綠色熒光蛋白標記的肝細胞生長因子穩定轉染內皮細胞株的建立
...達。爲HGF用於血管重建的基因治療提供實驗依據。方法由重組質粒PBSKSHGF中擴增出HGF基因,將其克隆到含增強型綠色熒光蛋白的真核表達載體EGFP-N1中,應用脂質體將重組質粒EGFP-N1-HGF轉染到人臍靜脈細胞株ECV304中,G418篩選獲得穩...
醫源資料庫;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2005年第5卷第22期hIL-16cDNA的克隆、測序及在E.coli中的表達與純化研究
...、測序與表達:利用E.coli表達載體pTrxFus,構建hIL16cDNA的重組質粒,轉化E.coli後,經色氨酸誘導,表達出相對分子質量(Mr)爲30000的可溶性融合蛋白,表達量佔菌體蛋白的30%。序列測定證實,此片段長393bp,確爲hIL-16cDNA。經一步...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學熒光定量RT-PCR快速檢測手足口病病原研究
...7500熒光定量PCR儀進行擴增,延伸階段收集熒光。 1.2.4重組質粒pGEM-TEasyVector的構建及鑑定 靶基因的擴增及純化:用EVF15’-GGCCCCTGAATGCGGCTAAT-3’,EVR15’-CACCGGATGGCCAATCCAA-3’進行普通RT-PCR。先將RNA逆轉成cDNA,然後按以...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第10期Fas和β-雌二醇受體融合基因在COS-7細胞中的表達
...列切除,並與經BstXI、KpnI酶切的mFas PCR產物連接,得到重組質粒pUC-SpmFas。質粒的酶切鑑定結果見圖2。用pUC18的正反向引物對pUC-SpmFas測序的結果見圖3。 圖2 序列分析的結果 Fig2 Sequencing analysis 1、2:SpmFas f...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學分子信標實時定量PCR法檢測胃癌中Survivin基因mRNA的表達*
...法設計Survivin基因特異性分子信標探針和引物,以cDNA克隆重組質粒爲標準品,建立Survivin基因實時定量檢測方法;並檢測胃癌樣本中Survivin基因mRNA的模板拷貝數。結果Survivin基因mRNA分子信標實時定量檢測方法的線性範圍爲103~1010...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2006年第6卷第6期HBsAg陽性卵巢腫瘤病人卵巢組織HBVDNA檢測
...侷限於動物實驗。張清健等[7]將小鼠卵母細胞與pBR322HBV重組質粒進行共培養後,證實卵子的透明帶不能成爲阻擋HBV進入的屏障,HBVDNA能夠通過它們和細胞膜,進入卵母細胞內並整合到染色體上。陳桂蘭等[8]將pBR322HBV重組質粒注射...
醫源資料庫;在線期刊;齊魯醫學雜誌;2008年第23卷第3期EphB2配體結合域基因片段的高效表達
...種DH5α,JM109本室保存。編碼EphB2胞外的配體結合區基因的重組質粒pGE42(又名phuc)本室構建[5];DNA重組所用各種限制性內切酶、T4DNA連接酶及Klenow片段,購自Borringer公司,純化質粒DNA所用的Kit(Wizard),DNA回收kit,IPTG,X-gal購自Promega...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學小鼠次級淋巴組織趨化因子基因的克隆及真核表達載體的構建ˇ
...72℃1min。共35個循環。將擴增產物插入pGEM-Teasy載體,構建重組質粒pGEM-Teasy-mSLC,由上海博亞公司完成插入片段序列的測定。 1.2.2真核表達載體的構建及鑑定先用限制性核酸內切酶NheI/EcoRV分別雙酶切質粒pCI/GPI-Fc-Sig和pGEM-Te...
合作平臺;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2004年第3卷第11期;論著rRTA:DS27免疫毒素的製備及胞內運輸研究
...具有很重要的意義。 1 材料與方法 1.1 材料 重組質粒pET3b-rRTA,抗CD5的單克隆抗體DS27,攜CD5抗原的Molt4細胞,BL21(DE3)菌株爲本室保存;CM-Sepharose購自Pharmacia公司。 1.2 方法 1.2.1rRTA的原核表達與鑑定 重組質...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學HCV核心區基因的截短及其表達
...行了分析。結果成功地構建了HCV核心抗原高效穩定表達的重組質粒,表達產物具有高度特異性和良好的抗原活性。結論該抗原的獲得爲研製診斷用HCV抗原奠定了基礎。【關鍵詞】HCV;核心區基因;截短;表達 Truncationandexpressiono...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫藥雜誌;2006年第6卷第11期