梅毒螺旋體重複蛋白K的克隆表達
...PCR反應及基因重組技術,擴增重複蛋白K編碼基因,構建重組質粒pET28b㈩/TprK,IPTG誘導表達。結果PCR法擴增出了1350bp的目的片段,原核表達質粒pET28b㈩/TprK酶切鑑定正確,測序結果與Gengbank上公佈的該基因序列完全一致,並可在大...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第12期重組人Importinα的原核表達、純化及多克隆抗體的製備
...行雙酶切,酶切產物經1%瓊脂糖凝膠電泳檢測[1]。 1.2.2重組質粒載體的誘導表達 將構建好的重組質粒pGEX6P1Importinα轉化到宿主菌BL21中進行誘導表達。在LB瓊脂培養基(Amp)上挑取菌落並接種到5mlLB(Amp)液體培養基中,37...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2010年第5卷第3期丙型肝炎病毒Core基因重組表達載體Pet32a-Core的構建
...基因(見圖1)。 2.2HCVCore基因片段的克隆及Pet32a-Core重組質粒的鑑定 將PCR擴增獲得的Core基因片段,克隆至Pet32a載體中,構建重組質粒,並用BamH1及SaL1分別對質粒Pet32a和獲得的重組質粒進行雙酶切鑑定,結果重組質粒獲...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第4期登革病毒NS3全基因的擴增與克隆
...,最後在72℃下延伸反應10min。 1.7 NS3基因的克隆 重組質粒pUC18-NS3的構建見圖1。經純化的PCR產物和pUC18用KpnI/XbaI分別消化後,經低熔點瓊脂糖凝膠回收。連接反應總體積10μL,內含T4DNA連接酶、PCR產物及pUC18,在16℃下連接過...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學雞貧血病毒VP2基因的克隆、序列分析及表達
...與方法 1.1 PCR模板 以含有VP2基因的SJ1株的PUC-CAV1.5kb重組質粒爲模板(由本室提供)[3]。 1.2 引物設計和PCR擴增 根據基因銀行記載的Cux-1株的DNA序列設計了擴增CAV-SJ1株VP2基因的引物:VP2-1、5’-TAGGCGGATCCAAGTGGATGCAC-3’;V...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學pVVP3IL-18HN核酸疫苗的構建及其對喉癌細胞殺傷作用的研究
...n-blot法檢測外源基因的表達。採用脂質體介導法將構建的重組質粒pVVP3IL-18HN體外轉染Hep-2細胞,運用MTT法檢測不同質粒濃度、不同作用時間,該重組質粒對喉癌細胞Hep-2的殺傷率。結果pVVP3IL-18HN可有效殺傷喉癌細胞,且在作用72h...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關利用重組痘苗病毒表達人CD20基因
...上酶切下編碼人CD20分子的cDNA,亞克隆到pJSA1175載體上,重組質粒與野生痘苗病毒共轉染TK143細胞。結果 APAAP檢測到重組病毒感染的細胞表面有CD20分子表達,富集後病毒滴度約爲1×109 pfu/ml。結論 人CD20基因在痘苗病毒中表...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學TNF-α的合成分泌機制不同於一般的分泌型蛋白
...與方法 1.質粒、菌株:質粒pGEM-3Zf購自美國Promega公司;重組質粒pBSK-S-TNF(僅包含編碼無“信號肽”的TNF結構基因序列),pBSK-TM-TNF(含編碼TNF結構蛋白的基因序列,包括“信號肽”),pBSK-S-TNFm(將IL-2信號肽置換TNF-α引導序列的重組突...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學含有大鱗大馬哈魚生長因子的酵母菌獲國家發明專利
...計了P-GH1和P-GH2,插入質粒pA0815的EcoRl位點中,構建了重組質粒pAOsGH。再選擇質粒pA0815進行同源重組,進而有效地將重組質粒pETnsGH轉化接合插入GS115菌種中,使外源基因sGH正常表達。多拷貝基因酵母菌表達重組質粒pAOnsGH,經實...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞CTX-M-3型超廣譜β-內酰胺酶的序列分析與原核表達
...酶的基因序列同源性爲100%。大腸桿菌DH5α轉化pBV220/CTX-M-3重組質粒後,ESBLs試驗爲陽性,藥敏試驗結果與原菌株相比耐藥性下降。此基因能在大腸埃希菌中大量表達,SDS-PAGE電泳顯示,蛋白分子質量大約爲31KD。結論成功表達重組...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2007年第7卷第12期