乙型肝炎病毒e抗原的純化及其在人血清抗體檢測中的應用
【摘要】 目的 方法利用ZhouJian教授提供的重組質粒DNApBV220/eAg,轉染DH5α細胞,經30℃培養3小時,42℃培養6小時溫度誘導後,提取乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)。經DEAE-SepharoseFastFlow層折純化後免疫打點分析,收集陽性蛋白。經SDS-PAGE...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學人免疫缺陷病毒1(HIV-1)膜蛋白基因片段在酵母中的克隆表達
...方法 從人免疫缺陷病毒1(HIV-1)HXB2分離株原病毒基因組的重組質粒pHXB2中克隆了兩段膜糖蛋白基因(ENV)片段。以酵母穿梭誘導表達質粒pYES2爲載體,構建了兩個相應的重組表達質粒pYENV1和pYENV2;進一步利用大腸桿菌β-半乳糖苷酶基...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學豬流感病毒HA基因DNA疫苗的構建
...在哺乳動物細胞中有效表達並具有良好的生物學活性。將重組質粒三次免疫8w雌性Balb/c小鼠後,ELISA試驗和中和試驗結果表明該重組質粒能夠誘導小鼠產生較高的抗體滴度,並具有良好的中和活性。因此爲H1亞型豬流感DNA疫苗的研...
行業資訊;新聞專題;甲型H1N1流感;科研進展PAR-2基因在EBV轉化人胃上皮細胞中的作用
...本院腫瘤科;載體和細胞株:pcDNA3空載體質粒、pcDNA3-c-myC重組質粒及攜帶NEW基因的重組EBV產生細胞系Akata1061均爲廣州安必平生物科技有限公司提供;人胃上皮細胞系GFS-1由南方醫科大學腫瘤研究所提供;大腸桿菌HB101由安必平生物科...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代臨牀醫學雜誌;2012年第10卷第4期狂犬病毒糖蛋白及核蛋白在非複製型痘苗病毒天壇株中的共同表達
...中國預防醫學科學院病毒所提供,用於構建含有RN基因的重組質粒pNeoC′-11LacZ75RNK′,將LacZ與RN基因送至CK片段間,同時刪除C、K片段間與毒力和宿主範圍相關的基因。E.coliMC1061由中國預防醫學科學院病毒所遺傳室提供。 病毒...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學人基因治療研究和製劑質量控制技術指導原則
...建立和檢定 包括包裝和繁殖重組病毒的細胞庫和擴增重組質粒的工程菌庫。必須建立三級庫,即原始細胞庫(PrimarySeedBank)、種子細胞庫(MasterCellBank)和工作細胞庫(WorkingCellbank);或原始工程菌庫、種子工程菌庫和工作...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生物工程下游技術FAS配體(FASL)在COS-7細胞中的表達
...樣酶切並經鹼性磷酸酶(CIP)脫磷酸處理的PSVL連接,形成的重組質粒PSVL-hFASL即爲FASL的真核細胞表達載體。 1.4 PSVL-hFASL轉染COS-7細胞 用胰酶或0.025%的EDTA消化貼壁生長的COS-7細胞,取2×107細胞懸浮於0.5mlPBS(pH7.2)緩衝液中,加入20μg...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學HBVC區基因克隆和PCR條件優化
...挑選陽性質粒與MarkerⅥ在0.7%瓊脂糖凝膠中電泳,初步判定重組質粒大小正確。見圖1。 圖1HBVC區基因的質粒電泳圖(略) M:DNA標記MarkerⅥ;1,2:質粒DNA,片段長度爲10000bP 2.1.2酶切電泳爲進一步確定重組質粒的正確性,EcoRⅠ...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2007年第7卷第8期SET-EGFP重組表達質粒的構建及表達
...此基因片段克隆至相同酶切回收後的pEGFP-N2載體中,獲得重組質粒pEGFP-N2-SET。以LipofectamineTM2000爲載體,將構建好的真核表達質粒轉染到L-02肝細胞中進行瞬時表達。結果經DNA測序鑑定證實,pEGFP-N2-SET重組質粒構建成功,經熒光倒...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第5期第二節 分子克隆載體
...有對氨苄青黴素的抗性,這樣就可根據轉化子的抗性而把重組質粒轉化的細菌選出,然後擴增細菌,大量回收質粒DNA,從而達到大量擴增外源DNA的目的。 (二)真核生物中的質粒 真核生物中的酵母是國內外廣泛研究的載...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸