CDH22基因克隆及其真核表達載體的構建與表達
...雙酶切及測序鑑定,將CDH22克隆至pCDNA3/HA,構建人CDH22基因的真核表達載體pCDNA3/HA-CDH22,轉染HEK293A細胞,用WesternBlot及免疫熒光細胞化學技術檢測目的蛋白的表達。結果成功擴增出人CDH22全長cDNA,雙酶切鑑定證實成功構建pCDNA3/HA-CDH...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第7期磷酸鈣細胞轉染技術
...的轉化產物。 [儀器、材料和試劑] 1 呈指數生長的真核細胞(如HeLa,BALB/c3T3,NIH3T3,CHO,或鼠胚胎成纖維細胞) 2 完全培養液(依所用的細胞系而定) 3 CsCl純化的質粒DNA(10~50μg/次轉染,二次純化) 4 2×HEPE...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;細胞學技術3-2-7真核生物的蛋白質生物合成
...nebacteriumdiptheriae)所產生的致死性毒素是研究得較爲清楚的真核細胞蛋白質合成抑制劑。白喉毒素是一種65KD的蛋白質,它不是由細菌基因組編碼的,而是由一種寄生於白喉桿菌體內的溶源性噬菌體β(phageβ)編碼的。該毒素只...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;分子生物學人端粒保護蛋白反義核酸抑制SGC7901胃癌細胞增殖
...選陽性克隆,用Western印跡法、MTT法、流式細胞儀、透射電鏡等技術觀察基因轉染後SGC7901細胞hPOT1蛋白的表達、細胞生長曲線、細胞週期、細胞凋亡及細胞形態學的變化。結果轉染了hPOT1反義核酸真核表達載體(pcDNA-as-hPOT1)的SGC7901...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關丙型肝炎病毒包膜蛋白E1研究進展*
...特性作了進一步研究,並在電子顯微鏡下作了觀察。免疫電鏡下可觀察到包膜糖蛋白定位在內質網膜上,說明HCV包膜的獲得是在內質網膜萌出的過程中實現的,這一點與其他被膜病毒也完全一致。從內質網萌出後,HCV可通過細胞...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學研究雜誌;2007年第7卷第2期清華大學顏寧教授Science再發重要新成果
...分離出了來自兔骨骼肌的Cav1.1複合物,並採用單顆粒冷凍電鏡技術藉助直接電子檢測和先進的圖像處理確定了它的結構。獲得這一僞四聚體真核生物Cav通道與其輔助亞基的複合物的詳細結構,爲認識相關通道的功能和疾病機制提...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞施一公團隊重大研究成果發表解答基礎生命科學核心問題
...。第一篇文章介紹了通過單顆粒冷凍電子顯微技術(冷凍電鏡)解析的酵母剪接體近原子分辨率的三維結構,第二篇文章在此結構的基礎上進行分析,詳細闡述了剪接體對前體信使RNA執行剪接的基本工作機理。 細胞是生物體...
醫藥經濟;生物技術;技術要聞含有丙型肝炎病毒核心基因表達質粒的構建及其基因免疫
...體和大腸桿菌菌種JM109由本室保存;質粒製備、含HCVC基因的真核表達重組質粒的構建見文獻[2]。 1.3 主要試劑及工具酶 HCVC抗原由軍事醫學科學院基礎所凌世淦教授惠贈;脂質體(Lipofectamine)、酶標抗體及限制性內切酶、連...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學登革病毒E蛋白抗原基因肌肉注射誘導小鼠免疫應答的初步研究
...於570nm波長測定吸光度(A)值。 2 結果 2.1 E基因的真核表達 重組真核表達質粒pcDNA3-E經脂質體轉染NIH3T3細胞,用含G418的DMEM培養液篩選培養20d後,有陽性細胞克隆的形成,轉染對照及空白對照的NIH3T3細胞則全部死亡。SDS-...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學抑癌基因PTEN對肝癌細胞增殖的抑制及作用機制
...的調控作用。研究者構建野生型PTEN基因和突變型PTEN基因的真核表達載體pEGFP-WT-PTEN和pEGFP-PTEN,G129R。採用脂質體介導的基因轉染法,分別將上述載體轉染不表達PTEN蛋白的人肝細胞肝癌細胞系HHCC,經G418篩選,獲得穩定表達PTEN蛋白...
行業資訊;臨牀快報;腫瘤相關