糖尿病部分基因突變兩步法擴增序列檢測
... 淋巴細胞分離液(上海細胞生物研究所提供);細胞裂解液:10%SDS10ml,1MTris-Hcl(pH8.0)5ml,0.5MEDTA(pH8.0)0.4ml,加水到100ml混勻。5MNaCl。以上幾種試劑臨用前須高壓滅菌。蛋白酶K2%,異丙醇。 1.4PCR反應 反應總體積爲50μl...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第20期;檢驗與臨牀端粒酶在乳腺癌中的表達研究
...mol/LMgCl2,10mmol/LKCl,1mmol/MT)中,12000g離心1min,沉澱再加裂解緩衝液(10mmol/MTris-HCl,pH7.5,1mmol/MMgCl2,1mmol/MEGˉTA,0.1mmol/MPMSF,5mmol/Mβ-巰基乙醇,0.5%CHAPS,10%甘油),於冰浴中裂解30min,於4℃16000g離心30min取上清液置-70℃保存。1...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第17期;論著四、C3分子
...化酶從C3α鏈N端一個精氨酸-絲氨酸鍵(第77-78位)外將C3裂解後,可產生一個9kDa的小片段C3a(釋放到液相中去),其餘部分爲C3b。同時,新生的C3bα`鏈內距N端5kDa的硫酯鍵斷裂,在谷氨醯胺基上出現一個具有轉酯作用的高度或多...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;細胞和分子免疫學hTERT-siRNA及hTR-siRNA的合成及對Hut78細胞端粒酶活性的影響
...分別合成兩條hTERT-siRNA及hTR-siRNA。採用siRNA直接處理細胞裂解液及磷酸鈣共沉澱法將siRNA轉染入Hut78細胞兩種處理方式,應用端粒酶重複序列擴增聚合酶鏈反應(TRAP-PCR)及聚丙烯酰胺凝膠電泳銀染檢測端粒酶活性的變化。結果體外轉...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組甲型肝炎病毒結構蛋白的分離純化及鑑定
...甘油密度梯度超速離心分離高度純化的HAV顆粒。溫和病毒裂解液裂解病毒後,運用高效液相色譜分離出三種蛋白,SDS-PAGE和Western-blot證實所分離蛋白爲HAV三種主要結構蛋白VP1、VP2和VP3,蛋白含量較高。Separation,PurificationandIdentificat...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學硒對Ox-LDL誘導牛內皮細胞Caspase-3酶的作用
...2.5DNA電泳酶消化法分瓶收集細胞(1×106)。加入500μl細胞裂解液,65℃溫浴過夜。酚/氯仿抽提兩次,離心去上清液,獲得細胞總DNA,加入0.1mg/mlRnaseA作用1h,將樣本置於-20℃保存。取DNA提取物加入加樣孔,在1.5%的瓊脂糖凝膠中電...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2005年第5卷第4期用熒光激活的細胞分類儀檢測調亡細胞
一、原位缺口翻譯檢測裂解的DNA片段1.取106經促調亡物質處理的細胞,用1%BSA-PBS洗滌細胞後加入0.1mlFITC標記的抗CD4或抗CD8單克隆抗體,4℃20分鐘。用1%BSA-PBS洗滌細胞。置冰上。2.加入0.1ml1%多聚甲醛,置冰上5分鐘,加入60%...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;細胞學技術N-CWS對小鼠巨噬細胞的活化效應
...三廠)溶於100ml生理氯化鈉溶液中,高壓滅菌。 1.6細胞裂解液0.1μ乙酸:乙醇=1:1(V:V)。 1.7儀器XDS-1倒置顯微鏡(重慶光學儀器廠),CO2培養箱(ColeParmer),DG3022A酶聯免疫檢測儀(國營華東電子管廠)。 2方法 2.1對動...
合作平臺;在線期刊;中華醫藥雜誌;2004年第4卷第12期;論著五、C5分子
...爲C5轉化酶作用的部位。在C5轉化酶的作用下,C5α鏈N末端裂解出一個分子量爲11kDa的小片段C5a進入液相中,其餘部分爲110kDa的大片段C5b,仍結合在細胞膜表面。親生的C5b在極短時間內能保持與C6結合的構象,可與C6非共價結合形成...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;細胞和分子免疫學細胞凋亡的幾種檢測方法
...可由ELISA法檢測。 (一)檢測步驟 1、將凋亡細胞裂解後高速離心,其上清液中含有核小體; 2、在微定量板上吸附組蛋白體’ 3、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結合‘ 4、加辣過氧化物酶標記的...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;細胞學技術