分子生物學實驗基礎知識
...轉化,稱competentcells。 ⒉質粒(如經基因重組建立的重組質粒,基因庫等)的轉化將competentcells(以美國BRL公司DH10B菌株爲例)置冰水浴。同時將Falcon2059(傳熱係數穩定)塑料試管置冰水浴。取100μl菌液(DH10B)於2059試管中...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;基本實驗技術;實驗技術人白細胞分化抗原CD59基因克隆及序列分析
...篩選,用EcoRI和BamHI酶切鑑定,得到含有目的基因片段的重組質粒。DNA序列分析按Pharmacia公司的T7Sequencekit說明書進行操作。 2 結果 2.1 Jurkat細胞總RNA的提取 我們選擇Jurkat細胞爲原材料抽提總RNA,電泳結果顯示不同批次...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學第二節 分子生物學實驗基礎
...轉化,稱competentcells。 ⒉質粒(如經基因重組建立的重組質粒,基因庫等)的轉化將competentcells(以美國BRL公司DH10B菌株爲例)置冰水浴。同時將Falcon2059(傳熱係數穩定)塑料試管置冰水浴。取100μl菌液(DH10B)於2059試管中...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;臨牀生物化學競爭性PCR內參照菌的構建及應用
...的製備(鹼裂解法)、質粒轉化(氯化鈣轉化程序)、含重組質粒的細菌菌落的鑑定、DNA限制性內切酶反應、DNA片段的分離及純化、外源DNA和質粒載體的連接反應等操作參照《分子克隆實驗指南》略作修改進行〔2〕。 DNA質...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學登革病毒E蛋白抗原基因肌肉注射誘導小鼠免疫應答的初步研究
...A3plasmid;4:WesternblottingofNIH3T3cellstransfectedbypcDNA3-Eplasmid圖2 重組質粒pcDNA3-E免疫後不同時間小鼠體內抗體水平 Fig.2 AntibodylevelofmiceafterimmunizationwithrecombinantplasmidpcDNA3-E圖3 重組質粒pcDNA3-E免疫後(8w)對T淋巴細胞的影響 Fig.3 T...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學微小隱孢子蟲重組BCG-CP15/60-23疫苗的構建及鑑定
...達載體pMV262結核桿菌熱休克蛋白(HSP)啓動子下游,構建重組質粒pMV262-CP15/60-23,用電穿孔將該質粒導入野生卡介苗(BCG-WT)構建微小隱孢子蟲CP15/60-23基因重組卡介苗。結果擴增出792bp的微小隱孢子蟲CP15/60-23基因片段,成功構建...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第6期中國東北地區HTLV-1的前病毒DNA測定及其意義
...測序PCR目的產物的回收,連接、轉化、感受態菌的製備,重組質粒的提取和酶切鑑定等技術以及核苷酸序列測定技術均見“分子克隆實驗指南”。 2結果2.1血清學檢測結果941份標本抗體檢測HTLV-1,3例強陽性,見表1。表1HTLV-1/2...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2005年第5卷第4期重組BMP4/7融合基因腺相關病毒的構建及其對兔骨髓基質幹細胞生物學行爲的影響
...增BMP4成熟肽序列,將BMP4基因克隆入pGEMT載體中,獲得重組質粒pGEMBMP4,然後用EcoRI和BamHI酶切pGEMBMP4質粒,回收酶切片斷。T4連接酶16℃過夜,轉化大腸桿菌,DH5α感受肽細胞,篩選陽性克隆,獲得pGMEBMP4,EcoRI、BamHI雙...
醫源資料庫;在線期刊;中國矯形外科雜誌;2008年第16卷第20期食品和水源微小隱孢子蟲18SrRNA鑑定方法研究
...:DNAmaker;1:A組對照;2~5:陽性樣品轉化菌液;6:B組對照 2.3重組質粒的酶切鑑定經EcoRI酶切後重組質粒在瓊脂糖凝膠上呈現兩條電泳帶,其中分子量大的電泳帶與PGM-T載體位置相同,分子量小的電泳帶則與目的基因片段大小相同(...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2006年第6卷第6期菌落PCR和質粒PCR對轉化菌的篩選
...爲建立簡便、可靠轉化菌的篩選方法。方法應用菌落PCR和重組質粒PCR方法對轉化菌進行篩選和DNA序列分析。克隆載體和表達載體篩選及鑑定採用與載體多克隆插入伍點序列互補的通用引物或免疫球蛋白家族特異性引物。陽性菌落...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學