第二節 原位分子雜交技術在電鏡水平的應用
...分辨率,即向電鏡水平發展。Jacob(1971)首先用3H標記的核酸RNA探針與DNA雜交並在電鏡水平顯示獲得成功,繼後不少科技工作者在這方面做了大量的工作(Manningetal1975,Steinertetal1976,Hutchisonetal1982)。但所應用的均是同位素標記核...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸分子雜交技術
...的靶序列檢測。 雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DNA或總RNA。根據使用的方法被檢測的核酸可以是提純的,也可以在細胞內雜交,即細胞原位雜交。探針必須經過...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術附錄二 原位雜交組織化學常用試劑及處理
...載玻片的洗滌至關重要,必須保持清潔,並且不能有任何核酸的污染。處理方法如下: (1)先經洗衣粉浸泡過夜,次日自來水沖洗後,泡酸數小時以上,取出後再用流水沖洗,雙蒸水沖洗2~3次,置160℃以上烤箱中燒烤4h以...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸2-2生物化學與分子生物學技術
...乎都能顯示,包括有無機物、醛、蛋白質、糖類、脂類、核酸、酶等。 (一)固定 目的是將細胞的結構和化學物質雙重地保存下來,固定細胞的方法有: 1.物理固定:如血膜空氣快速乾燥、冷凍乾燥或直接冷凍切...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;細胞生物學第二節 cRNA探針在原位雜交組織化學
...r及其同事們首先應用RNA探針於原位雜交(見Coxetal1984),核酸探針爲單鏈的RNA分子,產生自具有質粒逆轉錄系統的cDNA克隆(圖20-2)。由於它是單鏈的,不像雙鏈的DNA探針,在溶液中不會再退火(reanneal),因此,較大百分比的...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸第五節 原位雜交免疫細胞化學技術的未來與展望
...在原位雜交免疫細胞化學發展過程中兩個關鍵性的突破是核酸探針製備的標記物的改進。核酸探針由克隆的核酸探針發展到無克隆的合成的寡核苷酸探針;從放射性同位素標記到非放射性標記。令人可喜的是,這一技術還處於不...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸以PCR爲基礎的HPV檢測及其在宮頸癌篩查和治療中的價值
...臨牀價值。本文簡要介紹了宮頸癌與HPV的常規篩查方法﹑核酸雜交檢測法﹑以PCR爲基礎的HPV檢測方法等內容,並列舉了一些PCR檢測技術在宮頸癌篩查和治療中的應用及臨牀價值。【關鍵詞】人乳頭瘤病毒(HPV);以PCR爲基礎的HPV...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第3期DNA電鏡技術及其應用
電子顯微鏡作爲一種研究工具在核酸研究中已發揮很大作用並日益受到重視。1859年人們首先發現核酸爲活體組織細胞核的主要組成成分,90年後又在電鏡下觀察到單個核酸分子,而Avery等於1944年發現核酸是遺傳的分子基礎後,更...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;微生物學第六節 目的基因序列克隆的篩選與鑑定
...的序列的插入,所以需要做進一步細緻的篩選。 二、核酸雜交法 利用標記的核酸做探針與轉化細胞的DNA進行分子雜交,可以直接篩選和鑑定目的序列克隆。常用的方法是將轉化後生長的菌落複印到硝酸纖維膜上,用鹼裂...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;生物化學與分子生物學第四節 非放射性標記的核酸探針
第四節 非放射性標記的核酸探針 放射性標記核酸探針在使用中的限制,促使非放射性標記核酸探針的研製迅速發展,在許多方面已代替放射性標記,推動分子雜交技術的廣泛應用。目前已形成兩大類非放射標記核酸技術,...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸