重組CD200基因在COS-7細胞中的瞬時表達
...S-7細胞中的瞬時表達。方法體外擴增並酶切鑑定pcDNA3-CD200質粒;常規方法培養COS-7細胞;用電轉染基因法將pcDNA3-CD200質粒轉入COS-7細胞中,用流式細胞術(FCM)檢測轉染細胞CD200表達。結果轉染COS-7細胞後72h,CD200基因表達陽性的...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2006年第6卷第12期新型增殖性腺病毒治療肝癌的實驗研究
...乙錠購自GENE公司;膠回收試劑盒、PCR產物回收試劑盒、質粒DNA製備試劑盒和病毒DNA提取試劑盒購自QIAGEN公司;人肝癌細胞株BEL-7402、人肝癌細胞株QGY-7703購自中國科學院上海細胞生物學研究所,人肝癌細胞株PLC/PRF5、人肝癌細胞...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2006年第6卷第9期hIL-16cDNA的克隆、測序及在E.coli中的表達與純化研究
...序與表達:利用E.coli表達載體pTrxFus,構建hIL16cDNA的重組質粒,轉化E.coli後,經色氨酸誘導,表達出相對分子質量(Mr)爲30000的可溶性融合蛋白,表達量佔菌體蛋白的30%。序列測定證實,此片段長393bp,確爲hIL-16cDNA。經一步滲透...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學鉤端螺旋體Lipl21基因真核質粒構建及在HeLa細胞的表達
...構建鉤端螺旋體外膜脂蛋白Lipl21基因片段的真核表達重組質粒,利用脂質體體外轉染HeLa細胞,探討其在體外真核細胞中的表達情況,爲尋找新的預防鉤端螺旋體病的候選疫苗分子提供實驗依據。方法應用PCR技術從鉤端螺旋體黃...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2006年第6卷第6期人鹼性成纖維細胞生長因子基因的克隆、表達及生物活性分析
...,構建成pcDNA/b。應用脂質體介導的基因轉移技術將重組質粒體外轉染至人臍帶靜脈內皮細胞(HUVEC)。結果重組質粒轉染能明顯促進內皮細胞的分裂增殖。進一步將重組質粒通過脂質體介導,體外轉染至人腎細胞293細胞系進行表...
合作平臺;在線期刊;中華中西醫雜誌;2004年第5卷第13期;論著反覆凍融對熒光實時定量PCR質粒標準品的影響研究
【摘要】1.0×104拷貝/μl的高中濃度的質粒標準品可以耐受21次以內反覆凍融,低於1.0×104拷貝/μl的質粒標準品反覆凍融後量值變化較大,臨牀使用的試劑盒所配的低濃度標準品應避免反覆凍融。【關鍵詞】實時定量PCR;質粒DNA標準...
醫源資料庫;在線期刊;中華中西醫雜誌;2009年第10卷第10期熒光定量RT-PCR快速檢測手足口病病原研究
...,設計一對共引物及探針,建立、優化反應體系後,構建質粒標準品,利用10倍稀釋法建立相對定量標準曲線,根據TCID50倍比稀釋,建立靈敏度曲線。特異性檢驗後利用臨牀標本與傳統的RT-PCR法進行比較。結果定量標準曲線的靈...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第10期以Bacmid-桿狀病毒-昆蟲細胞系統表達人FGF-9①
...腦膠質瘤組織獲取人FGF-9全編碼區cDNA,將其克隆入pCRTMⅡ質粒及pYEX4T-1真核表達質粒,經DNA自動測序儀進行DNA序列測定。將人FGF-9cDNA定向克隆入pFastBac質粒,進一步將其轉座入Bacmid中,在昆蟲細胞Sf9中進行表達,採用SDS-PAGE對錶達產...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學丙型肝炎病毒Core基因重組表達載體Pet32a-Core的構建
...似丙型肝炎患者的血清標本採自深圳某傳染病醫院;Pet32a質粒及BL21大腸桿菌購自Promega公司;抗HCV-IgGELISA試劑盒購自上海科華生物技術有限公司,RNA提取試劑盒用RocheHighPureviralRNAkit,RNA擴增用TaKaRaOneStepRNAPCRKit,AMV逆轉錄酶、Taq酶...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第4期大鼠MHC-Ⅰ類基因cDNA的克隆
...獲得了MHC-ⅠcDNA。 1材料與方法 1.1材料E.coliDH5a和質粒pBV220爲華西醫科大學鉤體研究室伍衛華教授惠贈。總RNA提取試劑盒(QIAGen公司),RT-PCR及PCR試劑盒(GibcoBRL),EcoRI,BamHI,PruI,SspI,PstI內切酶及DNAMarker(華美公司)...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學