SARS冠狀病毒E蛋白基因克隆和分析
...連接並轉化E。coliJM109感受態細胞,藍白篩選陽性克隆,重組質粒用EcoRⅠ、SalⅠ雙酶切後經6%PAG凝膠電泳鑑定。1.5序列的測定及蛋白質結構分析將酶切鑑定的陽性克隆委託上海三博生物技術有限公司進行測序。所得序列通過Genbank...
合作平臺;在線期刊;中華中西醫雜誌;2004年第5卷第11期;臨牀醫學DNA“寄生蟲”提高細菌抗生素抗性的機制
...蛋白。通過引入與H-NS相似的stealth蛋白(Sfh),可以避免重組質粒對細胞中H-NS和DNA之間的天然平衡的干擾,幫助質粒逃避細菌的監測。Dorman教授說:“我們的工作提示細菌的適應性可以通過改變細胞中H-NS和DNA的比例進行操作,...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組NCLs致病相關基因CLN8酵母雙雜交誘餌質粒的構建及自激活作用的檢測
...段,與同樣酶切的pLexA載體連接構建成誘餌質粒plexA-cln8,重組質粒進行限制性酶切鑑定,用DNA測序儀進行測序(上海生工公司)。1.2.3酵母感受態細胞的製備從SD/-U平板上挑取單個EGY48(P8OP-LacZ)酵母克隆至1mlSD/-U液體培養基中,...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第24期;論著HPV11-E7與人干擾素α-2b融合表達質粒的構建及表達
...至原核表達載體pET-32a,進行酶切鑑定及DNA序列分析。將重組質粒轉染E.coliBL21,經IPTG誘導後對其表達產物進行SDS-PAGE和Westemblotting分析。結果測序結果表明將HPV11-E7和人IFNα-2b通過連接肽(G-G-S-G-S)3連接並克隆至pET-32a,且其基因序列...
行業資訊;臨牀快報;藥理學2型登革病毒核酸疫苗誘導的體液免疫研究
...(DV-2NGC株)及白紋伊蚊細胞本室保存。 1.2表達質粒重組質粒PSV·NS3及空質粒PSV·Sport1由澳大利亞Monash大學微生物學系PeterJ.Wright博士惠贈[5]。 1.3細菌大腸桿菌E.coliDH52本室保存。 1.4動物Balb/c小鼠購自中山醫科大學...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學第五節 基因序列導入細胞
...大腸桿菌經冰冷CaCl2的處理,就成爲感受態細菌,當加入重組質粒並突然由4℃轉入42℃作短時間處理,質粒DNA就能進入細菌;用高電壓脈衝短暫作用於細菌也能顯著提高轉化效率,這稱爲電穿孔(electroporation)轉化法。 二、...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;生物化學與分子生物學應用PRPL串聯啓動子表達HIV-2gag蛋白
...質粒,分別命名爲pBV-gag(5234bp)和pBV-gag’(4948bp)。 2.2 重組質粒的酶切鑑定 用EcoRI和EcoRV分別消化重組質粒pBV-gag和pBV-gag‘,分別得到0.54kb+4.686kb和0.54kb+4.408kb(正向插入)的酶切溶液,進行瓊脂糖凝膠電泳後照相。 2.3 gag...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學TβR-Ⅱ-RANTES融合基因重組腺病毒的抗腫瘤作用
...NTES基因,重疊PCR正確擴增融合基因TβR-Ⅱ胞外區.RANTES。重組質粒pDC316-融合基因經酶切鑑定正確,與pJM17雙質粒共轉染獲得表達融合基因重組腺病毒,病毒滴度爲8×10^10pfu/ml。Westernblot結果表明,感染後的LA795細胞有融合蛋白的...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關CD59融合蛋白表達載體構建及其在大腸桿菌中的表達
...共進行15個循環,最後一個循環72℃延伸5min。 1.4CD59重組質粒的構建質粒的提取、載體和目的基因片段的酶切、回收、連接、轉化及陽性克隆的篩選鑑定均參照《分子克隆》方法進行。DNA序列分析在ABⅠ373A型DNA自動測序儀上...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學丙型肝炎病毒DNA核酸免疫的初步探討
...研製奠定實驗基礎。 1 材料與方法 1.1 質粒 重組質粒pCD-HCV1、pCD-HCV2、pCD- HCV3分別含有HCV結構區基因片段1693、1695和1697,基因型爲OkamotoⅡ型,5.1kb。哺乳細胞表達質粒pCD-SRα1,含有SV40早期啓動子和HTLV-I型末端重複R...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學