢測15份標本,14份標本與呼氣試驗和培養相同,該方法的特異性爲100%,Nguycn等用該...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;中國幽門螺桿菌研究老年性癡呆病人載脂蛋白E基因多態性與澱粉樣β蛋白前體表達的關係
...dNTPs(10μmol/L)2μL,MgCl2(25μmol/L)4μL,10×Buffer2μL,AMV反轉錄酶(2×107U/L)1μL和適量的DEP處理水。於42℃90min,52℃30min,-20℃保存。②App16-17表達引物(上海市精神衛生中心江三多教授提供)設計:參考文獻[2]取App基因第16、1...
醫源資料庫;在線期刊;齊魯醫學雜誌;2006年第21卷第4期甲胎蛋白在臨牀診斷中的應用
...癌的診斷率。AFP-IgM有望成爲早期肝癌診斷的敏感指標,反轉錄酶、聚合酶反應等基因技術也開始用於肝癌的診斷。非腫瘤性肝病1慢性乙型肝炎陳榮貴選擇124例不同程度慢性乙肝患者,檢測血清AFP含量從低到高依次爲輕度慢性乙...
合作平臺;醫學論文;中西醫結合論文;中醫中藥人樹突狀細胞cDNA質粒文庫的構建及其大規模隨機測序體系的建立①
...PolyA+RNA。取4μgPolyA+RNA,以NotI-OligodT爲引物,在SuperscriptⅡ反轉錄酶的作用下合成cDNA第一鏈,第二鏈合成後經T4DNA聚合酶補平,連接上SalⅠ適配子、經NotI酶切,用Sepharose400分離柱去除500bp以下小片段,然後將產物定向克隆至pSPORT2.0...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學1-3分子生物學發展簡史
...timore又同時從雞肉瘤病毒顆粒中發現以RNA爲模板合成DNA的反轉錄酶,又進一步補充和完善了遺傳信息傳遞的中心法則。 對蛋白質結構與功能的進一步認識 1956-58年Anfinsen和White根據對酶蛋白的變性和復性實驗,提出蛋白質...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;分子生物學第三節 基因擴增技術(PCR)
...RT-PCR。把由RNA轉化成DNA的過程叫做反轉錄,反轉錄需要在反轉錄酶的作用下完成。 四、PCR反應的基本條件及其對PCR的影響 (一)模板核酸 PCR可以以DNA或RNA爲模板進行核酸的體外擴增。不過RNA的擴增首先逆轉錄成cDNA...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;基因診斷與性傳播疾病第八節 DNA重組及基因工程技術對醫學和生命科學發展的貢獻
...文庫中可以克隆得該生物的基因組基因;以mRNA爲模板經反轉錄酶催化合成與NRA序列互補的DNA稱爲cDNA,可以從組織細胞提取mRNA構建cDNA文庫,完整的cDNA文庫可以獲得特定基因的cDNA構隆。目的基因也可以用PCR或人工合成核酸的方法...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;生物化學與分子生物學頭穴針刺對腦出血大鼠腦組織H+-ATPaseβ亞基mRNA表達影響的實驗研究
...加入4μl5×Buffer;0.5μlHPRI;4μldNTP;1μlMLVRNase(反轉錄酶),配好反應液後42℃水浴1h,冰浴冷卻2min,所得反應液用於PCR反應。PCR產物克隆:在0.5ml的微量離心管中加入以下試劑:反轉錄產物1μl,10XTaqDNA聚合酶緩衝液2.5...
醫源資料庫;在線期刊;中華中西醫雜誌;2007年第8卷第10期CML病人TCRVβ21寡克隆T細胞及其CDR3序列特點
... RNA提取應用RNAzol試劑盒(Gibco,BRL)並應用隨機引物和反轉錄酶試劑盒(SuperscriptⅡ,Gibco,BRL)反轉錄合成cDNA第一鏈。均按常規方法進行。 1.3 引物 用於非標記PCR的24個Vβ引物和一Cβ引物[2~4],用於runoffreaction的5’...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學