人鈣調素基因表達載體的構建及在大腸桿菌DH5α中的表達①
...Ⅲ(hCaMⅢcDNA),將其插入表達載體pBV220,構建重組表達質粒hCaMⅢ/pBV220,用酶切、DNA測序、PCR擴增鑑定陽性克隆。結果:陽性重組子在大腸桿菌DH5α中經溫度誘導可高效表達CaM蛋白,經15%SDS-PAGE分析,可觀察到一分子量與理論值...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學基因組工程學裏的三大利器——ZFN、TALEN和CRISPR/Cas
...位點特異性同源序列(locus-specifichomologyarm)的外源質粒,這樣就能夠以極高的效率在細胞基因組特定的位點轉入一個或者多個轉基因序列(圖2A)。我們也可以通過這種方法,轉入一段不超過50bp的線性外源同源序列或者單...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞梅毒螺旋體青黴素結合蛋白的克隆及表達
...重組技術,擴增重編碼青黴素結合蛋白的基因,構建重組質粒pETJKM/TpN47,IPTG誘導表達。結果PCR法擴增出了1350bp的目的片段,原核表達質粒pETJKM/TpN47酶切鑑定正確,測序結果與Gengbank上公佈的基因序列完全一致,並可在大腸桿菌中...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第5期生物冶金引發傳統礦物加工重大變革
...當的發展。在浸礦微生物研究方面,張東晨、張明旭等對質粒在硫桿菌中普遍存在的觀點提出了質疑,其研究結果表明,氧化亞鐵硫桿菌對Fe2+、S等的氧化能力可能只是與擬核染色體DNA有關,而氧化亞鐵硫桿菌的遺傳物...
醫藥經濟;生物技術;環保技術脂質體介導的p53基因對肝癌細胞生長的抑制作用
...療方面的可行性。方法將載有人野生型p53-cDNA的真核表達質粒p53-pcDNA3,用陽離子脂質體介導轉染人肝癌細胞系HepG2,用流式細胞儀檢測p53-pcDNA3對HepG2細胞生長的影響。結果通過觀察細胞生長曲線與流式細胞儀檢測細胞週期和細胞...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學人淋巴細胞免疫反應性生長激素基因調控序列的克隆與鑑定
...增出人淋巴細胞irGH基因5′近端的調控序列,然後將其與質粒PGEM7Zf(+)連接,經轉化藍白斑篩選、酶切鑑定,獲得PGEM7Zf(+)-irGHDNA(-484-+2bp)重組質粒,進行序列測定。結果:顯示irGH基因5′近端的調控序列與垂體細胞GH基因的5′近端...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學遺傳學實驗教程
...的篩選實驗24細菌的接合作用與基因轉移實驗25大腸桿菌質粒DNA的轉化實驗26P1噬菌體的普遍性轉導實驗27噬菌體的侷限性轉導實驗28酵母菌原生質體的融合實驗29細菌質粒DNA的大量製備實驗30快速少量提取質粒DNA的改良方法——TENS...
醫源資料庫;醫源書店;基礎醫學攜帶Tip30和人IFN-γ基因的鼠減毒沙門菌的製備
【摘要】目的構建含有HIVtip30與人IFN-γ基因的真核共表達質粒的減毒傷寒沙門菌,以進一步觀察以減毒傷寒沙門菌爲載體的,聯合HIVtip30與IFN-γ的基因對腺樣囊性癌的治療作用。方法以PCR擴增HIVtip30和人IFN-γ基因,分別插入真核表...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第23期;論著NOD2/CARD15在克羅恩病發生髮展中的作用
...TLRs的細胞內信號傳導過程。最近有學者發現轉染TLR5敲除質粒的人腸上皮細胞(humanintestinalepithelialcell,HIEC)在MDP的刺激下不能表達NOD2[3]。Takahashi等[4]用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)分別刺激野生型及TLR4基因敲除的大鼠,...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代內科學雜誌;2007年第4卷第4期細胞轉錄調節因子YY1及其對人乳頭瘤病毒16型早期啓動子P97抑制效應廣泛存在於人上皮細胞
...。同時將帶有HPV16標準LCR和YY1位點突變LCR序列的熒光素酶質粒短暫轉染上述細胞以檢測P97活性。結果 所有被檢細胞均含有良好生物學活性的YY1蛋白,其蛋白含量在各細胞系間無明顯差別。HPV16LCR上YY1位點的破壞可在多種細胞,...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學