質粒DNA的大量製備
...氯黴素進行處理,具有抑制細菌複製的優點,可減少細菌裂解物的體積和粘稠度,極大地簡化質粒純化的過程。所以一般說來,儘管要在生長中的細菌培養物里加入氯黴素略顯不便,但用氯黴素處理還是利大於弊。 4)於37...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術小鼠IL-5真核表達質粒的構建和體外表達
...上清液。 1.2.5Westernblot檢測IL-5的表達首先將轉染細胞裂解液或培養上清用2×SDS混勻,100℃煮沸5min。接着用12%SDS聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳分離,將分離的蛋白質轉移到PVDF膜上,用大鼠抗小鼠IL-5抗體作爲一抗,辣根過氧...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2007年第7卷第8期質粒DNA的鹼裂解法提取與純化
...。目前已有許多方法可用於質粒DNA的提取,本實驗採用鹼裂解法提取質粒DNA。 鹼裂解法是一種應用最爲廣泛的製備質粒DNA的方法,其基本原理爲:當菌體在NaOH和SDS溶液中裂解時,蛋白質與DNA發生變性,當加入中和液後,質...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術噬菌體生物擴增法檢測結核桿菌在糖尿病合併結核感染診斷中的應用
...穿刺液10例,膿液5例。1.2材料(1)結核分枝桿菌噬菌體裂解試劑盒(EASTPLaqueTBRM)爲英國BIOTEClab公司產品,由上海金浩科技發展有限公司提供。(2)抗酸染色液:由(臺資)珠海貝素生物技術有限公司提供。(3)分枝桿菌培養...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代內科學雜誌;2008年第5卷第1期Epstein-Barr病毒殼抗原gp125的純化和應用
...感染量感染細胞,並於不同時間觀察細胞病變,收集細胞裂解液,免疫斑點檢測,病毒接種量在IPFU/cell,感染48小時,抗原表達量最高。 2.2 不同的細胞裂解方法對抗原的影響 將感染細胞經不同的物理化學方法裂解,免疫...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學結核分枝桿菌ESAT-6蛋白的表達及純化研究
...濃度10mg/ml,搖勻,酶解1~2h。在冰上用超聲波處理。將裂解液離心取上清去沉澱。將谷光甘肽-瓊脂糖樹脂4ml加入到裂解上清液,放置於4℃下230rpm搖牀振盪2~3h。再離心棄上清,加入清洗液PBS使其均勻,進行離心4000rpm,5min,棄...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第6期RNA干擾對人瘢痕疙瘩成纖維細胞TGFβ1刺激後膠原合成的影響
...TCA。用冰預冷的PBS洗細胞2次後,換加0.5mL1%SDS、0.1mmol/LNaOH裂解液,37℃過夜裂解細胞。每組取細胞裂解液0.3mL加入裝有8mL閃爍液的瓶中,劇烈振盪,室溫靜置暗處,待其完全溶解後用閃爍儀計數。1.3統計學方法採用SPSS10.0統計軟件...
醫源資料庫;在線期刊;局解手術學雜誌;2009年第18卷第2期熱休克蛋白在內源性抗原提呈過程中的研究進展
...AP抗體相結合的成分。經SDS-PAGE電泳,HSP70組TAP單抗沉澱物裂解液在凝膠中出現一條分子量爲70kD的條帶,BSA組未見分子量爲70kD的條帶。鑑於TAP僅存在於細胞內質網膜上,上述結果表明:HSP70-抗原肽複合物是通過其中的HSP70與內質...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2006年第6卷第3期噬菌體裂解法快速培養鑑定結核分支桿菌
...培陰標本17例,本法陽性4例,檢出率爲23.5%。結論噬菌體裂解法具有很高的敏感性和特異性,同時與傳統方法比較具有較高的藥敏符合率。 現在大部分地區肺結核患者的診斷是依靠實驗室診斷、臨牀症狀和體徵,而實驗室診...
合作平臺;在線期刊;中華中西醫雜誌;2005年第6卷第7期;檢驗與臨牀酶聯免疫吸附試驗檢測HCVNS3-4A蛋白酶活性
...抗體發生陽性反應。ELISA證實HCVNS3-4A蛋白酶能使特異底物裂解。正交實驗獲得ELISA的最佳實驗條件,其P/N值爲3.63,批內和批間變異係數(CV)分別爲4.16%和7.52%。此方法測定1,4萘醌對HCV蛋白酶活性50%抑制濃度(IC50)爲8.36μmol/L。結論 ...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學