第十六章 DNA的生物合成--第一節 DNA的複製
...另一條決定的。這就說明DNA的複製是由原來存在的分子爲模板來合成新的鏈。曾經有過多種關於DNA複製方式的學說,包括半保留複製,全保留複製以及分散複製等(圖16-1)。圖16-1 雙螺旋DNA的複製 一、DNA複製的方式及一般過...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;生物化學與分子生物學第四節 影響PCR的主要因素
...序列擬定的。下面就各種溫度的選擇作一介紹。 1.模板變性溫度變性溫度是決定PCR反應中雙鏈DNA解鏈的溫度,達不到變性溫度就不會產生單鏈DNA模板,PCR也就不會啓動。變性溫度低則變性不完全,DNA雙鏈會很快復性,因而...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸反覆凍融對熒光實時定量PCR質粒標準品的影響研究
...-1拷貝/μl~1.0×109拷貝/μl之間,取5μl標準品作爲模板進行實時定量PCR檢測。 1.2.4實時熒光PCR反應體系的建立反應體系爲25μl,取10×PCR緩衝液2.5μl、2.5mmol/LdNTPs2.0μl、25μmol/L上下游引物各0.5μl、5μmol/L探針0.5...
醫源資料庫;在線期刊;中華中西醫雜誌;2009年第10卷第10期《自然》解碼美基因組測序新“神器”
...的馬達是流量池,能夠儲存複製自測序樣本的億萬個體DNA模板。這些模板中的DNA被研究人員用熒光染料進行了標示,這樣就能被相機拍攝照片,成像結果能用於分析從而發現每個基板的同一性。但是,HiSeq2500同時也會隨機粉碎貫...
行業資訊;臨牀快報;遺傳與基因組寡核苷酸的優化設計
...當有50%的GC/AT比率。其實,這是不對的。以人基因組DNA爲模板,用81%AT的引物可以產生單一的,專一的,長250bp,含有70%AT的產物。完全沒有必要複雜地去計算產物和引物的解鏈溫度,PCR引物的GC/AT比率應當等於或高於所要放大的...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術PCR檢測方法
...外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由於吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。 二、PCR試劑的污染:主要是由...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜入門第二節 PCR技術的原理
...(95℃)下,待擴增的靶DNA雙鏈受熱變性成爲兩條單鏈DNA模板;而後在低溫(37~55℃)情況下,兩條人工合成的寡核苷酸引物與互補的單鏈DNA模板結合,形成部分雙鏈;在Taq酶的最適溫度(72℃)下,以引物3’端爲合成的起點,...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;實用免疫細胞與核酸直接裂解法提取製備模板核酸
標本(組織細胞,分泌物)加PBS或生理鹽水離心洗滌後,加消化裂解液20~50ul(0.5%NP-40和0.5%吐溫-20),95~98℃,15~30min以裂解病原體,裂解細胞.然後12000r/min離心5~10min,取上清20~30ul用於PCR擴增.血清標本可直加等體積的消化液,...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術流感病毒血凝素成爲新型抗微生物肽分子設計模板
流感病毒血凝素融合肽在病毒感染宿主細胞的過程中發揮關鍵作用。該功能域由20個左右的中等疏水的氨基酸組成。在膜環境下這些融合肽形成α-螺旋構象,插入受感染細胞膜以此介導病毒和宿主細胞膜的融合。在先前的研究中...
行業資訊;臨牀快報;流行病與傳染病DNA檢測:偉大而未知的新世界
...每次都給出明確的結果。 檢測中使用的是低拷貝模板或低拷貝數的DNA,這些樣本在檢測前的擴增往往伴隨着質量下降。混合DNA樣本也存在着類似的問題,因爲它包含了兩個或兩個以上人的遺傳物質,在比對前必須要將它...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞