抗登革病毒3型單鏈抗體的基因克隆表達和免疫學鑑定
...選20個克隆,其中1號克隆經培養後用鹼法提取pCANTAB5-ScFv重組質粒,用HindⅢ和BamHⅠ雙酶切,其酶解產物用1%的瓊脂糖凝膠電泳鑑定。如果ScFv基因沒有插到pCANTAB5E載體上可產生3條帶,分別爲3170bp,607bp和102bp的片段,如果ScFv基因插...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學宮頸癌基因治療特異性新技術研究成功
...頸癌細胞及血管內皮細胞的殺傷作用。檢測結果發現:在重組質粒pCI-neo/hTERT-tk中,出現與tk基因大小相符的約爲1100bp的條帶;HeLa細胞轉染pCI-neo/hTERT-tk質粒後,可測到tk基因陽性表達,而正常的ECV304細胞轉染後則無tk細胞表達;HeL...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組重組人截短型胰島素樣生長因子1在大腸桿菌中的高效表達①
...獲蛋白進行了鑑定。結果:獲得含人Des(1-3)IGF1基因的重組質粒,在大腸桿菌中高效表達出含凝血酶識別序列的MS2-Des(1-3)IGF1融合蛋白,該蛋白經凝血酶消化後純化可獲得與天然型一致的人Des(1-3)IGF1。結論:該方法是獲得...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學表達人膜輔助因子蛋白基因的豬內皮細胞可抑制人血清補體的細胞毒作用
...的哺乳動物表達載體pCI-neo和pEF-neo的EcoRⅠ位點,對獲得的重組質粒pCIM和pEFM進行限制酶切分析表明,hMCP基因片段在兩種表達載體的EcoRⅠ位點均爲正向插入,克隆到的核苷酸序列總長爲1480bp,包括5‘端上游104bp序列,中間1131bp編...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學研究者探討人前列腺特異性抗原啓動子調控的CXCR4-siRNA逆轉錄病毒載體的構建及其對前列腺癌細胞的生物學效應
...胞體外侵襲能力的變化。結果發現通過限制性酶切鑑定該重組質粒,成功構建了CXCR4的RNA干擾質粒pLXSN/EGFP—hPSA-siCXCR4。與空載體組比較,CXCR4-siRNA對LNCaP細胞CXCR4mRNA和蛋白表達抑制顯著,48h抑制率分別爲(81.53±10.22)%和(90...
行業資訊;臨牀快報;男科四軍醫大首次構建成永生化胚胎肝細胞系
...,提示克隆的永生化胚胎肝細胞株不僅構建成功,而且其重組質粒、細胞形態及染色體核型等各項功能指標良好。 研究人員認爲,利用脂質體轉染法建立的該永生化胚胎肝細胞系,特徵明顯,增殖較快,克隆形成能力強,沒...
行業資訊;臨牀快報;肝膽病中國研究者用羥基磷灰石納米粒作內耳基因治療新載體的體內外研究
...pH值3~7是這種長約40~50nm的短棒狀HAT納米粒能完全結合重組質粒pEGFPC2-NT3的最低含量混懸液和最佳pH環境,並可有效保護基因不被核酸酶(DNaseⅠ)破壞。四甲基偶氮唑鹽法觀察HAT納米粒從62.5μg/ml至500.0μg/ml4種混懸液對Hela...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組絲裂原活化蛋白激酶特異性小干擾RNA表達載體對結腸癌細胞週期和DNA甲基化有影響
...因啓動子甲基化狀態。研究結果發現,構建2個靶點的MEK重組質粒,分別轉染和聯合轉染SW1116細胞,轉染效率約爲72.1%,G418篩選培養2周得到穩定表達MEKsiRNA的細胞,MEK蛋白抑制率分別爲74.2%和69.1%和90.2%,下游分子ERK蛋...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關曾溢滔院士研究組最新文章
...酶表達載體pZP3-INT和檢測fC31整合酶位點特異性重組功能的重組質粒載體pBCPB+,通過顯微注射導入到小鼠卵母細胞中。培養48h後,RT-PCR檢測fC31整合酶mRNA表達以及PCR檢測pBCPB+載體發生重組的情況。結果研究人員發現,載體pZP3-INT在卵母...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組戊型肝炎病毒ORF2C端抗原片段的表達及其免疫學特性研究
...上海生工生物工程公司提供,所用抗體爲Sigma產品。 重組質粒構建:以pEHG2爲模板,F1與R1爲引物擴增出409bp片段,PCR條件爲:94℃,1min,55℃,1min,72℃,1min,共30個循環,72℃延伸7min。擴增片段經EcoRⅠ與PstⅠ雙酶切,接入pBV220...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學