DNA重組實驗中常用的技術
一、質粒DNA的提取及鑑定 (一)質粒DNA的提取及鑑定 1.收穫細菌 (1)將2ml含相應抗生素的LB液體培養基加入到通氣良好的15ml的試管中,接入一單菌落,於37℃劇烈振盪培養過夜。 (2)將1.5ml培養物倒入1.5ml離心...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術TGF-β1基因轉染BMSCs後複合軟骨細胞共培養
...胞提供思路。方法6周齡健康雄性Wistar大鼠、擴增、提取質粒pcDNA3.1-TGF-β1,酶切、電泳鑑定並測序。實驗分組:TGF-β1基因轉染BMSCs組(A組)、單純BMSCs與軟骨細胞共培養組(B組)、TGF-β1轉染BMSCs後複合軟骨細胞共培養組(C組)、空白BMSCs...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代外科學雜誌;2010年第7卷第1期耐氨苄西林流感嗜血桿菌產β-內酰胺酶機制研究
...內酰胺酶的機制。方法:對臨牀分離的112株流感嗜血桿菌耐藥菌用紙片法作β-內酰胺酶測定,用PCR法檢測產酶流感嗜血桿菌中的β-內酰胺酶基因的存在。結果:紙片法測得產酶菌株32株,產酶率28.6%(32/112);32株產酶菌中PCR法測β...
合作平臺;醫學論文;內科學論文;感染與傳染病學大腸埃希氏菌的耐藥性變化
【摘要】目的瞭解小嬰兒肺炎大腸埃希氏菌分離株的耐藥性變化,指導臨牀用藥。方法通過痰培養分離菌株,再用藥敏實驗篩選抗生素,用統計學方法分析結果。結果大腸埃希氏菌對抗生素呈多重耐藥性,重視細菌培養、合理使...
合作平臺;在線期刊;中華醫藥雜誌;2004年第4卷第7期;論著鮑曼不動桿菌的耐藥表型及耐藥基因的表達
摘要:目的分析臨牀分離的鮑曼不動桿菌的耐藥表型及耐藥基因的表達狀況。方法用K-B瓊脂擴散法檢測鮑曼不動桿菌耐藥率,以ESBLs確證實驗和三維試驗檢測鮑曼不動桿菌的超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶產酶情況與變化。結果...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2006年第6卷第6期肺炎克雷伯菌的耐藥性分析
【摘要】目的瞭解肺炎克雷伯菌體外對抗生素的耐藥情況,爲臨牀診治提供參考。方法採用紙片擴散法(K-B)法對臨牀分離的肺炎克雷伯菌進行藥敏檢測,並用雙紙片法初篩、確證法檢測產超廣譜β-內酰胺酶(Extendedspectrumbeta-lac...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第6期丙型肝炎病毒絲氨酸蛋白酶基因的克隆和表達
...NA,Sanger雙脫氧鏈終止法測定其序列,與pBV220載體構建重組質粒,在大腸桿菌中表達,SDS-PAGE和Westernblot分析重組蛋白。結果 用RT-PCR方法擴增得到了HCV絲氨酸蛋白酶基因,序列分析表明其讀碼框架正確,絲氨酸蛋白酶活性中心高...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學hIL-16cDNA的克隆、測序及在E.coli中的表達與純化研究
...序與表達:利用E.coli表達載體pTrxFus,構建hIL16cDNA的重組質粒,轉化E.coli後,經色氨酸誘導,表達出相對分子質量(Mr)爲30000的可溶性融合蛋白,表達量佔菌體蛋白的30%。序列測定證實,此片段長393bp,確爲hIL-16cDNA。經一步滲透...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學266株銅綠假單胞菌臨牀分離株感染分佈與耐藥性分析
...摘要】目的探討銅綠假單胞菌臨牀分離株的感染分佈及其耐藥性。方法採用K-B紙片擴散法對臨牀分離銅綠假單胞菌進行抗生素敏感性測定。對我院1999年7月~2003年4月銅綠假單胞菌臨牀分離株感染分佈與耐藥性進行分析。結果共...
合作平臺;在線期刊;中華實用醫藥雜誌;2004年第4卷第3期;論著MicroScanAutoScan-4系統篩選超廣譜β-內酰胺酶的可靠性評價
...(ESBLs)的產生是導致革蘭陰性桿菌對β-內酰胺類抗生素耐藥的主要原因之一,同時也表現出對其它抗生素的多重耐藥性,使臨牀抗感染治療的選藥範圍受到限制,因此,臨牀微生物實驗室對產ESBLs菌株的檢出對臨牀合理用藥具...
合作平臺;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2004年第3卷第8期;論著