川大成功建立人新基因PCIA1細胞株
...以人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)總RNA爲模板,採用RT-PCR擴增轉染技術,成功建立一人新基因PCIA1細胞株。該細胞株被命名爲PCIA1基因,基因cDNA全長爲1086bp,編碼一個102個氨基酸的蛋白質,其在基因庫中的序列號爲AY563006。 據介紹...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組抑癌基因PTEN對肝癌細胞增殖的抑制及作用機制
...達載體pEGFP-WT-PTEN和pEGFP-PTEN,G129R。採用脂質體介導的基因轉染法,分別將上述載體轉染不表達PTEN蛋白的人肝細胞肝癌細胞系HHCC,經G418篩選,獲得穩定表達PTEN蛋白的細胞克隆。以流式細胞儀測定細胞週期,以Westernblot法分析穩定...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關RNA干擾在腫瘤基因治療中的研究進展
...白血病發生的主要致病基因。Wilda等[4]用M-BCR/ABL siRNA轉染慢性髓性白血病K562細胞系,發現M-BCR/ABLmRNA和蛋白表達均被抑制,細胞惡性度降低,並導致強烈的細胞凋亡。B-raf基因是絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號轉導系統中的一個...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代外科學雜誌;2005年第2卷第18期猿腎病毒40大T抗原基因永生化大鼠神經前體細胞株的構建
...治療提供穩定的細胞來源。研究者利用脂質體介導的基因轉染技術將含有SV40Tag的質粒pCMVSV40T/PUR轉染原代培養的新生大鼠神經前體細胞,經嘌呤黴素篩選,陽性克隆擴大培養並連續傳代。應用巢蛋白抗體進行細胞鑑定,5%胎牛血...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組CYP3A5基因轉染HL-60細胞介導耐藥表型的研究
...YP3A5基因全長cDNA,構建CYP3A5基因真核表達重組質粒,穩定轉染HL-60白血病細胞。採用四氮唑藍法(MTT)測定化療藥的半數抑制量IC50值,採用流式細胞術(FCM)分析細胞週期及凋亡細胞百分比。結果空載質粒pcDNA3、重組質粒pcDNA3-CYP3A5穩...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組轉染人骨形成蛋白2共培養條件下NIH3T3細胞生物學性狀的觀察
...構和鹼性磷酸酶(ALP)活性的影響。研究者用陽離子聚合物轉染試劑將hBMP-2真核表達載體pcDNA3.1-B2導入NIH3T3細胞,G418篩選獲得陽性細胞克隆。免疫組化和酶聯免疫吸附試驗檢測BMP-2胞內和胞外的表達,並利用細胞共培養系統Transwell...
行業資訊;臨牀快報;口腔科干擾RNA抑制組織因子表達對阿黴素誘導人神經母細胞瘤細胞凋亡有影響
...學方法構建TFsiRNApSUPER表達載體,以脂質體介導進行基因轉染。以水溶性四唑鹽(WST)法檢測阿黴素細胞毒性。以Westernblotting法檢測阿黴素誘導的caspase-3、多聚ADP核糖轉移酶(PARP)的活化水平。以Hochest33342染色,熒光顯微鏡下檢...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關體外轉染人髮狀分裂相關增強子-1基因重塑視網膜新生血管的研究
...華眼科雜誌2005Vol.41No.11P.1027-103210(廣州)爲了探討體外轉染人髮狀分裂相關增強子1(HESR-1)基因至視網膜血管內皮細胞並重塑視網膜新生血管的可行性。研究者將HESR-1克隆至pcDNA3.1+載體內,組成pcDNA3.1+HESR-1重組質粒,原代培養人...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組鈉氫交換子1短髮夾RNA抑制醛固酮引起的系膜細胞纖連蛋白增生
...短髮夾狀雙鏈RNA的真核表達質粒(shRNA-NHE1),並將該質粒轉染體外培養的大鼠腎小球系膜細胞。分別於轉染後1、3、4d用熒光定量PCR(real-timePCR)和Western印跡觀察NHE1mRNA和蛋白的表達。選擇shRNA-NHE1質粒轉染後第4天,給予醛固酮(10^...
行業資訊;臨牀快報;RNA研究轉染甲氨蝶呤阿糖胞苷雙耐藥基因的小鼠骨髓細胞對大劑量化學治療的保護作用
...者以反轉錄病毒爲載體,將人雙突變的DHFR和CD通過共培養轉染入兩隻小鼠骨髓幹細胞,觀察共培養後的骨髓細胞經Ara-C、MTX、Ara-C+MTX處理後,耐MTX及Ara-C粒-巨噬細胞集落形成單位(CFU-GM)生成情況;轉基因小鼠骨髓細胞提取的DNA,...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組