以Bacmid-桿狀病毒-昆蟲細胞系統表達人FGF-9①
...文獻[2]。經藍白篩選、酶切鑑定獲得陽性克隆。pCRTMⅡ重組質粒及pYEX4T-1真核表達質粒經EcoRⅠ、SalⅠ雙酶切後,將釋放出的片段次級克隆入pYEX4T-1真核表達質粒。經酶切鑑定出陽性克隆後,經寶泰克公司自動測序儀進行DNA序列...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學重組腺病毒介導的人AWP1基因轉移對人源肝癌細胞增殖的影響
...。 1.2AdflagAWP1的包裝與病毒滴度測定 將克隆重組質粒flagAWP1/pcDNA3經BglⅡ/NotⅠ雙酶切出flagAWP1基因片段,凝膠回收,亞克隆至經同樣酶切的腺病毒穿梭質粒pAdTrackCMV的MCS中,構建穿梭質粒pAdTrackflagAWP1。PmeI酶...
醫源資料庫;在線期刊;局解手術學雜誌;2010年第19卷第5期抗端粒酶M1RNA核酶真核表達載體構建及肝癌細胞轉染的研究
...明結果正確,Marker爲1000bp,結果如圖1所示。 2.2真核重組質粒pEGFPM1RNA的鑑定 用SalⅠ和EcoRⅠ雙酶切真核表達質粒LipofectAMINEAM2000,切出長500bp的片段,電泳結果證明克隆正確,如圖2所示。 2.3脂質體介導的肝癌細胞轉...
醫源資料庫;在線期刊;齊魯醫學雜誌;2006年第21卷第1期中國人MBLcDNA的克隆與序列分析1
...]95bp和500bp處各有一個PstⅠ酶切位點。因此又用PstⅠ酶切重組質粒,瓊脂糖凝膠電泳出現約3000bp、400bp和300bp3條帶,與預期結果一致,而且證實cDNA片段是正向插入的。經此係統鑑定,初步確定一個克隆爲本實驗所期望的cDNA克隆...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學乙型肝炎病毒X基因準種特點的研究
...NA,與Promega公司所產的pGEMTeasy載體連接過夜。將連接好的重組質粒轉入細菌JM109,氨苄青黴素(Amp)和X-gal藍白斑法篩選陽性菌落,命名爲Teasy-X。1.4DNA測序提取重組質粒,經EcoRI酶切證實質粒Teasy-X存有靶片段後,隨機選擇菌落...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學缺氧及輻射雙敏感性啓動子增強抑瘤素M表達治療肺癌的實驗研究
...缺氧條件下顯著提高,爲常氧條件下的3倍。在缺氧條件下,重組質粒pHEO轉染合併照射處理後細胞存活率[(9.5±2.8)%]顯著低於常氧組[(34.8±3.6)%]。HRE-Egr啓動子轉染合併照射可明顯抑制肺癌移植瘤,並可使60%的移植瘤完全消退。上述結果...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關第二節 核酸(基因)探針目的核酸的製備技術
...轉化至大腸桿菌中進行無性繁殖。以氯化銫超速離心純化重組質粒DNA,並以合適限制性內切酶消化,經凝膠電泳製備回收特異的目的核酸片段。②聚合酶鏈式反應(Poly-merasechainreaction,PCR)擴增技術:利用這種先進技術能簡便快...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸胰腺十二指腸同源框-1基因真核表達載體的構建和轉染
...酸化處理的含綠色熒光蛋白(GFP)的空白載體pEGFP-C2,構成重組質粒,再進行HindⅢ、BglⅡ雙酶切篩選、鑑定並測序;陽離子脂質體介導轉染後,熒光顯微鏡下觀察熒光並計算轉染效率從而對轉染條件進行優化。結果限制性酶切分析...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組缺氧及輻射雙敏感性啓動子增強抑瘤素M表達治療肺癌的實驗研究
...缺氧條件下顯著提高,爲常氧條件下的3倍。在缺氧條件下,重組質粒pHEO轉染合併照射處理後細胞存活率[(9.5±2.8)%]顯著低於常氧組[(34.8±3.6)%]。HRE-Egr啓動子轉染作者:自動採集
行業資訊;臨牀快報;呼吸系統相關納米微囊載體用於基因治療
...持基因活性的情況下長時間低溫保存,因此納米微囊包裹重組質粒DNA真核表達載體可以應用於基因治療。作者:
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組