新穎的融合蛋白表達系統
...在基因的前面有一個強啓動子和一個起始密碼子就足以在大腸桿菌中獲得很好的表達。隨後,認識到獲得有效的翻譯所需的條件要複雜得多,除了要有強啓動子和起始密碼子外,良好的表達尚需編碼目的蛋白的mRNA中含有核糖體...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術含前S基因的重組乙肝病毒表面抗原表達質粒的構建並在CHO細胞中表達
...,經第二次PCR擴增,獲得可完整表達乙肝病毒表面抗原的融合基因。分別以pcDNA3和pSV2載體構建真核細胞表達質粒,共轉染CHO細胞,表達產物用特定抗原酶聯免疫檢測和反向被動血凝實驗檢測。結果表明表達物具有完整乙肝病毒...
合作平臺;在線期刊;中華醫藥雜誌;2004年第4卷第8期;論著人血小板生成素在重組痘苗病毒中的分泌表達
...粒、M13mp18RF、M13mp19RF測序用質粒購自華美生物工程公司。大腸桿菌MC1061、JM109菌株由本室保存。 2.病毒和細胞:天壇株痘苗病毒和Tk-143細胞由本室保存。 3.工具酶和試劑:常用限制性內切酶購自華美生物工程公司。T4DNA連...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學基因工程技術在製藥領域的應用前景及產業化趨勢
...1972年,次年幾種不同來源的DNA分子裝入載體後被轉入到大腸桿菌中表達,標誌着基因工程正式登上歷史舞臺。 基因工程徹底改變了傳統生物科技的被動狀態,使得人們可以克服物種間的遺傳障礙,定向培養或創造出自然界...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生物工程下游技術第二節 基因治療
...靶細胞的方法很多,大致可分爲物理學方法、化學方法、融合法和病毒感染法四類。病毒法已在本節的“基因的轉運”中有基因介紹。目前較多使用的是脂質體法。表23-3DNA導入哺乳動物細胞常見的方法名稱機制轉染效率用途優...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;生物化學與分子生物學人IL-12的克隆、表達及生物活性的鑑定
...活性的人IL-12。 1 材料與方法 1.1 菌株與載體 大腸桿菌DH5α及表達載體pcDNA3.1(5.4kb)購自Invitrogen。逆轉錄病毒載體pLXPXSN(6.4kb)爲一雙基因表達載體,由NIH的RichardMorgan惠贈。 1.2 克隆質粒p35NKSF14-1-1 由ATCC提供,NotⅠ/...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學核酶在基因治療中的研究進展
...了希望。 4 核酶在抗白血病中的研究進展 bcr-abl融合基因編碼的具有異常蛋白酪氨酸激酶活性的p210蛋白是導致慢粒細胞白血病(Chronicmyoloidleukemia,CML)發生的主要原因。Daley等[17]對bcl-abc融合基因cDNA序列,在融合位點...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;遺傳學免疫毒素對胃癌細胞的特異殺傷
...毒素PE38表達質粒pYR39-1-PE38經HindⅢ/NedⅠ酶切、連接、轉化大腸桿菌BL21,構建免疫毒素的表達質粒pYR3H11-PPE38。轉化菌在IPTG誘導下,以包涵體的形式表達免疫毒素3H11-PE38,包涵體經SDS-PAGE電泳分析,其蛋白相對分子質量爲66×103左右...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學含有丙型肝炎病毒核心基因表達質粒的構建及其基因免疫
...部HCV基因序列],由美國Rice教授惠贈;pcDNA3真核表達載體和大腸桿菌菌種JM109由本室保存;質粒製備、含HCVC基因的真核表達重組質粒的構建見文獻[2]。 1.3 主要試劑及工具酶 HCVC抗原由軍事醫學科學院基礎所凌世淦教授惠贈...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學幽門螺桿菌hpaA核酸疫苗的構建及免疫原性檢測
...一系列酶切、連接反應將其克隆入真核表達載體pIRES,轉入大腸桿菌,篩選陽性克隆,通過PCR和酶切反應鑑定。並將構建好的重組載體pIRES-hpaA轉染COS-7細胞,SDS-PAGE及Western印跡法檢測pIRES-hpaA表達HpaA蛋白的免疫原性。最終成功擴增出長...
行業資訊;臨牀快報;消化系統