血清已糖 2012年03月07日修訂版

BY banlang

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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概述

糖原也屬於一種多糖,但其僅由葡萄糖構成。此外,人體內還存在少量果糖、乳糖、木糖、已糖等。

血清已糖醫學檢查

分類

血液生化檢查、糖類測定

原理

在已糖激酶催化下,葡萄糖和ATP發生磷酸化反應,生成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)與ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)催化下脫氫,生成6-磷酸葡萄糖酸(6-GP),同時使NADP還原成NADPH。反應式如下:

根據反應方程式,NADPH的生成速率與已糖濃度呈正比,在波長340nm監測吸光度升高速率,計算血清中已糖濃度。

試劑

(1)酶混合試劑的成分與濃度:

三乙醇胺鹽酸

緩衝液(pH7.5)  50mmol/L

MgSO4          2mmol/L

ATP            2.0mmol/L

NADP          2.0mmol/L

HK             ≥1500U/L

G6PD           2500U/L

根據試劑盒說明書復溶後,混合配製成酶試劑,置棕色瓶中放冰箱保存,約可穩定7天。

(2)5mmol/L已糖標準應用液:見GOD法。

操作方法

(1)速率法測定(以半自動分析儀爲例):

①主要參數:

係數      8.2

孵育時間  30s

監測時間  60s

波長      340nm

吸樣量    0.5ml

溫度      37℃

②加樣:37℃預溫酶混合試劑1000μl,加血清20μl,立即吸入自動分析儀,監測吸光度升高速率(△A/min)。

③計算:

(2)終點法測定:取16mm×100mm試管,按表1編號與操作。

以上各管充分混勻,在37℃水浴,準確放置10min,分光光度計波長340nm、比色杯光徑10mm,用蒸餾水調零,分別讀取各管吸光度(Au、Ac、As、Ab)。

附註:

(1)已糖激酶方法的特異性比葡萄糖氧化酶法高,是目前公認爲測定血糖的參考方法,適用於自動分析儀。輕度溶血、脂血、黃疸、維生素C、氟化鈉、肝素、EDTA和草酸鹽等不干擾本法測定。因爲從紅細胞釋放出的有機磷酸酯和一些酶能消耗NADP,故干擾本法測定。

(2)雖然根據NADPH的摩爾吸光度可以直接計算血清葡萄糖濃度(如Boehringer、Roche等試劑盒),但建議最好同時測定標準管和空白管(蒸餾水代替血清)。此時計算公式應爲:

正常值

6.74±0.07mmol/L(121.5±1.3mg/dl)。

臨牀意義

升高:肝硬化、慢性肝炎。

相關疾病

肝硬化

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