前列腺特異性膜抗原啓動子增強子調控重組質粒的構建及鑑定
...較pEGFP-PSMAPro強20倍。可見PSMA啓動子增強子調控GFP表達的重組質粒的構建證明該調控序列具有前列腺細胞特異性,增強子能夠明顯增強啓動子的轉錄效率,增加了目的基因的表達水平。PSMA啓動子和增強子的共調控可以保證基因表...
行業資訊;臨牀快報;泌尿科重組質粒的連接、轉化及篩選
...質粒DNA和目的DNA片段,然後體外使兩者相連接,再用所得到重組質粒轉化細菌,即可完成。但在實際工作中,如何區分插入有外源DNA的重組質粒和無插入而自身環化的載體分子是較爲困難的。通過調整連接反應中外源DNA片段和載體DNA...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術人內皮抑素克隆表達及對血管內皮細胞生長的抑制作用
...endostatin全基因。用原核細胞表達載體構建了pBV220/endostatin重組質粒,經DNA測序確認後,將其轉化大腸桿菌DH5α進行表達、初步純化及活性測定。結果 經SDS-PAGE分析,表達產物相對分子質量(Mr)約20×103,薄層掃描顯示錶達產物可達...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學結核分枝桿菌ESAT-6抗原真核表達質粒的構建及其免疫原性
...基因片段,定向亞克隆入真核表達載體pVAC,構建pVAC-esat-6重組質粒,利用脂質體介導的轉染技術,將其導入VeroE6細胞,RT-PCR法檢測mRNA表達情況,Western-blot法鑑定表達產物;重組質粒經基因槍免疫小鼠後,採用酶聯免疫吸附試驗(ELI...
行業資訊;臨牀快報;免疫系統重組質粒的提取
質粒提取過程參照E.Z.N.APlasmidExtractionKit進行。 (1)用無菌牙籤挑取平板上白色單菌落(5~10個)分別接種至3-5mlLB培養液(Amp+)中,200rpm培養14~16小時; (2)室溫下,10,000g離心1分鐘收菌; (3)加入溶液I250μl,渦旋重...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術反覆凍融對熒光實時定量PCR質粒標準品的影響研究
...賴於標準品的準確性。目前實時熒光PCR定量標準品大多爲重組質粒[4~7],重組質粒爲裸露的螺旋纏繞的雙鏈閉環DNA,質粒在低溫條件下可長期穩定保存,與目的基因保持較高的同源性,兩者一致的擴增效率是得到較爲可靠的定...
醫源資料庫;在線期刊;中華中西醫雜誌;2009年第10卷第10期HPV18E2蛋白CTL表位多肽的構建與表達
...制人乳頭瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基礎。方法以重組質粒(pBR322HPV18)爲模板,利用PCR方法擴增HPV18E2DNA片段,將HPV18E2DNA與加強綠色熒光質粒(pIRES2EGFP)重組構建重組質粒(pIRES2HPV18E2EGFP)。用酶切電泳及測序檢查質粒...
醫源資料庫;在線期刊;局解手術學雜誌;2007年第16卷第6期PIN1反義核酸轉染抑制乳腺癌MCF-7細胞的增殖
...構建Pin1反義核酸真核表達質粒pPIN1as,用脂質體轉染法將重組質粒轉染MCF-7細胞,G418篩選穩定表達重組質粒的克隆,RT-PCR檢測Pin1基因表達水平,Westernblot檢測Pin1蛋白的表達,MTT檢測細胞增殖狀況。結果穩定表達Pin1反義核酸的MCF-7...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2007年第7卷第7期梅毒螺旋體Tpp17基因的擴增、克隆及表達
...南》進行〔3〕。 PCR鑑定重組pMAL-C2/Tpp17質粒DNA:將5份重組質粒100℃煮沸10min後,按Tpp17擴增條件擴增,電泳後觀察結果。 Westernb1ot分析:經SDS-PAGE後,轉移至NC膜上,經1%脫脂牛奶封閉後,加入1∶100梅毒病人血清,室溫搖...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學生化與細胞所揭示抗生素抗性基因可經反式剪接參與蛋白產生
...如氨苄青黴素抗性基因,已作爲最爲常見的選擇標記用於重組質粒中,並隨之在近40年間廣泛應用於科研、農業及醫藥等領域。RNA反式剪接能夠將不同來源的轉錄本拼接起來,擴展並豐富了真核生物的轉錄組和蛋白質組。在此之...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞