可溶性TNF受體在大腸桿菌中表達
...切、連接、轉化大腸桿菌JM101,構成新的重組子pGK-sTNFR。重組質粒經XbalⅠ,TaqI酶切鑑定及採用雙脫氧鏈終止法對sTNFR進行DNA序列分析表明,所克隆的sTNFR基因與報道的一致(見圖1)。 圖1 pGK-sTNFR表達質粒...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學屎腸球菌透明質酸酶全長基因的克隆表達和免疫原性
...。方法採用PCR擴增hyl基因片段,克隆至pQE-30質粒上,構建重組質粒pQE-hyl,轉化E,coliDH5α,經異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導表達融合蛋白Hy1;Western印跡分析其免疫反應性。融合蛋白經鎳離子柱純化後,Hy1和屎腸球菌全菌...
行業資訊;臨牀快報;待分類信息乙型肝炎病毒X基因-丙型肝炎病毒C基因共表達對血管內皮細胞生長因子的影響
...後,將其插入到質粒PBK-CMV和PBK-HCVC的相應酶切位點,得到重組質粒PBK-X和PBK-X-C;再將質粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCVC和PBK-X-C分別導入肝癌細胞株HepG2中,G418篩選,逆轉錄聚合酶鏈反應、Westernblot鑑定HBVX和HCVC蛋白表達;免疫組織化學、We...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組轉基因造血幹細胞移植治療小鼠甲狀旁腺功能低下症的研究
...的PTH基因插入到逆轉錄病毒載體MSCV中,得到含PTH基因的重組質粒,並轉染PA317包裝細胞,以抗生素Geneticin篩選陽性克隆,獲得重組有PTH基因的濃縮病毒懸液,以其感染人臍血造血幹細胞,然後注入甲狀旁腺功能低下症模型小鼠血...
行業資訊;臨牀快報;器官移植髮狀分裂相關增強子-1對血管形成相關因子作用的實驗研究
...究者體外培養人臍靜脈內皮細胞(HUVEC),構建PcDNA3.1+HESR-1重組質粒、RNA干擾用pSIREN+HESR-1質粒。脂質體將這兩個質粒分別轉染到HUVEC,並以轉染空白質粒體作爲對照。在HUVEC內分別高表達HESR-1、下調HESR-1的表達,採用半定量逆轉錄-...
行業資訊;臨牀快報;待分類信息人乳頭瘤病毒16型(湖北株)E7基因逆轉錄病毒重組體的構建及在真核細胞中表達
...體片段,重組體命名爲pL(E7-HB)SN。將大量提取並純化後的重組質粒用磷酸鈣沉澱法導入生長在含10%小牛血清的DMEM培養液中的NIH/3T3細胞,收穫重組體轉染後不同時間的細胞,用RT-PCR和間接免疫熒光試驗檢測E7基因在3T3細胞中的表達...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學霍亂弧菌以thyA基因爲選擇壓力的染色體-質粒致死平衡系統的構建
...1;3.PCRproductsofasdgene(negativecontrol);4.ChromosomeDNAof395 圖3 重組質粒pXXB106酶切鑑定結果 Fig3.IdentificationofrecombinantpXXB106plasmidbyenzymedigestion 1.Marker:λDNA/HindⅢ;2.pXXB106;3.pUC18 6.PL103菌株的構建:將pXXB106電擊轉入PL102中,塗於MM...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學戊型肝炎病毒結構區基因的克隆表達及其在診斷中的初步應用
...盛(美國)生物工程公司DNA序列分析儀測定序列。 1.5 重組質粒的構建及鑑定 質粒提取、純化、酶切、連接、轉化及克隆篩選參照文獻〔3〕,或按Sureclone連接盒說明書操作。用快速鹼裂解法提取質粒DNA,經酶切分析篩選鑑定...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學乙肝疫苗
...是利用現代基因工程技術,構建含有乙肝表面抗原基因的重組質粒,可以用於預防所有已知亞型的乙肝病毒感染。現在用的基因工程乙肝疫苗爲乙肝重組脫氧核糖核酸酵母疫苗和重組牛痘病毒疫苗,劑量爲每支5微克。昔日使用...
醫源資料庫;醫源圖書館;疾病類;乙肝日記;關於乙肝我的忠告以白細胞介素-2爲免疫佐劑的幽門螺桿菌粘附素核酸疫苗製備及其免疫預防作用
...(PCR)技術從Hp標準菌株CCUG17874基因組DNA擴增HpaA基因;從重組質粒pCIneo—IL-2擴增小鼠IL-2基因,並通過TA克隆分別克隆人pUCmT載體。檢測HpaA及IL-2的核苷酸序列,酶切、連接反應將HpaA和IL-2同時克隆人真核表達載體pIRES,再經PCR法和...
行業資訊;臨牀快報;消化系統