重組質粒的連接、轉化及篩選
第一節概述 質粒具有穩定可靠和操作簡便的優點。如果要克隆較小的DNA片段(<10kb=且結構簡單,質粒要比其它任何載體都要好。在質粒載體上進行克隆,從原理上說是很簡單的,先用限制性內切酶切割質粒DNA和目的DNA片段,然...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術質粒DNA的純化
(一)聚乙二醇沉澱法質粒DNA 這裏介紹的方法(R.Tresman,個人通訊)已卓有成效地用於純化鹼裂解法制備的質粒DNA。 1)將核酸溶液[上頁步驟9)所得]轉入15mlCorex管中,再加3ml用冰預冷的5mol/LLiCl溶液,充分混...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術發展新技術應對新問題——首屆北京地壇感染病學術會議熱點掃描
...■DNA疫苗正在深入研究 DNA疫苗發展的物質基礎是細菌質粒。將插入了HIV基因的質粒注入動物體內,動物自身細胞就能製造出HIV蛋白,發揮疫苗作用。這種疫苗在室溫下比較穩定,並且在動物實驗中效果非常好,但是在包括人...
醫學教育;學術活動TNF-α的合成分泌機制不同於一般的分泌型蛋白
...S-TNF的產生機制及兩型TNF的關係。 材料與方法 1.質粒、菌株:質粒pGEM-3Zf購自美國Promega公司;重組質粒pBSK-S-TNF(僅包含編碼無“信號肽”的TNF結構基因序列),pBSK-TM-TNF(含編碼TNF結構蛋白的基因序列,包括“信號肽”),pBSK-S-TNF...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學丙型肝炎病毒DNA疫苗的研究進展
...很難被觀察到。Geissler[23]等人將GM-CSF,白介素2、4表達質粒和核心DNA聯合注射時,能夠導至抗核心的抗體產生率提高2~3倍。最容易檢測到的免疫反應是特異性的抗核心的CTL。Tokushige[24]等人在Balb/c小鼠體內免疫了1個野生型...
合作平臺;在線期刊;中華醫藥雜誌;2004年第4卷第5期;綜述我國研發出一批新獸藥和疫苗
...的一種疫苗,是利用病原的保護性抗原基因構建真核表達質粒,再將質粒DNA用肌肉注射或基因槍直接導入機體細胞,使外源基因通過機體內源性表達系統並提呈給免疫系統,誘發產生特異性的免疫應答。其主要成分不是基因表達...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞與傳染病抗爭:疫苗的應用與發展
...所謂核酸疫苗,是指將含有編碼某種抗原蛋白基因序列的質粒載體或基因序列作爲疫苗,直接導入受試動物細胞內,通過宿主細胞的轉錄系統轉錄並翻譯成抗原蛋白,誘導宿主產生對該抗原蛋白的免疫應答,從而使被接種者獲得...
藥品天地;專業藥學;藥學研究PTEN基因轉染對人膀胱癌細胞BIU87中PI3KAkt信號通路的影響
...Akt信號通路的作用。方法將攜有PTEN基因的重組真核表達質粒pBpPTEN轉化大腸桿菌DH5α並擴增,抽提純化質粒並進行酶切鑑定,pBpPTEN體外轉染BIU87細胞(pBpPTENBIU87),篩選穩定轉染的細胞並擴增培養,以轉染了空質粒pBp的BIU...
醫源資料庫;在線期刊;現代泌尿外科雜誌;2008年第12卷第5期重組人截短型胰島素樣生長因子1在大腸桿菌中的高效表達①
...白進行了鑑定。結果:獲得含人Des(1-3)IGF1基因的重組質粒,在大腸桿菌中高效表達出含凝血酶識別序列的MS2-Des(1-3)IGF1融合蛋白,該蛋白經凝血酶消化後純化可獲得與天然型一致的人Des(1-3)IGF1。結論:該方法是獲得人重...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學PNAS:第一次分離出磁感應細胞
...少一些細胞能“感應”到弱磁場,因爲它們體內組織彙總存在少量鐵物質。但是至今其中的機理,科學界還並不清楚。來自德國慕尼黑大學和英國劍橋大學的研究人員發表了題爲“Magneticcharacterizationofisolatedcandidatevertebratemagnetorec...
行業資訊;臨牀快報;細胞分子與蛋白質組