幽門螺桿菌hpaA核酸疫苗的構建及免疫原性檢測
...一系列酶切、連接反應將其克隆入真核表達載體pIRES,轉入大腸桿菌,篩選陽性克隆,通過PCR和酶切反應鑑定。並將構建好的重組載體pIRES-hpaA轉染COS-7細胞,SDS-PAGE及Western印跡法檢測pIRES-hpaA表達HpaA蛋白的免疫原性。最終成功擴增出長...
行業資訊;臨牀快報;消化系統脊髓性肌萎縮症患者骨骼肌中運動神經元生存蛋白表達量可能與疾病的嚴重程度相關
...究者構建pET-28a(+)/SMN原核表達質粒,誘導表達SMN-His融合蛋白,免疫新西蘭大白兔製備SMN多克隆抗體。構建pcDNA3.1/myc-HisB-SMN真核表達質粒並轉染中國倉鼠卵母(CHO)細胞。收集骨折患者以及I、Ⅱ、Ⅲ型SMA患者的骨骼肌組...
行業資訊;臨牀快報;神經科利用重組gp210融合蛋白檢測其抗體及其臨牀意義
...成功構建了PET-28a(+)-gp210重組體。並且將重組質粒轉化入大腸桿菌BL21(DE3)後得到表達蛋白,建立了免疫印跡法(IBT)和酶鏈免疫吸附試驗(ELISA)檢測方法。最後在50例PBC病人中檢出21例抗gp210抗體陽性,陽性率爲42%,而在其他肝病...
醫源資料庫;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2006年第6卷第18期突變和修飾IFN-α2b基因的5’和3’端對其在E.Coli表達的調控作用
...α2b基因進行突變和修飾,從翻譯水平上調控IFN-α2b基因在大腸桿菌中的表達。方法採用PCR技術,人工合成寡核苷酸引物,對人IFN-α2b基因進行了改造:在不改變氨基酸的前提下,將5’端編碼區的四個G、C位點突變爲A、T;去除3’...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學cDNA文庫構建策略及其分析研究進展
...酶Oligo(dT)引導下合成cDNA第1鏈,cDNA第2鏈的合成(用RNA酶H和大腸桿菌DNA聚合酶I,同時包括使用T4噬菌體多核苷酸酶和大腸桿菌DNA連接酶進行的修復反應),合成接頭的加入、將雙鏈DNA克隆到載體中去、分析cDNA插入片斷,擴增cDNA文庫...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組Egr-1介導的腫瘤基因—放射治療進展
...提高138%。曹雪濤等學者則將Egr-1基因的啓動子與人TNF基因融合,構建成射線可誘導的人TNF雙拷貝逆轉錄病毒載體pETDC,經過Psi-2和Crip包裝細胞包裝提高病毒滴度,然後感染小鼠成纖維細胞NIH3T3和黑色素瘤細胞株B16、F10,經G418抗性篩選...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代臨牀醫學雜誌;2007年第5卷第6期自殺基因TK聯合細胞因子FL真核表達載體的構建及其相關特性的研究
...10%小牛血清的DMEM中常規培養,轉染前一天換液,使細胞融合率達50%~80%。轉染前換無血清培養基並沖洗2遍。取pIRES-TK-FL質粒DNA4μl(0.5μg/μl)和脂質體10μl(1μg/μl),分別加到96μl和90μl無血清培養基中,混勻,室溫放置45min。...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學白細胞介素-2的研究進展及應用
...立cDNA文庫。所用質粒載體爲穿梭質粒pSV·SPORTI,它既能在大腸桿菌內增殖,又帶有SV40,複製原點及早期啓動子,能在COS-7細胞中瞬時表達,表達產物經生物學活性檢測,證明其有IL-2活性,經過兩輪篩選,共獲得14個陽性克隆。經...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學甲醇酵母基因表達系統的研究進展
摘要在大腸桿菌這一傳統表達系統被頻繁用作研究各種基因表達時,一種新型且有效的基因表達系統—甲醇酵母正逐漸引起人們的注意。此係統不僅具有高表達、高穩定、高分泌的特點,而且其宿主甲醇酵母—巴斯德畢赤酵母(...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;微生物學霍亂弧菌以thyA基因爲選擇壓力的染色體-質粒致死平衡系統的構建
...菌thyA基因突變菌株的篩選方法,繼而用PCR插入法克隆了大腸桿菌thyA基因全序列(pXXB106),並電擊轉化入霍亂弧菌thyA基因缺陷株(PL102),使後者在MM改良培養基上的生長恢復爲野生狀態。結果 選育出的thyA基因突變的霍亂弧菌IEM101...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學