PCR實用技巧
...有一些活性.所以在A.T.的時間過長,會極大的增加非特異性擴增的風險,另外,在對於一些困難戶,比如從gDNA裏擴增大片段,還可使用twostepPCR. 5.touchdownPCR 原理很簡單,但的確是一個很有用的方法。舉個例子,ANNEALINGTEMP.55度 ...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術PCR在突變基因檢測時的應用
...出發生突變的基因,而且即使獲得極微量的組織亦可經PCR擴增而進行中種檢測,加上PCR技術與探針雜交技術,RFLP技術及PCR直接測序的結合,改換方法得以迅速發展和推廣,大大的促進了遺傳病及腫瘤有關的基因的研究進展. ...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術從四例丙肝患者系列血清標本分析HCV基因的變異
...對4例因獻血感染HCV病人的系列血標本,用特異性引物PCR擴增檢測,5′-NCR和核心區測序確定HCV基因型,並對標本膜區基因進行克隆,每個標本隨機選擇5~9個克隆進行測序分析。結果 發現隨着時間推移,存在HCV基因型的轉換現...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學小鼠MAdCAM-1分子剪切體的克隆及表達
...下游引物終止密碼子由TGA改爲大腸桿菌偏性密碼子TAA,能擴增出編碼成熟mMAdCAM-1分子剪切體多肽的cDNA序列。上游引物:5′CCGGATCCGGACAGTCCTTCCAGGTG3′;下游引物:5′AGGATCCTTATAGGTGTGTACATGAGCT3′利用異硫氰酸胍一步法〔7〕從BALB/c小鼠的腸...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學PCR和RT-PCR技術
...)過程利用模板變性,引物退火和引物延長的多個循環來擴增DNA序列。這是一個指數增長的過程,因爲上一輪的擴增產物又作爲下一輪擴增的模板,使其成爲檢測核酸的一種非常靈敏的技術。一般,經過20-30個循環得到的擴增產...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術難檢DNA樣品分型檢測新進展
...樣本(難檢DNA樣本)的STR分型仍是法醫學DNA檢驗的難題。擴增前引物延伸(IPEP)、全基因組擴增和MiniSTR(在設計引物時,使其結合在更靠近核心重複序列的側翼序列,PCR擴增的產物就會比STR基因座更短一些)等技術的應用,使難...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組敵敵畏抗性淡色庫蚊酯酶B1、A2探針製備及應用
...要機制,非特異性酯酶活性增高是由於酯酶結構基因大量擴增,相應地大量表達酯酶造成的[1]。多年來應用的WHO生物測定法檢測抗性存在結果波動性大,重複性差,操作繁瑣,需時長,在抗性水平低時難以測出抗性存在等缺...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2005年第5卷第2期丙型肝炎病毒感染與肝細胞癌的相關性研究
...京醫科大學肝病研究所生產的檢測HCV的RT-PCR試劑盒,限制擴增長度爲240bp;HBV-DNA檢測採用華美生物工程公司生產的HBV試劑盒,限制擴增長度爲270bp。 1.3方法 1.3.1核酸提取取3~5張10μm石蠟切片放入離心管內,用二甲苯脫蠟兩...
合作平臺;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2004年第4卷第6期;論著23株靈芝栽培菌種的DNA指紋鑑別
...芝菌種的差異。從247個隨機引物中篩選出具有較高多態性擴增檢測能力的引物9條,對23株靈芝菌種進行RAPD分析。以其中的兩條隨機引物S17和S1005進行擴增分析可以有效鑑別大部分靈芝栽培菌種,作爲分子標記。 【關鍵詞】靈芝;...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫藥雜誌;2006年第6卷第3期Kgla細胞免疫小鼠脾細胞scFv噬菌體展示文庫的構建及其表達
...髓系白血病細胞系KGla細胞免疫小鼠,取其脾細胞,RT-PCR擴增VH和Vκ基因並克隆入噬菌體展示表達載體,構建scFv文庫,並測定文庫的庫容量和BstN1酶切單個克隆分析文庫的多樣性。用KGla作爲固相抗原,進行四輪吸附-洗脫-富集的篩...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學