PSA基因擴增研究及其在覈酸雜交中的應用
...n終止反應。 1.3.4DIG標記PSAcDNA和PSAcDNA的PCR擴增dTTP是DNA聚合酶、Taq聚合酶、末端轉移酶和反轉錄酶的底物在PCR中,Dig-11-dUTP可以代替作爲Taq聚合酶底物的dTTP。Dig-11-dUTP結合到PCR產物,不僅實現了Dig-11-dUTP對DNA的標記,而且能高...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代影像學雜誌;2010年第7卷第2期第三節 PCR操作範例及反應體系的組成
....01ng/次引物1,2(各25bp,20μmol/L)[3,4]5.01.0μmol/L(100pmol)Taq聚合酶儲存液[2]0.52U/100μl總體積(pH8.3)100.0 石蠟油50~100.0 擴增條件:94℃60s,37℃60s,72℃120s,共25~30個循環。 注:[1]反應緩衝液[10×]含:100mmol/lTris-HClpH8.3(25℃)...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸2-2生物化學與分子生物學技術
...辨認出與探針互補的特殊核苷序列。 六、PCR技術 聚合酶鏈式反應(polymerasechainreaction,PCR)用於在體外將微量的目標DNA大量擴增,以便進行分析。 反應體系:①樣品DNA;②引物(primer),是人工合成的一對寡核苷酸...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;細胞生物學第三節 腫瘤細胞的代謝特點
...生長旺盛。 一、核酸代謝 腫瘤組織合成DNA和RNA的聚合酶活性均較正常組織高,與此相應,核酸分解過程明顯降低,故DNA和RNA的含量在惡性腫瘤細胞均明顯增高。DNA與細胞的分裂和繁殖有關,RNA與細胞的蛋白質合成及生長...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;病理學第二節 核酸(基因)探針目的核酸的製備技術
...mRNA爲模板,利用逆轉錄酶合成單鏈cDNA,再以大腸桿菌DNA聚合酶I合成雙鏈的結構基因。 (4)RNA探針。 二、目的核酸的擴增 在獲得特異的目的基因後,可用以下方法大量擴增製備:①用體外DNA重組技術與載體DNA相連...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸腸道病毒71型(EV71)3D聚合酶的生物化學分析
...了上海巴斯德研究所豐田哲也組關於腸道病毒71型(EV71)3D聚合酶生物化學分析的研究成果。近年來,EV71病毒引發的手足口病流行呈逐年上升的態勢。自2008年截至2010年底,超過340萬中國兒童感染手足口病,其中1384名患兒因嚴重並...
行業資訊;臨牀快報;消化系統捕捉神經幹細胞分化之重要調控蛋白的3D影像
...身體的所有組織中表現。當Scp1活化時,可以防止酵素RNA聚合酶II在神經細胞基因不該表現的區域如皮膚、肌肉和肝臟組織中,讀取和啓動這些神經細胞基因。在神經系統中,Scp1被關閉,使RNA聚合酶II可以有效地轉錄神經細胞的基...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞RNA干擾研究進展
...能與Dicer類似)的功能,在果蠅、線蟲中還有RNA依賴的RNA聚合酶(RNA-dependentRNApolymerase,RdRP)功能等[4]。siR-NA作爲引導序列,按照鹼基互補配對原則識別靶基因轉錄的mRNA,並引導RISC結合mRNA,隨後通過依賴於ATP的解螺旋酶解開...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第24期;綜述聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆
第一節概述PCR(PolymeraseChainReaction,聚合酶鏈反應)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA的方法.它包括三個基本步驟:(1)變性(Denature):目的雙鏈DNA片段在94℃下解鏈;(2)退火(Anneal):兩種寡核苷酸引物在適當溫度(50℃左右)下與模板上的目的...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術核酸檢測的革命:可替代PCR的犀利技術
...卻從未淡出我們的視野。英國TwistDxInc公司開發的重組酶聚合酶擴增(RecombinasePolymeraseAmplification,RPA),被稱爲是可以替代PCR的核酸檢測技術。以此爲基礎的TwistAmp?核酸擴增產品,能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞