第三節 DNA重組實驗中常用的技術
...溫箱中培養過夜。 (三)轉化子DNA的快速鑑定-快速細胞破碎法 (1)挑取轉化平板上的單菌接種於含相應抗生素的2mlLB中,37℃振盪培養至A590值爲0.6~0.8。 (2)取1ml菌液至1.5mlEppendorf管中,9000rpm離心9min,去盡上清...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸骨形態發生蛋白2基因治療在修復骨缺損中對血管化影響的實驗研究
...骨缺損中對血管化的影響。研究者分離培養兔骨髓基質幹細胞(MSCs),經BMP-2腺病毒載體轉染後複合異種骨支架移植修復1.5cm橈骨缺損。分爲5組:①BMP-2基因轉染細胞+去抗原牛松質骨支架(BCB);②未轉染細胞+重組BMP-2+BCB;③對照基...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組RNA干擾文庫及其在功能基因組學研究中的應用
...今後的發展趨勢。傳統研究基因功能的最有效技術之一是細胞和小鼠的基因敲除技術。但該技術存在技術複雜、週期長、費用昂貴等缺點,極大地限制了它的應用。應用物理和化學突變技術可以誘導基因的隨機突變,導致細胞或...
行業資訊;臨牀快報;RNA研究絲裂原活化蛋白激酶特異性小干擾RNA表達載體對結腸癌細胞週期和DNA甲基化有影響
...小干擾RNA(siRNA)表達載體,觀察其靜默效應及對結腸癌細胞SW1116生長週期和DNA甲基化的影響。研究者選擇MEK不同靶點寡核苷酸片段,克隆到pGCsilencer真核表達載體中。脂質體轉染SW1116細胞,熒光顯微鏡評估轉染效率,G418篩選穩...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關抑轉丸對Lewis肺癌瘤株轉染的C57BL/6小鼠CD44V6影響的實驗研究
...用組織勻漿器研磨腫瘤組織製成勻漿過300目尼龍網製成單細胞懸液,用生理鹽水調整細胞濃度至1×107/ml,0.2%臺盼藍染色,在倒置顯微鏡下計算活細胞數,即未染色的細胞數95%,在每隻小鼠右腋皮下接種瘤細胞懸液0.2ml。1.4.2分...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代中西醫雜誌;2006年第4卷第8期hIGF-1基因轉染促進退變椎間盤Ⅱ型膠原的表達△
...多數學者認爲IVDD爲多因素協同作用的結果,與椎間盤中細胞營養下降、力學及遺傳等因素有關,但細胞因子減少及致炎因子增多等分子生物學改變在發病中起主要作用〔2〕。1991年,Thompson等〔3〕檢測了多種細胞因子能夠促進犬...
醫源資料庫;在線期刊;中國矯形外科雜誌;2008年第16卷第5期大連醫科大學附屬一院膽管癌基因治療研究獲重要進展
...癌的發病機制,並揭示出PLNCX-TNFα基因轉染可抑制膽管癌細胞的生長、增殖能力和促進癌細胞凋亡,而應用基因轉染方法可達到基因治療膽管癌的目的。上述研究結果爲臨牀醫生提供了一個全新的、具有廣闊的臨牀研究與應用前景...
醫學教育;科教新聞研究者探討半胱天冬氨酸蛋白酶-12小干擾RNA對小鼠肝細胞凋亡的阻抑作用
...asp12對caspase-12基因的抑制及其對內質網應激介導的小鼠肝細胞凋亡的影響。研究者以小鼠肝細胞株Hepa1-6爲靶細胞,利用脂質體與重組質粒pRNAT-casp-2共轉染,分別在轉染24、48和72h後收集細胞,採用實時熒光定量PCR分析和Western印跡...
行業資訊;臨牀快報;肝膽病受體介導基因轉移的策略研究與進展
...體介導的基因轉移是將目的基因與配體連接,通過配體與細胞表面的特異性受體結合,以受體介導的內吞作用將目的基因轉入細胞。配體與受體的特異性結合以及受體介導的內吞作用是一種生理過程,因此受體介導的基因轉移有...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;生物化學P53與兩型TNF-α介導的殺瘤效應的關係
...學院免疫學研究所湖北武漢430030關鍵詞:TNF-α;P53;腫瘤細胞;殺瘤效應摘要:目的:探討p53與分泌型和跨膜型TNF介導的殺瘤效應的關係。方法:應用PCRSSCP方法確定受試腫瘤細胞p53基因突變情況,並分別將野生型p53表達質粒轉染p53...
行業資訊;臨牀快報;免疫系統