抗人VEGF165單鏈抗體的構建與表達
...的表達,如圖3(a)。以anti—His(C—term)antibody爲一抗,辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠IgG爲二抗進行Western—Blot,結果顯示,重組克隆僅在26kD處着棕色,而空載和重組克隆未誘導沒有着色帶,這表明重組克隆確實表達了含有His6基因的VE...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學丹蔘對硬皮病成纖維細胞基質金屬蛋白酶1作用的研究
...金屬蛋白酶1抗體(Ⅱ抗),再孵育清洗,加入標有辣根過氧化物酶的Ⅲ抗,經孵育,清洗,加入反應底物(含四甲基聯苯胺),反應30min,用酶標儀選450nm和570nm讀取OD值,計算基質金屬蛋白酶1濃度。每一標本同時檢測兩次。最...
合作平臺;在線期刊;中華醫藥雜誌;2004年第4卷第6期;論著MMP2、MMP9及TIMP3在膀胱移行細胞癌中的表達及臨牀意義
...;30mL/L過氧化氫甲醇溶液室溫下孵育10min,以阻斷內源性過氧化物酶活性;山羊血清室溫下孵育20min;抗原微波熱修復(MMP2和MMP9還需採用胰蛋白酶消化);PBS洗後滴加一抗50μL,溼盒內4℃冰箱過夜,PBS洗;滴加SP試劑盒中生物...
醫源資料庫;在線期刊;現代泌尿外科雜誌;2007年第11卷第1期國內外標記免疫分析技術研究現狀
...間短的缺點,目前國外已實現自動化分析。 1.辣根過氧化物酶(HRP)-ELEIA:以第二抗體包被活化酶標板,將HRP和抗原結合。測定時將樣品、酶標抗原和第一抗體加至二抗板孔中溫育,洗滌後向孔內加發光底物(liminol-H2O2和對...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學酶聯免疫吸附試驗及其應用
...酶,一般用分子量爲5×105(AlkalinePhospatase,簡稱AP),辣根過氧化物酶(HorseRadishPeroxidase,簡稱HRP,分子量爲4×104),另外尚有葡萄糖氧化酶,β-半乳糖甙酶,糖化酶及乙酰膽鹼酯酶等等。其中以前兩種(AP和HRP)最爲常用。AP活力高...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學非諾貝特對大鼠主動脈MMP-9及PPARα表達影響
...α和MMP-9一抗4℃振盪過夜,TBS/T沖洗5min,共3次,加入辣根過氧化物酶標記的羊抗兔二抗常溫振盪孵育1h,TBS/T沖洗5min,共3次,ECL法顯影,凝膠影像分析儀測定蛋白條帶濃度後,計算各蛋白條帶和內參照的比值。 1.7統計學處理...
醫源資料庫;在線期刊;齊魯醫學雜誌;2006年第21卷第3期戊型肝炎病毒結構區基因的克隆表達及其在診斷中的初步應用
...包被Nunc板。封閉後加入待檢血清37℃溫育30min,再加辣根過氧化物酶標記的抗入IgG,加入TMB酶底物顯色,在450nm波長測定吸光度A值。 1.7 引物設計與合成 引物設計參照HEV緬甸株〔4〕及中國新疆株〔5〕序列。引物合成及純...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學延邊地區主要寄生蟲病的血清學調查
...37℃培養箱孵育60min。用PBST洗滌5次,加(1:50,000稀釋)辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人的IgG(USBiochemicalCooperation)100μl,在37℃培養箱孵育60min。PBST洗滌5次,加底物3,3,4,4’-四甲基聯苯胺(TMB)和0.1%H2O2,10min。用酶標儀(MK3型號,...
醫源資料庫;在線期刊;中華中西醫雜誌;2005年第6卷第19期抗人TNF-α單抗基因的克隆及鑑定
...培養上清,37℃1.5小時,0.05%的Tween-20/PBS洗3次,加入辣根過氧化物酶(HRP)標記抗M13,37℃1.5小時後,洗3次,OPD顯色。 7.人-鼠嵌合輕鏈、重鏈真核表達載體的構建:用EcoRⅤ和SalⅠ雙酶消化,將VL從pGEM-T上切下,克隆入pAG4622中...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學免疫分析法在獸藥殘留分析中的應用
...[9]將CLIA應用於脫脂乳中氯黴素(CAP)殘留的測定,使用辣根過氧化物酶標記抗原,結果顯示這種方法與傳統的酶免疫分析有相似的靈敏度(0.05ng/mL)和精確度,批內變異係數8%,批間變異係數20%,回收率爲87%~100%,檢測限爲0.1ng/mL~10ng/mL,均顯...
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