Southern雜交
...顯影曝光數天後,Southern雜交能很靈敏地檢測出低於0.1pg與32P標記的高比活性探針的(109cpm/μg)互補DNA。如果將10μg基因組DNA轉移到濾膜上,並與長度爲幾百個核苷酸的探針雜交,曝光過夜,則可檢測出哺乳動物基因組中1kb大小的單拷貝...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術美國藥典對現有殘餘DNA檢測技術的評價
...行了應用評價。雜交法可以序列特異性地檢測目標DNA,但32P標記的探針因爲存在半衰期短、放射等問題,實際應用並不廣泛。熒光標記的探針如果採用儀器讀取信號,雜交法理論上可以達到定量檢測要求的靈敏度,但是檢測時間...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞第三節 分子生物學實驗診斷技術
...。雜交反應的開始是碰撞,探針濃度高則速率增加,一般32P標記探記探針5-100ng/ml,非放射性探針25-1000ng/ml,原位雜交無論放射還是非放射物標記,一般都需0.1-5.0μg/ml。當探針過量時,雜交速率取決於探針長度,如一個100ng/ml20個...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;臨牀生物化學同位素技術三--放射防護
...射性同位素蓄積率高的組織或器官,必然受害嚴重,如[32P]對骨骼系統危害較大,[125I]和[131I]主要危及甲狀腺器官等。但是,由於射線與機體作用可產生電離,射線這種電離本領的大小,決定了當放射性物質進入了體內,對機體...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術90Sr敷貼器治療瘢痕疙瘩的臨牀應用
...不伴發γ射線[1]。供臨牀敷貼治療的放射性核素有32P、90Sr等。我們採用90Sr敷貼器。它的有效工作面積爲8cm2,表面吸收劑量率爲0.94Gy/min,半衰期爲28.5年,放射出的最大能量爲0.546兆電子伏特的β射線。衰變後成90Y,它的...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代臨牀醫學雜誌;2008年第6卷第7期BreastCancerResistanceProtein(BCRP/ABCG2)InducesCellularResistancetoHIV-1NucleosideReverseTranscriptaseInhibitors
...chfragmentwaslabeledwitharandomprimerlabelingkit(Stratagene,LaJolla,CA)and[32P]dCTP(ICNBiomedicals,CostaMesa,CA).Free[32P]dCTPwasremovedwithMicroSpinS-300HRcolumn(Amersham).RNA(1.5µg)waselectrophoresedonaformamidegelandtransferredtoamembrane(Hybond-N+;Amersham)in20×sodiumchloride-sodiumcitrat...
醫源資料庫;在線期刊;分子藥理學雜誌;2003年第63卷第1期EvidenceThattheCoactivatorCBP/p300IsImportantforPhenobarbital-InducedbutNotBasalExpressionoftheCYP2H1Gene
...ibedinthetwo-stepenhancedavianRT-PCRkit(Sigma).Thereactionmixwasspikedwith[32P]dCTPtoquantifyCYP2H1mRNAusing-actinasaninternalcontrol.PrimersequencesemployedwereCYP2H1,5‘-CACTGCAGGGAAAGCGGTCAAT-3‘;5‘-TGCTGGACTGTACTTACTGGACC-3‘,and-actin,5‘-CCTGAACCCCAAAGCCAACAGA-3‘;5‘-GGACTCCATACCCAAGA...
醫源資料庫;在線期刊;分子藥理學雜誌;2003年第63卷第1期用16SrRNA探針定量測定普氏立克次體在細胞內的繁殖量
...次體的正常細胞,按後述方法制備裂解物和提取總RNA,供試驗中的陰性對照用。 2.細胞裂解物的製備:取培養細胞(感染與未感染),去除培養上清,每個平皿(100mm)加入2ml細胞裂解液(含5mol/L硫氰酸胍,Sigma公司產品),用吸管吹...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學組織切片的原位雜交細胞化學方法
...等放在4℃冷房或冰箱內。曝光時間依同位素種類而異,32P大約需5~7日,3H需4周,但還要參考細胞內mRNA的含量而定,含量高者曝光時間宜短,反之宜適當延長。可根據不同曝光時間的實驗結果予以調整。曝光時間長可增加信號...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;細胞學技術第六節 診斷
...抗體檢測 1.酶聯免疫吸附法(ELISA);2.明膠顆粒凝集試驗(PA);3.免疫熒光檢測法(IFA);4.免疫印跡檢測法(WesternBlot,簡稱WB法);5.放射免疫沉澱法(RIP)。其中前三項常用於篩選試驗,後二者用於確證試驗。HIV感染後...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;基因診斷與性傳播疾病