第三節 DNA重組實驗中常用的技術
...配基隨機標記DNA探針法 (一)概述 基因診斷是以核酸分子雜交技術爲基礎,在核酸水平檢測人類遺傳性疾病的基因缺陷和一些傳染病病原體的方法。其基本過程是:製備DNA探針,標記探針,檢測樣本。開展這項工作的關...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸液相芯片技術的原理與應用進展
...準確、重復性好、操作簡便等衆多優點,可用作蛋白質和核酸等生物分子的高通量檢測平臺。本文簡要介紹其原理、優點,並對該技術在基礎研究、臨牀診斷等方面的應用進展作一綜述。【關鍵詞】液相芯片;Luminex;xMAP技術TheP...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2008年第3卷第3期高能X射線對肺腺癌A549細胞ERCC1表達的影響
...13.06,P0.05)。 3討論 ERCC1是一種高度保守的單鏈DNA核酸內切酶,位於染色體19q13.213.3,基因長度約爲15kb,其含有10個外顯子,編碼含297個氨基酸的蛋白質。ERCC1基因表達產物與DNA修復酶缺乏互補基因F(XPF)形成緊密異二聚體...
醫源資料庫;在線期刊;齊魯醫學雜誌;2010年第25卷第3期腫瘤分子遺傳學研究方法進展
...測序、突變檢測、基因篩選、基因診斷及幾乎所有的應用核酸雜交的領域[11]。 DNA芯片用於腫瘤生物學更是得力的武器,首先,它可以檢測腫瘤組織在表達上變化的基因。將已知的cDNA或其探針按前述方法在硅片或玻璃上列陣...
合作平臺;醫學論文;基礎醫學論文;細胞及分子生物學BPI23-Fcγ1重組融合蛋白在E.coli中的表達
...序按RT-PCR一步法試劑盒說明進行,即48℃逆轉錄45min,94℃變性2min後進行40個PCR循環。循環參數:94℃變性30s,53.5℃復性40s,72℃延伸45s,末次循環後再延伸5min。 取擴增產物在1.5%瓊脂糖凝膠中電泳。根據相對分子質量marker標...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學抗人P185erbB2單克隆抗體的製備及特性分析
...和表位分析。 1.4.3單抗識別抗原特性分析:分別以變性和復性形式的P185胞外區蛋白包被,常規間接ELISA法測定自制單抗與這兩種抗原的反應能力。WesternBlot是用復性後的P185胞外區蛋白在PAGE膠中分別進行非還原和還原電泳...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學基因突變檢測技術
...方法 1.RNA酶A切割(RnaseAcleavage)在一定條件下,異源雙鏈核酸分子RNA:RNA或RNA:DNA中的錯配鹼基可被RNaseA切割,切割產物可通過跑變性膠得到分離。RNA探針可通過將相應的DNA片段克隆至含有SP6或T7啓動子的載體中得到,當RNA探針上錯...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術輪狀病毒感染細胞蝕斑純化及感染性滴度測定
...取經4次傳代擴增的病毒液樣品,用酚-氯仿抽提提取病毒核酸,並檢測病毒基因RNA[4]。2結果2.1蝕斑的形成經病毒吸附,覆蓋第一層瓊脂及加蓋含有中性紅的第二覆蓋瓊脂1~2天后,細胞單層上可見明顯的蝕斑形成,斑呈圓型,...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代內科學雜誌;2008年第5卷第2期電針治療貝爾麻痹時發現電反應敏感度與療效成正比
...關面部肌肉進行刺激,以其電反應的差異推斷出面神經的變性程度,最終判定面神經損傷程度的方法。 電反應是電變性反應的簡稱。電變性反應是指周圍運動神經元因疾病或創傷而受損時,神經和肌肉對電刺激反應的量和質...
中醫中藥;中醫臨牀;臨牀討論人類基因治療找到新思路
...術是利用一段與靶序列相同的單導向RNA(sgRNA)來引導Cas9核酸酶對特異靶向DNA進行識別和切割,造成DNA的雙鏈或單鏈斷裂,然後,細胞會利用自身具備的兩種修復機制對斷裂的DNA進行修復,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源介...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組