人FasL分子的克隆、表達及多抗製備
...流行病研究所免疫室,北京 100850)關鍵詞:FasL;融合蛋白;大腸桿菌表達;多克隆抗體 [摘 要] 目的 獲得人FasL蛋白,並對其功能進行初步研究。方法 用DNA重組法構建了FasLcDNA和谷胱甘肽轉硫酶融合原核表達質粒pG...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學多發性骨髓瘤特異APE1siRNA表達載體的構建及鑑定
...APE1siRNA表達載體pSilencerK-IE-IgP-APE1siRNA,觀察其對MM細胞APE1蛋白表達的特異性敲除作用。研究者設計合成的APE1siRNAcDNA序列與線性化pSilencer2.0-U6母本質粒連接後,用BamHⅠ、EcoRⅠ雙酶切,插入IgP寡核苷酸片段;隨後用EcoRⅠ酶切pSilence...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關RNA干擾文庫及其在功能基因組學研究中的應用
...與同源mRNA的特異配對,引導RISC特異地降解同源mRNA,導致基因表達的抑制。因此小片段的siRNA也可以誘導高效的基因沉默。 在線蟲,注射或餵食dsRNA能引起特異基因在動物各器官的沉默,而且該抑制作用可以持續到第一代的...
行業資訊;臨牀快報;RNA研究人胰腺癌hedgehog信號轉導途徑中PTCH基因的克隆與鑑定
...)爲了克隆人胰腺癌hedgehog信號通路中PTCH基因,構建PTCH基因表達載體並誘導融合蛋白表達。研究者從人胰腺癌細胞株SW1990抽提總RNA,經R-PCR擴增出PTCH基因,經純化、回收目的基因PTCH,將其插入表達載體PET22b,轉化E.coliBL21-CodonPlu...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關靶向IGF-1R的siRNA表達載體的構建及其對肺癌細胞有促凋亡作用
...mRNA的表達量分別爲(22.1±2.5)%和(80.1±3.9)%,蛋白的表達分別爲(15.2±3.1)%和(47.1±4.1)%,組間差異具有統計學意義(P〈0.05)。pENTR/U6-shRNA-1轉染組抑制了Akt的磷酸化,增加了3%乙醇誘導的細胞凋亡作...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關老年性癡呆的基因治療與神經生長因子
...因槍)等優點。但是直接導入的DNA通常難以整合入基因組,基因表達存在不穩定性,且在非分裂細胞中基因的轉染效率不高,使其應用受到限制。(2)病毒載體介導途徑即通過構建複製缺陷的重組病毒將靶基因引入體內。迄今爲止,病毒...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2005年第5卷第10期第二節 基因工程載體
...每個質粒DNA上都有複製的起點,只有ori能被宿主細胞複製蛋白質識別的質粒才能在該種細胞中複製,不同質粒複製控制狀況主要與複製起點的序列結構相關。有的質粒的可以整合到宿主細胞染色質DNA中,隨宿主DNA複製,稱爲附加...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;生物化學與分子生物學抗人TNF-α單抗基因的克隆及鑑定
...活表明無抗體活性。另一個輕鏈和重鏈可變區基因的成熟蛋白編碼部分與從第一骨架區引物所克隆的、可在大腸桿菌表達出抗體活性的Vκ、VH序列相符。將該輕鏈、重鏈基因分別克隆到了人-鼠嵌合輕鏈、重鏈表達載體中。結論 ...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學Kgla細胞免疫小鼠脾細胞scFv噬菌體展示文庫的構建及其表達
...1]。該技術是將抗體可變區基因與單鏈絲狀噬菌體衣殼蛋白基因融合,使scFv或Fab段可隨衣殼蛋白一起呈示表達於噬菌體的表面,通過簡便的吸附-洗脫-富集的篩選過程,而分離獲得特異性抗體可變區基因的新技術。人髓系白血...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學競爭性PCR內參照菌的構建及應用
...試劑:限制性內切酶、T4DNA連接酶、RNA酶A、TaqDNA聚合酶、蛋白酶K、IPTG、X-Gal及PCR裂解緩衝液購自華美生物工程公司,dNTP爲寶靈曼公司產品,85bpPCRMarker購自天象人公司,低熔點瓊脂糖(DNA級)和脈衝場級瓊脂糖爲Bio-Rad實驗室產...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學