酶聯免疫吸附試驗及其應用
...酶,一般用分子量爲5×105(AlkalinePhospatase,簡稱AP),辣根過氧化物酶(HorseRadishPeroxidase,簡稱HRP,分子量爲4×104),另外尚有葡萄糖氧化酶,β-半乳糖甙酶,糖化酶及乙酰膽鹼酯酶等等。其中以前兩種(AP和HRP)最爲常用。AP活力高...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學一種提高單克隆抗體產量的簡易方法
...上清(1μg/ml)由日本Fukushima醫學院Fujita博士惠贈。辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠IgG(工作濃度1∶1000),購自中山生物製品有限公司。 1.2培養基RPMI1640(Gibco產品),含2mmolL-谷氨醯胺,100U/ml青黴素,100μg/ml鏈黴素和10%F...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學艾滋病毒核酸檢測方法研究進展
...的微孔板裏,使Amplicons變性、雜交,加入抗生物素-辣根過氧化物酶(HRP)偶聯物,與生物素標記的Amplicon結合,最後加入HRP底物比色測定結合的Amplicon量。另外,該方法在樣本提取RNA前加入一已知濃度的內標(IS),同時起着樣...
合作平臺;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2004年第4卷第7期;論著PCR-微孔板反向雜交法檢測HBVDNA
...,NaCl5.47g,Na3C6H5O7·2H2O2.75g,加水至100ml。 1.1.4 辣根過氧化物酶標親合素 華美公司產品,用pH7.4PBS1∶150稀釋成酶應用液。 1.1.5 顯色液 pH5.0磷酸-檸檬酸緩衝液9.9ml,加入10g/LTMB0.1ml和30%H2O210μl。 1.1.6 雜交微孔板...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學第一節 自身抗體的免疫組織化學檢測方法
...酶標記A蛋白或抗人IgG抗血清,37℃,30min。 ⑤用辣根過氧化物酶底物顯色(同前述免疫酶法),室溫10min。 ⑥水洗。 ⑦0.1%伊文氏藍或蘇木精染色5min。 ⑧水洗,常規酒精脫水,透明封片。 結果:陽性爲棕色,...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸抗人纖維蛋白單鏈抗體的人源化
...抗C-myc單抗的9E10雜交瘤的腹水與scFv的C-myc位點結合,辣根過氧化物酶標記羊抗鼠IgG爲二抗,四甲基聯苯胺(TMB)爲底物。用0.4mol/L的硫酸終止反應後,酶標儀檢測450nm處的光吸收。 2 結果 2.1 DNA序列分析及推斷的氨基酸序...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學抗重組人血管生長素單克隆抗體的製備及鑑定①
...用10%小牛血清封閉,雜交上清爲一抗,羊抗鼠標記辣根過氧化物酶IgG爲二抗,以DAB系統顯色。 2 結 果 2.1 細胞融合及篩選 免疫小鼠脾細胞與SP2/0融合後,分別培養在96孔板和24孔板各2塊,1w後60%孔有雜交瘤細胞...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學第一節 免疫細胞化學技術在腎臟疾病中的應用範圍
...熒光技術的應用受一定的條件限制,1966年Nakane使用辣根過氧化物酶(HRP)代替熒光素對抗體進行標記,通過酶的顯示使抗原定位,稱爲酶標記抗體技術。其後,1969年Mason,1970年Sternberger又在基礎上發展了非標記酶抗體法。包括酶...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸A蛋白親和層析法純化動物血清抗體的效果比較
...室自制;HitrapProtein-ASepharoseaffinitycolumns(Pharmacia瑞典);過氧化物酶(簡稱HRP,RZ=3sigmaUSA)。 紫外分光光度計(BECKMANDU-600);電泳儀和電泳槽(北京六一儀器廠);酶聯免疫測定儀(BDSLImmunoskman340型);超濾器(MICON8010)...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學酶聯免疫吸附夾心法檢測血小板活化因子
...漿標本各20份。PAF標準品、雞卵清蛋白爲Sigma產品,辣根過氧化物酶(HRP,上海華美生物工程公司),硼氫化鈉等爲國產分析純試劑。DG-3022A酶標儀。96孔酶標板。 2.PAF抗體和酶標PAF抗體制備和鑑定:(1)參照文獻改良製備出PAF免疫...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學