抗人P185erbB2單克隆抗體的製備及特性分析
...鼠,按常規方法制備雜交瘤。用含有人erbB2胞外區基因的重組質粒轉化大腸桿菌DH5α,誘導表達並純化後作爲包被抗原,採用間接ELISA方法篩選陽性克隆。 1.3腹水的製備及抗體的純化石蠟油致敏BABL/c小鼠3天后,腹腔接種3×106...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學結合酪氨酸蛋白激酶受體EphB2的功能短肽的篩選
...上游有編碼6個連續組氨酸殘基的序列(6×His tag),在重組質粒進行誘導表達時,6×His tag與外源插入片段共同表達,表達後的融合蛋白帶有6×His tag,融合的蛋白較小,只有20個氨基酸左右,即使不進行切割,也不影響蛋白的...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學綠色熒光蛋白與H-2Kb融合基因的構建及表達
...分析。在逆轉錄病毒轉導中,首先應用脂質體介導方法將重組質粒pGCEN/Kb-GFP轉導入雙嗜性包裝細胞PA317中。G418抗性克隆的培養上清收集後用0.45μm濾膜過濾備用,病毒上清滴度測定爲5×104~2×106CFU/ml之間。靶細胞轉染時,取生長...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學自殺基因TK聯合細胞因子FL真核表達載體的構建及其相關特性的研究
...y-TK的融合基因,保有潮黴素B的抗性,因此切去-neo之後的重組質粒用潮黴素加以篩選,其長度爲7188bp。 2.Southernblot鑑定pIRES/TK-FL在MCF-7基因組中的整合:圖1所示爲MCF-7/TK-FL基因組DNA的Southernblot結果。用α-32PdCTP同時標記TK和FL片...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學免疫-PCR技術進展
...化學方法制備。Joerger通過PCR和單向缺失在以Puc18爲基礎的重組質粒上製備了各種長度、具有相同引物序列的的dsDNA,選擇適合長度的dsDNA作爲特異性抗體的標記物。另外,在免疫-PCR實驗中,dsDNA比ssDNA具有更多的優越性。DsDNA中的...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學剛地弓形蟲分子疫苗研究新進展
...“A部位之間區域不含內含子。GuoH等[13]研究表明,重組質粒pcDNA3-ROP1能夠誘導小鼠的細胞和體液免疫,增加T淋巴細胞和NK細胞數量。ROP2蛋白定位於納蟲泡表面,介導納蟲泡與宿主細胞線粒體和內質網接觸,在弓形蟲生活史...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第4期RNA干擾靶向抑制胃癌SGC7901細胞COX2基因和蛋白表達的研究
...X2質粒,經島津分光光度計檢測,確定含有COX2基因的重組質粒的濃度,並確定每微升DNA溶液中的拷貝數,做爲標準品。使用RealTimeRTPCR試劑盒,RT反應體系爲:MgCl22μl、10×RT緩衝液1μl、dNTP(各10mM)1μl、RNaseinhibitor0.25&...
醫源資料庫;在線期刊;濱州醫學院學報;2009年第32卷第1期中華鱉MHCIα2鏈基因克隆及序列分析
...桿菌(Stratagene公司);再用QIAEXII試劑盒(Qiagen公司)提取重組質粒,採用ABIPRISMDyePrimerCycleSequencingReadyReactionKit和ABI377型DNA自動測序儀(均爲PerkinElmer公司產品)測定克隆片段的核苷酸序列。 1.2.5 同源性分析 採用GENETYX7.3軟件...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學RNA干擾survivin基因對HepG2細胞凋亡及化療影響
...℃、含體積分數0.05CO2培養箱中培養。 1.2方法 1.2.1重組質粒的構建 根據RNA設計原則和survivin(NM_001168)編碼序列,利用BLAST進行查詢,並根據前期實驗的結果[1],確定並特異性設計合成1對survivin編碼序列的siRNA片段,構建s...
醫源資料庫;在線期刊;齊魯醫學雜誌;2010年第25卷第4期深黃被孢黴Δ6脂肪酸脫氫酶基因的原核表達和轉基因植株再生研究
...實驗室完成。 2結果與分析2.1植物表達載體的構建以重組質粒pTMICL6進行PCR,PCR的產物純化後經XbaⅠ和BglⅡ雙酶切獲得深黃被孢黴的△6脂肪酸脫氫酶基因,經與pGA643質粒載體連接構建出含有△6脂肪酸脫氫酶基因的pGMICL...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第1期