從棘突蛋白基因重組探討嚴重急性呼吸綜合徵冠狀病毒的來源
...制酶的基因相似程度均很高;而S基因的差異主要集中在S1片段,且該片段的C,C含量與SARS-CoV基因組的C,C含量明顯不同。進一步分析表明,由S1片段構建的冠狀病毒進化樹與由S2片段構建的進化樹存在拓撲結構上的不平行性。由此得...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組SET-EGFP重組表達質粒的構建及表達
...胞提取總RNA,以逆轉錄後cDNA爲模板,PCR擴增獲得SET基因片段,經雙酶切後回收得到有以上兩個酶切位點的SET基因片段,將此基因片段克隆至相同酶切回收後的pEGFP-N2載體中,獲得重組質粒pEGFP-N2-SET。以LipofectamineTM2000爲載體,將...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第5期血鏈球菌與nifs、nifu基因同源序列分析
...一定的特異性和穩定性的血鏈球菌ATCC10556染色體一800bpDNA片段進行基因序列分析。方法 採用TA克隆技術並進行鹼基序列測定,通過GeneBank進行同源分析。結果 ATCC10556DNA片段氨基酸序列含有與固氮酶nifs、nifu基因同源序列,同源...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學第十三章 基因診斷--第一節 基因診斷的原理
...,還可在體外人工合成鹼基數不多的與基因序列互補的DNA片段,稱爲寡核苷酸探針。 2.探針的製備進行分子突變需要大量的探針拷貝,後者一般是通過分子克隆(molecularcloning)獲得的。克隆是指用無性繁殖方法獲得同一個...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;醫學遺傳學基礎《自然免疫》報道上海生科院轉錄因子c-Fos/
...r,TCR)更具多樣性。TCR的多樣性是通過編碼其可變區的基因片段在重排酶RAG的介導下重排而產生的。TCRβ鏈可變區基因座由胚系V、D和J三組基因片段組成,在每個V片段的3′端,J片段的5′端以及D片段的兩端均含有保守的重排識別...
行業資訊;臨牀快報;免疫系統第五節 LDL-R基因突變的常用研究方法
...到了廣泛的應用。採用多種限制性內切酶切,以LDL-R基因片段和外顯子特異性片段作探針,進行雜交,再放射自顯影,對FH進行限制性酶切圖譜分析,可檢測FH患者的不同外顯子區域不同長度的部分缺失類型。 二、PCR法和核苷...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;動脈粥樣硬化我國弓形蟲病核酸疫苗研究概況
...用RT-PCR技術從弓形蟲cDNA文庫中擴增出編碼P35抗原的基因片段,構建了弓形蟲RH株表面抗原P35基因重組表達質粒P35/pGEX-21,並在大腸桿菌JMl09中成功表達了分子質量爲70kDa融合蛋白,該蛋白能爲谷胱甘肽S轉移酶(GST)單克隆抗體及...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2006年第6卷第8期乙型肝炎病毒S基因129Leu和145Arg變異株的抗原表達與DNA免疫研究
...變,分別爲nt540A→T,aa129Gln→Leu和nt587G→A,aa145Gly→Arg)片段,置換已知核苷酸序列並可表達及複製的HBV1.2個拷貝全基因野毒株重組質粒p3.8Ⅱ的S基因。將重組質粒轉染HepG2細胞,用Abbott試劑和24種單抗檢測轉染細胞培養上清中HBs...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學丙型肝炎病毒絲氨酸蛋白酶基因的克隆和表達
... 工具酶和試劑:AMV-RT酶、TaqDNA聚合酶、dNTP、Klenow大片段和限制性內切酶EcoRⅠ和XbaⅠ等均爲Promega公司產品。RNasin爲華美公司產品。 菌種和質粒:大腸桿菌DH5α爲本所保存,pBV220質粒由預防醫學科學院病毒研究所張智清教...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學人白細胞介素4在大腸桿菌中的優化表達①
...構建,將pLCM182用EcoRⅡBamHI酶切,製備成一平一粘的載體片段;同時PCR產物也經BamHI酶切製備成一平一粘的基因片段。兩個片段在T4DNA連接酶的催化下於16℃連接過夜,連接產物轉化DH5α感受態菌。挑取陽性轉化子作小量製備及酶切...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學