磷酸化蛋白質及多肽相關研究的技術進展
...定。用於富集磷酸化蛋白質、肽段的經典方法有金屬離子親和層析(IMAC)[10]、生物素―親和素富集[11]、免疫沉澱[12]和磷酸化抗體親和層析[13]等方法。上述方法大多是基於層析技術,而層析柱填料的性質則是影響富集效果的關鍵因...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞庚型肝炎病毒NS5區部分基因的表達及其在EIA中的初步應用
...03的可溶性蛋白,其氨基端含有6個組胺酸肽段,可經Ni-NTA親和層析純化。免疫印跡分析表明,該表達產物可與HGV感染患者體內的HGV抗體特異性結合。結論 克隆了HGVNS5部分基因並獲得初步表達,表達的HGVNS5蛋白具有特異抗體結合...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學新穎的融合蛋白表達系統
...蛋白等。 由於利用tag的特性通常可以對融合蛋白進行親和層析等分離提純,更多情況下選擇融合表達是爲了簡化重組蛋白的純化。因此出現兩種融合表達類型:一是fusiontag位於目的蛋白的N端,這時tag可以提供良好表達所必...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術結合酪氨酸蛋白激酶受體EphB2的功能短肽的篩選
...陽性克隆經IPTG誘導表達融合蛋白,並利用Ni-NTA金屬螯合親和層析在變性條件下對錶達的蛋白進行純化,以此純化蛋白爲靶,將其包被於ELISA板上,進行3輪親和篩選。結果電泳分析表明:表達的融合蛋白主要以包涵體的形式存在...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學人用單克隆抗體質量控制技術指導原則
...類 用免疫雙擴散法或其他適宜的方法測定。 2.親和力 用可靠、準確的方法測定單克隆抗體(以下簡稱爲單抗)的親和常數或相對親和力。一般情況下,對於免疫原爲可溶性的單抗,測其親和常數,對於免疫原爲顆...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生物工程下游技術CD59融合蛋白表達載體構建及其在大腸桿菌中的表達
...克隆入PinPointxa—3質粒中。IPTG誘導融合蛋白表達,產物經親和素樹脂親和層析。在體外微量反應性溶血抑制實驗中檢測重組CD59純化樣品的生物學活性。結果篩選得到的重組子誘導後表達分子量約爲22kD的生物素化CD59融合蛋白。親...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學凍幹基因工程α2a干擾素製造及檢定規程
...擾素基因重組質粒的大腸桿菌,經發酵培養及單克隆抗體親和層析後精製而成。用於治療某些病毒性疾病及部分腫瘤疾病。 1菌種 1.1菌種來源 基因工程α2a干擾素工程菌由帶有人α2a干擾素基因的重組質粒轉化大腸桿菌...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;中國生物製品規程第二節 抗原抗體反應的特點
...可知,K值是反映抗原抗體間結合能力的指示,所以抗體親和力通常以K值表示。 抗原抗體複合物解離取決於兩方面的因素,一是抗體對相應抗原的親和力;二是環境因素對複合物的影響。高親和性抗體的抗原結合點與抗原表...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;免疫學和免疫學檢驗第二節 放射性碘標記
...用來分離單碘化、多碘化及已受損傷的蛋白質。 5.親和層析法利用蛋白質與其特異抗體或受體的結合來分離、純化標記蛋白質。此法特異性強,保持生物活性好,但操作較複雜。 6.高效液相層析法此法最大優點是分離...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸四、膜輔蛋白(CD46)
...膜輔蛋白(membranecofactorprotein,MCP)由Cole等(1985)應用C3b親和層析在外周血淋巴細胞上發現的一種膜蛋白。由於其奇特的電泳特徵,起初被命名爲gp45-70,但進一步研究發現,它對I因子介導的對C3b和C4b的裂解有輔助活性,故更命...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;細胞和分子免疫學